一种油脂氧化程度快速检测方法及测试盒的利记博彩app
【技术领域】
[0001] 本发明涉及油脂氧化程度的快速检测技术，具体涉及油脂氧化程度的快速检测方 法及测试盒。
【背景技术】
[0002] 油脂氧化是危及油脂安全的重要方面。受来源、存放等因素影响，油脂往往会发生 氧化、酸败反应，其产生的过氧化物会渐进地影响身体组织、破坏细胞膜结构，引起贫血、肝 肾异常、昏睡等问题；产生的衍生物（醛）会降低食欲引起下痢；另外蛋白质与次级氧化产 物发生交联反应，降低蛋白质的消化吸收。
[0003] 能够实现快速检测油脂氧化程度对于油脂的实际采购和品控有非常重要的意义。
[0004] 目前快速检测油脂氧化程度的方法主要有酸价、过氧化价，Kreis试验（克雷斯试 验）。
[0005] 酸价虽测定容易，但通常不能单纯评价油脂品质，须配合其他方法鉴定。油脂酸价 的提高，部分由于油脂水解而生成游离脂肪酸，部分由于过氧化物的分解所产生羟基化合 物再氧化而生游离脂肪酸，因此游离脂肪酸生成结构随条件而异，不易做为油脂氧化程度 的判断指标。
[0006] 羰氧化物系在油脂氧化过程中生成，过氧化价可做氧化程度判断，但过氧化物在 水中的存在或高湿下易分解，因此油脂氧化至某一程度后，过氧化价反而会降低。因此，过 氧化价应为所存在过氧化物量与分解量之差，故需配合其他氧化测定方法，以利于品质的 正确判断。
[0007]Kreis试验，此为醛类及酮类化合物的呈色反应，用作油脂是否氧化变质的定性反 应，方便简单，使用成本低，结果快速，在国内外一度曾成为商业、卫生监督部门最初用于评 价脂肪氧化的一种重要的检验方法。但Kreis试验的最大缺点是无法定量，造成该原因的 一个重要因素是，各个实验室之间很难得到一致的检验结果，不同的人员操作，或同一人员 两次操作所的颜色可能会有差异，故而迄今只作为定性方法使用，故而迄今多用于定性。
[0008] 发明专利《快速检测油脂氧化程度的方法及测试盒》（公开号104048960A)中通过 加入1，1，3, 3-四乙氧基丙烷来实现油脂氧化程度（以丙二醛含量计）的定量检测，但在该 方法中沿用了Kreis试验的传统操作方法，存在稳定性及重复性差，显色时间长，油层显色 层分离较慢等缺陷。
[0009] 为了克服上述现有技术的不足，本发明提供一种基于Kreis试验，稳定、快速、可 定量的油脂氧化程度快速检测方法，及配合该检测方法制备的油脂氧化程度快速检测测试 盒。
【发明内容】
[0010] 为了实现快速、便捷、低成本，且可稳定定量地检测油脂氧化程度，本发明提供一 种油脂氧化程度的快速检测方法及测试盒。
[0011] 本发明基于Kreis试验方法，原理为油脂氧化二次分解产物与间苯三酚发生显色 反应。通用方法为：取试样5mL于试管中，加入浓盐酸5mL，用橡皮塞塞好管口，剧烈振荡10s 左右，再加0. 1 %间苯三酚乙醇溶液5mL，加塞剧烈振荡10s左右，使酸层分离，观察下层溶 液颜色，以判断油脂氧化程度。
[0012] 经实际操作发现该方法：
[0013] 1、试管所显颜色的深浅，不稳定：不但随操作人员的不同而变化，同一操作人员， 多次操作所显颜色也有明显差异；
[0014] 2、显色时间有出入：从数秒钟到数小时，很多油样所显颜色会随放置时间的延长， 颜色加深；
[0015] 3、不易分层，影响观察：很多油样，在震荡后，需要很长时间的静置分层，否则不利 于颜色的观察和比对，特别是油样颜色较深的样品，严重影响比色效果。
[0016] 针对上述问题，发明人做了大量的实验研究，发现通过调整酸溶液及间苯三酚溶 液的加入比例，可大大提高该反应的速度和显色稳定性，针对市场所购油样的测试发现，溶 液分层速度大大提高，大约10分钟即可彻底完成显色，不同技术人员进行试验操作，显色 结果无明显差异，通过调整间苯三酚溶液溶剂的种类，如采用甲醇，分层速度再次提高，很 快得到澄清透明的比色层，便于观察；调整后，可大大降低所用酸溶液的浓度，操作更为安 全。
[0017] 本发明采用两种比色方案：一种是比色层在上层，即通过在原有标准操作方法的 基础上，减少强酸溶液的用量，使油相在比色层的下方；另一种是在上述基础上再加入适量 的水或水溶液，混合后，使油相再度返回上层，对下层进行比色。两种方案各有特色，可根据 待测油样的试剂情况选择，以达到最佳显色效果（不同氧化程度所显颜色的色阶明显，所 得溶液更为澄清透明，减少油样本身颜色影响等）。
