一种检测苹果和土壤中虱螨脲残留的快速分析方法
【技术领域】
[0001] 本发明公开了一种检测苹果和±壤中風蛾脈残留的快速分析方法，属分析检测技 术领域。
【背景技术】
[0002] 風蛾脈（lufenuron)(结构式如图1)是瑞±诺华公司开发的最新一代取代的苯甲 酷脈类的杀虫剂，化学名称为N-[[巧，5-二氯-4- (1，1，2, 3, 3, 3-六氣丙氧）苯基]氨基] 簇基]-2, 6-二氣苯甲酯胺，其化学结构见图1。该药剂通过抑制祀标昆虫几下质合成，阻 止脱皮过程而杀死害虫，对幼虫及卵有较好药效。该产品比有机憐、氨基甲酸醋类农药更 安全，且能够有效的控制对菊醋类和有机憐有抗性的鱗翅目害虫，因而被广泛用于蔬菜、果 树、棉花、玉米等作物上鱗翅目害虫的防治。同时，其在农产品及环境中的残留也日益引起 人们的关注。多个国家制定了風蛾脈在不同作物中最高残留限量（MRL)，如日本规定相橘类 中为0. 3mg/kg，意大利规定巧樣中为0. 5mg/kg，己西规定棉巧中0. 05mg/kg，韩国规定大白 菜中为0. 2mg/kg，欧盟规定風蛾脈在苹果中MRL值为0. 5mg/kg。而我国尚未制定風蛾脈在 各种作物中的MRL值。
[0003] 目前对風蛾脈药物残留的检测主要采用液相色谱法0PLC)和液相色谱-串联质 谱法化C-MS/M巧。液质联用技术虽然有定性准确，定量灵敏度高的优点，但价格昂贵，不宜 在普通实验室推广使用。对風蛾脈残留状况的研究的液相方法，近年来国内外报道的有在 棉花、甘蓝、番茄和菜豆中的残留分析方法。液相方法对前处理要求比较高，不同基质中相 同农残检测的前处理方法差别较大，已报道的方法有些前处理步骤比较繁琐，有些仪器方 法耗时较长。苹果基质相对干净，农残检测干扰物主要是糖和有机酸，运些物质对非极性较 弱的农药干扰较大，特别是使用质谱检测时会有较大基质效应。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供一种检测苹果和±壤中風蛾脈残留的快速分析方法，利用 超高效液相色谱快速，分离度，灵敏度高的特点，针对苹果和±壤基质，优化了前处理和色 谱分离条件，建立了風蛾脈残留检测的简便、快速、灵敏的分析方法，为風蛾脈在苹果上的 安全、合理使用及环境安全评价提供科学基础。 阳0化]本发明的技术方案是：
[0006] 一种检测苹果和±壤中風蛾脈残留的快速分析方法，其特征是，包括W下步骤：
[0007] (1)样品前处理
[0008]称取苹果或±壤样品于离屯、管中，加入乙腊，高速匀浆提取或者超声提取，将液体 过滤至装有氯化钢的具塞量筒，再将离屯、管中的残渣加入乙腊重复提取一次，将溶液也过 滤至上述装有氯化钢的具塞量筒，振摇，静置，取上清液于平底烧瓶，浓缩近干，用甲醇洗涂 上述平底烧瓶，得洗脱液，再加入超纯水混匀洗脱液，过0. 45ym微孔滤膜，即得待测样品， 直接上机检测；
[0009] 似将步骤（1)得到的待测样品用超高效液相色谱进行测定。
[0010] 进一步的，包括W下步骤：
[0011] (1)样品前处理
[0012] 若样品为苹果，则此步骤为：称取苹果样品于离屯、管中，加入乙腊，高速匀浆 0.5min，离屯、3min，将上清液过滤至装有氯化钢的具塞量筒，再将离屯、管中的残渣加入乙 腊重复提取一次，将提取液也过滤至上述装有氯化钢的具塞量筒，振摇，静置，取上清液于 平底烧瓶，浓缩近干，用甲醇洗涂上述平底烧瓶，得洗脱液，再加入超纯水混匀洗脱液，过 0. 45ym微孔滤膜，即得待测样品；
[0013] 若样品为±壤，则此步骤为：称取±壤样品于离屯、管中，加入乙腊，超声20min，将 超声提取液过滤至装有氯化钢的具塞量筒，再将离屯、管中的残渣加入乙腊重复提取一次， 将提取液也过滤至上述装有氯化钢的具塞量筒，振摇，静置，取上清液于平底烧瓶，浓缩近 干，用甲醇洗涂上述平底烧瓶，得洗脱液，再加入超纯水混匀洗脱液，过0. 45ym微孔滤膜， 即得待测样品；
[0014] 似将步骤（1)得到的待测样品用超高效液相色谱进行测定。
[0015] 进一步的，包括W下步骤：
[0016] (1)样品前处理 阳017] 若样品为苹果，则此步骤为：称取10.Og苹果样品于50血离屯、管中，加入20血乙 腊，在匀质机上WlOOOOr/min高速匀浆0. 5min，4000;r/min离屯、3min，将上清液过滤至装有 5g氯化钢的100血具塞量筒，再将离屯、管中的残渣加入20血乙腊重复提取一次，将提取液 也过滤至上述的装有5g氯化钢的具塞量筒，剧烈振摇2min，静置20min，取20mL上清液于 平底烧瓶，浓缩近干，用ImL甲醇洗涂上述平底烧瓶，得洗脱液，再加入ImL超纯水混匀洗脱 液，过0. 45ym微孔滤膜，即得待测样品；
