载脂蛋白a-i在前列腺癌和前列腺增生的诊断及鉴别诊断中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及载脂蛋白A-I作为前列腺癌诊断的新型肿瘤标记物的应用，尤其是载 脂蛋白A-I在前列腺癌和前列腺增生中表达情况的比较和表达部位的确定，W及在前列腺 癌和前列腺增生疾病诊断及鉴别诊断中的应用。
【背景技术】
[0002] 前列腺癌是发生于男性泌尿生殖系统前列腺组织的恶性肿瘤。近年来，随着我国 经济发展、人民生活水平提高W及人口老龄化等因素的影响，前列腺癌的发病率呈逐年上 升趋势，影响着老年男性的生活质量。
[0003] 前列腺癌诊断的金标准是前列腺穿刺活检，但穿刺活检取材范围有限，有一定的 假阴性率，必要时需重复穿刺。前列腺特异抗原（PSA)是目前公认的最有价值的前列腺癌 诊断血清标志物，已广泛应用于前列腺癌的筛选、诊断和随访。然而PSA对前列腺癌组织并 无特异性，诊断的灵敏度和特异性较低，尤其是PSA在4-lOng/ml范围内时，前列腺癌和 前列腺增生难W鉴别。临床上，当患者PSAM.Ong/ml时高度怀疑为前列腺癌，需要进行 前列腺穿刺确诊。但有研究表明，约有25%的前列腺增生患者PSAM.Ong/ml,该部分患 者接受了不必要的穿刺活检W及治疗手段，造成很大的精神及经济负担；约15. 2%的前列 腺癌患者PSA<4.0ng/ml,该部分患者因此延误了肿瘤治疗的最佳时期。因此PSA在前列 腺癌与前列腺增生的鉴别诊断方面存在着灰区，缺乏特异的诊断指标。
[0004] 载脂蛋白A-I(ApoA-I)是由243个氨基酸残基构成的非糖基化蛋白质，相对分子 质量28.IkDa，主要由肝脏和小肠合成。ApoA-I是人体血浆高密度脂蛋白（皿L)的主要成 分之一，其与磯脂、胆固醇、其他载脂蛋白W及多种血浆因子构成皿L复合体，占皿L蛋白质 含量的70%左右。ApoA-I介导人体重要的生理功能，具有抗动脉粥样硬化、抗氧化、抗炎、 抗内毒素作用：其与血管壁上的ATP结合转运体A-I(ABCA-I)结合，促使游离的胆固醇从血 管内皮中的巨瞻细胞或其他表皮组织中向外流出，随后激活皿L表面的卵磯脂胆固醇醜基 转移酶（LCAT)，将游离胆固醇醋化并转移至脂蛋白微粒内核向肝脏运输，诱导胆固醇逆向 转运（RCT);结合LBP-LI^S复合物抑制内毒素引起的炎症作用；结合活化的T淋己细胞表面 刺激因子X阻止其激活单核细胞释放炎症因子（IL-1目、TNFa等），具有重要的临床意义。 AP0A1基因的甲基化状态决定了蛋白的表达呈现明显的组织特异性，仅在肝脏、小肠、膜腺 及血管内膜内有少量表达。在近几年的研究中，已报道ApoA-I在许多肿瘤组织中的表达有 不同程度的升高，如肝癌、乳腺癌、卵巢癌等，是潜在的肿瘤标志物。然而，目前的研究仅限 于基础实验阶段，检测手段非常灵敏、成本昂贵，并缺乏大量临床标本证实。
[0005] 免疫组化技术是应用免疫学及组织化学原理，对组织切片或细胞标本中的某些化 学成分进行原位的定性、定位和定量研究的实验技术。免疫组化技术具有特异性强、敏感性 高、定位准确、形态与功能相结合的优点。免疫学的基本原理决定了抗原与抗体之间的结合 具有高度特异性；酶标反应的放大效应使得常规病理诊断具有高度敏感型；免疫组化技术 可在组织和细胞中进行抗原的准确定位，使得形态与功能研究相结合，对于病理诊断具有 重要的意义。目前希望确立一种对前列腺癌及前列腺增生进行鉴别诊断的免疫组化标志 物，W弥补PSA在灰区（4-Wng/ml)对前列腺癌诊断缺乏特异性的弱点，对前列腺癌的早 期诊断、鉴别、治疗及随访均具有重要的意义。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的是针对现有技术中存在的难题和需求，提供一种载脂蛋白A-I作为 肿瘤标志物在前列腺癌和前列腺增生的诊断及鉴别诊断中的应用。
[0007] 本发明所采取的技术方案是：发明人收集了泌尿外科病理诊断明确的前列腺癌组 织标本13例和前列腺增生组织标本37例，通过免疫组织化学方法检测载脂蛋白A-I在前 列腺癌和前列腺增生组织中的表达水平，证实了载脂蛋白A-I在前列腺癌中的表达特异升 高。应用免疫化学发光法检测血清总PSAUPSA)、游离PSAOPSA)水平并计算巧SA/巧SA 比值，证实了在相同PSA水平范围内，前列腺癌组织中载脂蛋白A-I的表达水平显著高于前 列腺增生组织。应用过氧化物酶法检测血清总胆固醇（CH0L)、甘油H醋（TRIG)、低密度脂 蛋白胆固醇（LDkC)、高密度脂蛋白胆固醇（皿kC)等血脂系列参数，证实了前列腺癌患者 血清中的LDkC水平显著高于前列腺增生组，前列腺癌患者血清中的皿kC水平显著低于 前列腺增生组，进而说明胆固醇是前列腺癌发生的潜在危险因素，并证实了胆固醇转运相 关蛋白-载脂蛋白A-I与前列腺癌的发生密切相关。
[0008] 本发明通过研究证实载脂蛋白A-I在前列腺癌组织中的表达显著高于前列腺增 生组织，从而提出载脂蛋白A-I可作为前列腺癌和前列腺增生诊断及鉴别诊断的新型免疫 组化标记物。
[0009] 本发明发挥了免疫组化技术特异性强、敏感性高、定位准确、形态与功能相结合的 优点，利用组织石蜡切片检测前列腺癌和前列腺增生组织中载脂蛋白A-I的表达情况。
[0010] 为让本发明的上述和其它目的、特征和优点能更明显易懂，下文特举较佳实施例， 并配合附图，作详细说明如下。
【附图说明】
[0011] 图1是前列腺增生和前列腺癌的免疫组化图片。A、B是正常前列腺组织的免疫组 化图片，C、D是前列腺增生组织的免疫组化图片，E、F是前列腺癌组织的免疫组化图片。
[0012] 图2是载脂蛋白A-I在前列腺癌和前列腺增生组织中的表达情况比较。
[0013] 图3是载脂蛋白A-I在前列腺癌和前列腺增生组织中表达的免疫组化评分比较。
[0014] 图4是载脂蛋白A-I与前列腺癌Gleason评分的关系。
[0015] 图5是前列腺癌和前列腺增生患者血清总PSA、游离PSA、游离PSA/总PSA水平 比较（化S)。
[0016] 图6是相同PSA水平范围内前列腺癌和前列腺增生组织中载脂蛋白A-I的表达情 况比较。
[0017] 图7是前列腺癌和前列腺增生患者血脂水平的比较(z±s,mmol/1)。
【具体实施方式】
[001引为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，下面结合附图及实施例，对 本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用W解释本发明，并不 用于限定本发明。
[0019]实施例1前列腺癌和前列腺增生组织免疫组化检测
[00