[0018] (一）油脂氧化程度快速检测方法具体方案如下：
[0019] 1.比色相在上层的检测方法：
[0020] 取待测油样，依次加入强酸溶液，间苯三酚的醇溶液，振摇，显色稳定后比色，其 中，加入的强酸溶液与间苯三酚的醇溶液的体积比为1: (1. 5-50)，比色时观察上层相颜色。
[0021] 所述强酸溶液为至少含有盐酸、硫酸、硝酸任一一种水溶液，其中氢离子浓度为 3-30mol/L，所述间苯三酚的醇溶液为0. 01-1 %间苯三酚的甲醇或乙醇或甲醇乙醇二者的 混合溶液。
[0022] 2.比色相在下层的检测方法：
[0023] -种油脂氧化程度快速检测方法，为取待测油样，依次加入强酸溶液，间苯三酚的 醇溶液，振摇，显色稳定后，不用马上比色，而是再加入一定量的水或水溶液，振摇后静置， 观察下层相溶液比色。
[0024] 所述水或水溶液与所加强酸溶液体积之和，与所加间苯三酚的醇溶液体积比为 (0. 8-20) : 1，所述水溶液为上述强酸溶液或氢氧化钠/氢氧化钾的水溶液或碱金属盐的水 溶液。
[0025] 3?比色方式
[0026] 上述两种检测方法所述比色，可直接观察颜色深浅，判断油脂的氧化程度，颜色越 深氧化程度越高，也可与比色卡比较确定油脂氧化程度。
[0027] 所述比色卡的数值可以用丙二醛值来表示，所述比色卡的制备方法，可通过向 未氧化或新鲜油样中加入一定量的1，1，3, 3-四乙氧基丙烷配制成一系列含有丙二醛 0-50ppm的丙二醛标准溶液，采用与待测油样相同的检测方法，显色后，根据相应的上层或 下层颜色印制相应比色卡。
[0028] (二）所述油脂氧化程度快速检测测试盒具体方案如下：
[0029] 该油脂氧化程度快速检测测试盒包含测试液、比色杯和比色卡，检测结果以丙二 醛计；所述测试液包括强酸溶液、间苯三酚醇溶液。
[0030] 所述快速检测测试盒的使用方法为，取一定量待测油样依次与1份（体积）强酸 溶液、1.5-50份（体积）间苯三酚醇溶液混合，显色稳定后，将待测比色液上层溶液的颜色 与比色卡比较，得到待测油样的氧化程度具体结果，以丙二醛计。
[0031] 或，所述测试液包括强酸溶液、间苯三酚醇溶液、水或水溶液，所述快速检测测试 盒的使用方法为，取一定量待测油样依次与1份（体积）强酸溶液、1. 5-50份（体积）间苯 三酚醇溶液混合，显色稳定后，加入一定量的水或上述强酸溶液，振摇并静置后，将待测比 色液下层溶液的颜色与比色卡比较，得到待测油样的氧化程度具体结果，以丙二醛计；所述 水与强酸溶液的加入量之和或强酸溶液的加入量总和，与所加间苯三酚的醇溶液体积比为 (0? 8-20) :1〇
[0032] 所述比色卡的制备：可通过向未被氧化或新鲜油样中加入一定量的1，1，3, 3-四 乙氧基丙烷配制成一系列含有丙二醛0-50ppm的丙二醛标准溶液，采用与待测油样相同的 检测方法，显色后，根据相应的上层或下层颜色印制相应比色卡。
[0033] 本发明的优点：
[0034] 1)简单方便，使用和操作成本低廉，利于现场操作，快速给出检测结果；
[0035] 2)克服Kreis试验显色不稳定、难定量的缺陷，不受人员、操作等的影响，可以根 据氧化程度的不同，得到稳定的显色结果，实现定量；
[0036] 3)大大减少强酸的使用量，减少对操作人员的危害，同时减少废弃物对环境的污 染。
【具体实施方式】
[0037] 下面结合实施例对本发明做进一步的详细描述。但不以此限制本发明。
[0038] 如无特殊说明本发明各试剂浓度均为质量百分比浓度。
[0039] 实施例中强酸溶液以A试液代替；间苯三酚醇溶液以B试液代替；水或水溶液以C 试液代替。
[0040] 实施例1
[0041] 1)油样
[0042] 1#油样：新鲜大豆油
[0043] 2#油样：待测食用大豆油
[0044] 3#油样：待测食用大豆油
[0045] 4#油样：待测食用大豆油
[0046] 2)试剂
[0047]A试液：浓盐酸（37 %，约 12mol/L)
[0048] B试液：间苯三酚乙醇溶液（0? 1 % )
[0049] C试液：为A试液
[0050] 3)比色卡/比色参比液制备
[0051] 向1#油样中加入一定量的1，1，3, 3-四乙氧基丙烷，配制成含有丙二醛0、2. 5ppm、 5ppm的丙二醛标准油样，分别取上述油样5