一种烟草及烟草制品中马来酰肼残留量的检测方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及痕量分析技术领域，具体涉及一种烟草及烟草制品中马来酰肼残留量 的检测方法。
【背景技术】
[0002] 马来酰肼农药作为一种植物生长调节剂，经植物吸收后可以通过抑制细胞分裂而 抑制植物生长。在烟草生产过程中马来酰肼农药一般用来作为烟草抑芽剂使用，因此导致 部分马来酰肼在烟草内部出现积累和残留。
[0003] 国际烟草科学研究合作中心(C0RESTA)于2003年12月提出了烟草中99种农药的指 导性残留限量(GRLs，Guidance Residue Levels)，并于2008年和2013年进行了两次增补和 修订，最新版本中对马来酰肼农药的残留限量值为80mg/kg。
[0004] 现有技术中，对烟草中马来酰肼农药残留分析的检测方法主要有分光光度法、胶 束液相色谱法、气相色谱法和液相色谱法等。
[0005] 授权公告号为CN 101876649B的发明专利文献公开了 一种烟草或烟草制品中马来 酰肼残留量的测定方法，其主要步骤为:对样品采用盐酸溶液加热回流萃取，用C18固相萃 取小柱净化，再采用氢氧化钠溶液洗脱得到样品溶液，然后利用高效液相色谱采用外标法 测定样品中马来酰肼的残留量。
[0006] 现有的行业标准YC/T405.5-2011采用液相色谱法进行分析，前处理操作较为繁 琐，包括盐酸溶液回流萃取，过滤之后定容，固相萃取后定容等，而且紫外检测器对马来酰 肼的灵敏度并不高，所以导致低浓度的目标物检测偏差较大。
【发明内容】
[0007] 本发明提供了一种烟草及烟草制品中马来酰肼残留量的检测方法，能快速、准确 检测出烟草及烟草制品中的马来酰肼农药残留，且测定结果准确、重复性好。
[0008] -种烟草及烟草制品中马来酰肼残留量的检测方法，包括：
[0009] 步骤1，对烟草样品进行前处理，得到待检测样品；
[0010]步骤2,以氘代马来酰肼水溶液为内标溶液，利用液相色谱串联质谱仪对待检测样 品进行测量，依据标准曲线和测量结果，计算得到待检测样品中的马来酰肼残留量。
[0011] 所述的烟草样品包括烟草以及含有烟草的烟草制品。本发明中，利用液相色谱串 联质谱(LC-MS/MS)仪测量烟草及烟草制品中的马来酰肼残留量，前处理步骤简单，检测结 果准确。
[0012] 作为优选，前处理包括以下步骤：
[0013] 将烟草样品、内标溶液、盐酸溶液混合均匀，加热回流1~2h，冷却至室温后，过 0.45μπι水相滤膜得到待检测样品。
[0014] 作为优选，内标溶液中氘代马来酰肼的浓度为l〇〇yg/mL。
[0015] 作为优选，盐酸溶液的浓度为2mol/L，每克烟草样品中加入0.1~0.2mL内标溶液 和30~50mL盐酸溶液。
[0016]进一步优选，盐酸溶液的浓度为2m〇VL，每克烟草样品中加入0 . lmL内标溶液和 40mL盐酸溶液。
[0017] 作为优选，利用液相色谱串联质谱仪对待检测样品进行测量时的工作参数如下：
[0018] 液相色谱条件:柱温:30°C ;流动相:A相:质量分数为0.1 %甲酸水（甲酸为溶质，水 为溶剂），B相:质量分数为0.1 %甲酸甲醇（甲酸为溶质，甲醇为溶剂）；流动相梯度为:0min ~8min，95%A;8 ~15min，70%A;15~15.1min，70%A;15.1~20min，10%A;20~20.1min， 10%八 ;20.1~30111丨11，95%厶;30111丨11，95%八;流速为0.31111711^11 ;进样量：541^
[0019] 质谱条件：正离子电喷雾电离模式；电喷雾电压4000V;离子源温度400°C ;雾化气 压力50psi;扫描方式为多反应监测。
[0020] 为了保证标准曲线具有良好的线性，并能够涵盖通常所需的测量范围，优选地，制 作标准曲线的系列标准工作溶液的浓度依次为：20ng/mL、50ng/mL、100ng/mL、200ng/mL、 500ng/mL、1000ng/mL。
[0021 ]制作标准曲线时，每个标准工作溶液中加入0. lmL内标溶液。
[0022]与现有技术相比，本发明提供的烟草及烟草制品中马来酰肼残留量的检测方法具 有以下优点：
[0023] (1)采用LC-MS/MS进行检测，简化了现有技术中的样品前处理方法，并能提供更准 确更稳定的测定结果。
[0024] (2)本发明方法样品前处理过程中，延续了盐酸加热回流萃取的提取方法，保证提 取过程的有效性，同时省去了盐酸溶液过滤定容以及固相萃取等步骤，可节省操作时间。 [0025] (3)本发明方法采用了高灵敏度和强抗干扰能力的LC-MS/MS进行检测，具有操作 准确、灵敏度高及重复性好的优点。
[0026] (4)本发明方法采用了氘代马来酰肼做内标进行定量，可减小基质效应对质谱测 定的影响，而且可消除体积变化的影响。
【具体实施方式】
[0027] 结合以下实施例对本发明做进一步描述，但并不是限制本发明。
[0028] 实施例1 [0029]仪器与试剂
[0030] 农药：马来酰肼，内标:d2_马来酰肼(氘代马来酰肼），均为标准品；甲醇为色谱纯 试剂;纯水，符合GB/T6682中一级水的要求;盐酸溶液(杭州双林化工试剂厂），配制成2mol/ L备用。
[0031 ] 美国ABQTRAP5 500液相色谱-三重四极杆串联质谱仪（LC-MS/MS );瑞士 MettlerToledoXP205电子天平(感量:0.0001g);电加热套（型号SD-2000-6,北京圣达共创 科技公司）。
[0032] -种烟草及烟草制品中马来酰肼残留量的检测方法，包括以下步骤：
[0033] (1)配制内标溶液
[0034] 配制氘代马来酰肼浓度为100yg/mL的水溶液作为内标溶液。
[0035] (2)样品制备
[0036] 称取1. Og烟草样品于250mL圆底烧瓶中，然后向该圆底烧瓶中加入0. lmL内标溶液 和40mL盐酸溶液(浓度为2M)，将圆底烧瓶放入电加热套中，装上球形冷凝管，连续加热回流 lh〇
[0037] 回流完毕后冷却至室温，取上层清液0.4mL用水稀释至lmL，过0.45μπι水相滤膜后 得试样萃取液，作为待检测样品。
[0038] (3)准备标准工作溶液
[0039] 称取0.010g