一种1-Boc-4-氨基哌啶的质量检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及质量检测技术领域，具体而言，设及一种l-Boc-4-氨基赃晚的质量检 测方法。
【背景技术】
[0002] 酒石酸西尼必利片kinitapride)为西班牙Almirall Prodes化rma药厂开发的苯 甲酯胺类衍生物，于1990年4月在西班牙批准上市，适用于胃动过缓引起的胃肠道不适。
[0003] l-Boc-4-氨基赃晚为合成酒石酸西尼必利的重要原料，其中含有N-Boc-4-赃晚酬 和N-Boc-4-径基赃晚等杂质。因 l-Boc-4-氨基赃晚、N-Boc-4-赃晚酬及N-Boc-4-径基赃晚 的紫外吸收弱、极性较强，所W导致l-Boc-4-氨基赃晚、N-Boc-4-赃晚酬及N-Boc-4-径基赃 晚在高效液相色谱中难分离而不易检测l-Boc-4-氨基赃晚的质量含量。
【发明内容】
[0004] 为了解决上述问题，本发明的目的在于提供一种l-Boc-4-氨基赃晚的质量检测方 法，W使l-Boc-4-氨基赃晚、N-Boc-4-赃晚酬和N-Boc-4-径基赃晚具有良好的分离度，而便 于快速、准确、灵敏地对l-Boc-4-氨基赃晚进行质量含量分析。
[0005] 本发明所采用的技术方案为：
[0006] 一种1 -Boc-4-氨基赃晚的质量检测方法，包括W下步骤:精密称取供试品1 -Boc- 4-氨基赃晚，用溶剂溶解后制备成供试品溶液;将所述供试品溶液注入高效液相色谱仪中 进行测定；
[0007] 色谱条件:流动相A为乙腊，流动相B为20mmol/L的憐酸氨二胺水溶液;梯度洗脱， 流速为〇.8-1.21111/111111;色谱柱的柱溫为25-35°(：;检测器的检测波长为21〇11111。
[000引因 l-Boc-4-氨基赃晚、N-Boc-4-赃晚酬和N-Boc-4-径基赃晚在210nm处具有最大 吸收波长，因此，检测器的检测波长为210nm。其中，检测器优选为二极管阵列(DAD)检测器， 其可W同时进行横向检测和纵向检测，并可W用于峰纯度的检测。
[0009]流动相A为乙腊，流动相B为20mmol/L的憐酸氨二胺水溶液，并W0.8-l.2ml/min的 流速进行梯度洗脱，且柱溫为25-35Γ，从而可W使l-Boc-4-氨基赃晚、N-Boc-4-赃晚酬和 N-Boc-4-径基赃晚具有良好的分离度，并快速洗脱。
[0010]因此，上述质量检测方法可W准确、快速、灵敏地检测出I-Boc-4-氨基赃晚、N- Boc-4-赃晚酬和N-Boc-4-径基赃晚的质量含量而完成l-Boc-4-氨基赃晚的质量含量分析， 确保其纯度符合要求。
[0011] 而且上述质量检测方法还具有良好的精密度及耐用性。
[0012] 其中，流速优选为Iml/min，柱溫优选为30°C
[0013] 进一步，所述梯度洗脱的程序为:0分钟时，所述流动相A与所述流动相B的比例为 77-87:18; 15分钟时，所述流动相A与所述流动相B的比例为55-65:40; 18分钟时，所述流动 相A与所述流动相B的比例为55-65:40; 18.1分钟时，所述流动相A与所述流动相B的比例为 77-87:18。
[0014] 其中，优选地，所述梯度洗脱的程序为:0分钟时，所述流动相A与所述流动相B的比 例为82:18; 15分钟时，所述流动相A与所述流动相B的比例为60:40; 18分钟时，所述流动相A 与所述流动相B的比例为60:40; 18.1分钟时，所述流动相A与所述流动相B的比例为82:18。
[0015] 通过上述梯度洗脱的程序，可W快速对l-Boc-4-氨基赃晚、N-Boc-4-赃晚酬和N- Boc-4-径基赃晚进行快速分离，从而缩短上述质量检测方法的检测时间。
[0016] 进一步，所述供试品溶液的进样量为10化，所述供试品溶液的浓度为l-5mg/ml。
[0017] 其中，优选地，所述供试品溶液的浓度为3mg/ml。
[001引进一步，所述色谱柱为Kromasi 1苯基色谱柱，所述色谱柱的内径为4.6mm，长度为 250mm;所述色谱柱的填料颗粒的直径为如m。