[0018] 若样品为±壤，则此步骤为：称取10.Og±壤样品于50血离屯、管中，加入20血乙 腊，超声20min，将超声提取液过滤至装有5g氯化钢的lOOmL具塞量筒，再将离屯、管中的残 渣加入20血乙腊重复提取一次，将提取液也过滤至上述装有氯化钢的具塞量筒，剧烈振摇 2min，静置20min，取20血上清液于平底烧瓶，浓缩近干，用1血甲醇洗涂上述平底烧瓶，得 洗脱液，再加入1ml超纯水混匀洗脱液，过0. 45ym微孔滤膜，即得待测样品；
[0019] 更进一步的，所述步骤（2)中超高效液相色谱的仪器参数条件如下：
[0020] 液相色谱条件为：
[0021] 色巧化 AcquhyUplcBEHCI8 色的化，SO.Onimxllmmxl.7 叫化 流动相 甲醇;水=娜：4彷； 流速 0.4mlimin； 柱温 35C; 迸样量 2.0阵； 检测器 紫外检测器（XUV)芽IIEmpowers工作潘;： 检测器波长 255nm。
[0022] 本发明的有益效果：
[0023] (1)本发明的快速分析方法中，待测的药物風蛾脈属于非极性较强的化合物，采用 反相色谱能很好的将干扰物和待测物分离；基于此，本研究利用超高效液相色谱快速，分离 度，灵敏度高的特点，针对苹果和±壤基质，优化了前处理和色谱分离条件，建立了風蛾脈 残留检测的简便、快速、灵敏的分析方法，为風蛾脈在苹果上的安全、合理使用及环境安全 评价提供科学基础。
[0024] (2)本发明的快速分析方法中，通过调节流动相，从而简化净化步骤，样品提取液 无需净化，直接上机检测，对風蛾脈的定量并无影响。该方法简单、快速，大大的节省成本和 分析时间。
[00巧](3)本发明的快速分析方法中，洗脱定容时先用纯甲醇溶解定容，再用水稀释后上 样（直接使用甲醇和水1:1定容时，由于含水的定容液极性太强不能充分的复溶風蛾脈，对 分析结果影响较大一回收率仅有50% -60%)。
[0026] (4)本发明的快速分析方法中，选择体积比60 :40的甲醇-水体系作为流动化風 蛾脈在2. 2分钟出峰，且附近无干扰定量的杂质峰，可快速检测苹果和±壤中的風蛾脈残 留。
[0027] (5)本发明的快速分析方法中，检测苹果和±壤中的風蛾脈的定量限化0曲为 0. 05mg/kg。对农残限量要求较高的欧盟规定的風蛾脈在苹果中的脈L值0. 5mg/kg，本方法 的灵敏度完全能够达到检测要求。
[0028] (6)本发明的快速分析方法较高的准确度和精密度（風蛾脈在0. 025~2. 5mg/L 浓度范围内线性关系良好，相关系数不低于0. 9997。在0. 05~2.Omg/kg加标浓度范围内的 平均回收率为83. 6 %~105. 2 %，相对标准偏差为0. 7 %~6. 1 %，方法的检出限为0. 0Img/ kg)，符合农药残留分析检测的要求。
【附图说明】
[0029] 图1为風蛾脈结构式；
[0030] 图2为不同净化方式下風蛾脈的回收率比较（A:无净化；B:氨基柱；C:PSA净 化）；
[0031] 图3为風蛾脈紫外吸收谱图；
[0032] 图4为苹果空白样品和添加0.05mg/kg風蛾脈样品图谱（A;空白样品；B:添加样 品）；
[003引图5为±壤空白样品和添加0.05mg/kg風蛾脈样品图谱（A;空白样品；B:添加样 品）；
[0034] 图6为風蛾脈标准曲线图（一:标准溶液标曲:基质空白标曲）；
[0035] 图7为为風蛾脈标准品（0.Img/L)、苹果空白样品和苹果添加样品（0. 2mg/kg)色 谱图。
【具体实施方式】
[0036] 为了更好地理解本发明，下面结合实施例进一步阐明本发明的内容，但本发明的 内容不仅仅局限于下面的实施例，实施例不应视作对本发明保护范围的限定。
[0037] 实施例
[0038] 1材料与方法
[0039] 1. 1仪器和药剂 W40]AcquityH-class超高效液相色谱仪，配紫外检测器（TUV)和Empower3工作站 (美国Waters公司）；Alliance2695高效液相色谱仪，配光电二极管阵列检测器（PDA)(美 国Waters公司；T25高速匀浆机（德国IKA公司；IKA-MS3满旋振荡器（德国IKA公司）； L油orata4000型旋转蒸发仪（德国化idol地）。風蛾脈标准品：纯度97% (国家农药质 检中屯、提供），甲醇为色谱纯（美国Fisher)，其它试剂均为分析纯。
[0041] 1.2样品前处理
[0042] 1. 2. 1 苹果
[0043] 称取苹果样品10.Og于50血离屯、管中，加入20血乙腊，在匀质机上W1000化/min 高速匀浆0. 5min，400化/min离屯、3min，将提取液过滤至装有5g氯化钢的100血具塞量筒， 再向残渣加入20mL乙腊重复提取一次，将提取液过滤至同一具塞量筒，剧烈振摇2min，静 置20min，取20mL上清液于平底烧瓶，浓缩近干，用ImL甲醇洗涂浓缩瓶后再加入1ml超纯 水混匀洗脱液，过0. 45ym微孔滤膜，待测。
[0044] 1.2. 2±壤 W45] 称取±壤样品10.Og