[0019] 上述质量检测方法，供试品中的l-Boc-4-氨基赃晚的检测限为0.284ng，定量限 为：3.485ng; N-Boc-4-赃晚酬的检测限为0.286ng，定量限为7.186ng; N-Boc-4-径基赃晚的 检测限为〇.295ng，定量限为2.1(K)ng。其中，检测限和定量限的计算方法同现有的方法而不 做详细说明。
[0020] 进一步，所述溶剂为甲醇。
[0021] 在通过高效液相法进行质量含量分析时，样品可W分别选用水、乙腊、甲醇或丙酬 等多种溶剂进行溶解;其中，根据l-Boc-4-氨基赃晚的性质优选为甲醇。
[0022] 本发明的有益效果：
[0023] 本发明所提供的1 -Boc-4-氨基赃晚的质量检测方法，使1 -Boc-4-氨基赃晚与其中 杂质N-Boc-4-赃晚酬和N-Boc-4-径基赃晚具有良好的分离度，而便于快速、准确、灵敏地对 l-Boc-4-氨基赃晚进行质量含量分析。
【附图说明】
[0024] 图1为l-Boc-4-氨基赃晚、N-Boc-4-赃晚酬和N-Boc-4-径基赃晚的出峰图；
[0025] 图2为实施例1中的l-Boc-4-氨基赃晚的浓度与峰面积线性图；
[0026] 图3为实施例1中的N-Boc-4-赃晚酬的浓度与峰面积线形图；
[0027] 图4为实施例1中的N-Boc-4-径基赃晚的浓度与峰面积线形图；
[00%]图5为实施例2中的l-Boc-4-氨基赃晚经酸破坏后的图谱；
[0029] 图6为实施例2中的l-Boc-4-氨基赃晚经碱破坏后的图谱；
[0030] 图7为实施例2中的l-Boc-4-氨基赃晚经氧化破坏后的图谱；
[0031 ]图8为实施例2中的1 -Boc-4-氨基赃晚经自然光破坏后的图谱；
[0032] 图9为实施例2中的l-Boc-4-氨基赃晚经高溫破坏后的图谱。
【具体实施方式】
[0033] 实验仪器：Agilent 1100高效液相色谱仪，Agilent 1100DAD检测器，Kromasil liternity-5-Pheny色谱柱(色谱柱内径4.6mm，长度250mm，填料颗粒直径如m)。
[0034] 实验药品：憐酸氨二胺、乙腊(色谱级）、二次蒸馈水、l-Boc-4-氨基赃晚对照品、N- Boc-4-赃晚酬对照品、N-Boc-4-径基赃晚对照品。
[00；3日]化合物储备液的配制：精密称取l-Boc-4-氨基赃晚对照品24.83mg、N-Boc-4-赃晚 酬对照品24.70mg和N-Boc-4-径基赃晚对照品24.52mg分别于不同的5ml的容量瓶中，加甲 醇溶解并稀释至刻度，摇匀，定容，然后将各化合物储备液放于冰箱中冷藏保存备用。
[0036] 实施例1
[0037] 精密量取各化合物储备液适量于同一容量瓶中，分别配置成0.2如g/ml~0.4mg/ ml浓度的溶液，并分别编号为1 -7。
[0038] 其中，编号1的溶液中，含l-Boc-4-氨基赃晚0.2祉g/ml，N-Boc-4-^基赃晚0.2祉 g/ml。
[0039] 编号2的溶液中，含l-Boc-4-氨基赃晚9.36μg/ml、N-Boc-4-^基赃晚9.51μg/ml、 N-Boc-4-赃晚酬 1.20μg/ml。
[0040] 编号3的溶液中，含l-Boc-4-氨基赃晚37.44μg/ml、N-Boc-4-^基赃晚38 . ο化g/ ml、N-Boc-4-赃晚酬 4.81μg/ml。
[0041 ] 编号4的溶液中，含l-Boc-4-氨基赃晚93.60μg/ml、N-Boc-4-?基赃晚95.1化g/ ml、N-Boc-4-赃晚酬12.0：3μg/ml。
[0042] 编号5的溶液中，含l-Boc-4-氨基赃晚 187.20μg/ml、N-Boc-4-^基赃晚 190.24yg/ ml、N-Boc-4-赃晚酬 24.0 化g/ml。
[0043] 编号6的溶液中，含l-Boc-4-氨基赃晚280.80μg/ml、N-Boc-4-^基赃晚285.36yg/ ml、N-Boc-4-赃晚酬 36.0 化g/ml。
[0044] 编号7的溶液中，含l-Boc-4-氨基赃晚374.40μg/ml、N-Boc-4-?基赃晚380.4祉g/ ml、N-Boc-4-赃晚酬 48.1 化g/ml。
[0045] 将上述编号的溶液分别W10化的进样量注入到液相色谱仪，每个编号的溶液检测 Ξ次，记录色谱图，并统计各化合物的峰面积，计算平均峰面积W及相对标准偏差(RSD)。
[0046] 高效液相色谱法