肉制品中组胺快速检测方法与流程

文档序号:12267863阅读:1587来源:国知局

本发明涉及肉制品中组胺快速检测方法,属于组胺测定技术领域。



背景技术:

组胺(HA)作为一种生物胺,是由微生物作用于其前体氨基酸-组氨酸而产生的,广泛存在于各种食品及生物体中,尤其是发酵食品(如奶酪、葡萄酒、发酵香肠、酱油、水产品及肉类产品等)中。它不仅是炎症反应和免疫损伤的重要介质之一,而且对应答炎症反应有着重要的调节作用。但是当人体摄入过量的组胺时,会引起诸如头痛、恶心、心悸、血压变化、呼吸紊乱等过敏反应,甚至危及生命。

食品中组胺的含量与人类健康息息相关,并且影响着产品的出口安全。因此食品中组胺含量的测定已经成为食品安全领域中又一个热点课题。

目前我国国家标准(GB/T 21970-2008)采用高效液相色谱法检测组胺,操作繁琐费时,关于组胺的研究重点多数是在水产品和生物体组织方面,而对于其他一些食品(如调味剂)则很少;目前测定食品中组胺的方法主要有,如:荧光光度法、酶联免疫法、传感器、薄层色谱、高效液相色谱、高效毛细管电泳等。本专利的主要作用是建立一种高效、简便、准确的方法测定组胺,并成功用于实际样品的检测。

目前现有检测方法存在以下缺点:1.荧光光度法试样处理手续复杂,操作要求也比较严格。

2、酶联免疫法存在一定的局限性,比如不能同时分析多种组分,对试剂的选择性高,对结构类似的化合物有一定程度的交叉反应。且检测结果稳定性能较差。



技术实现要素:

针对上述问题,本发明要解决的技术问题是提供一种工艺简化,成本较低的,稳定性高的肉制品中组胺的快速检测方法。

本发明的肉制品中组胺快速检测方法。具体的检测步骤为:a、试剂配置:试剂A:配置10%的三氯乙酸溶液,将10g的三氯乙酸采用蒸馏水定容到100ml;

试剂B1:配置80g/L氢氧化钠溶液,将4g的氢氧化钠采用蒸馏水定容至50ml;

试剂B2:1:11的盐酸溶液;

试剂C:偶氮试剂40mL 1号试剂+5mL 2号试剂;

1号试剂:5g/L亚硝酸钠;将0.5g亚硝酸钠采用蒸馏水定容至100ml;

2号试剂:0.25g对硝基苯胺,加2.5ml盐酸,加水稀释至100ml。

试剂D:配置50g/L碳酸钠溶液,将5g碳酸钠采用蒸馏水定容至100ml;

试剂E:配置250g/L氢氧化钠溶液,12.5g氢氧化钠采用蒸馏水定容至50ml;

b、样品前处理,选择任意一种海产品类肉制品,称取0.1g样品于刻度试管中,加入4mL的试剂A,在60℃超声中提取10min,过滤;用试剂B1和试剂B2调节滤液pH=5,用纯净水稀释至20mL刻度线为样品液;

c、对照样品测试液的配置:c-1、移取4.5mL纯净水于比色管中;c-2、加0.5mL的试剂C和0.15mL试剂D,混匀;c-3、加1滴试剂E,混匀,静置5min后为对照样品测试液;c-4、取2.5ml对照样品测试液于比色皿中;

d、待测样品测试液的配置:d-1、移取1.5mL处理后的样品液于比色管中,加3mL纯净水,混匀;d-2、加0.5mL试剂C和0.15mL试剂D,混匀;d-3、加1滴试剂E,混匀,静置5min后为待测样品测试液,待测;d-4、取2.5ml待测样品测试液于比色皿中;

e、对照样品和待测样品的测试:将病害肉检测仪OK-BH10开机,选择组胺检测项目,然后将盛放对照样品测试液的比色皿放入第一通道,点击“对照测定”即可,然后将盛放待测样品测试液的比色皿,放入第一通道内,点击“样品测量”,仪器会自动显示组胺含量。

作为优选,所述的测试样品中的海产品类肉制品为海产鱼类,如鲐鱼、青鱼、沙丁鱼、竹夹鱼、金枪鱼、秋刀鱼、沙丁鱼、朝鲜方鱼、鱼时鱼、扁鱼、鲐鱼以及其他水产品的肉制品。

本发明的有益效果:此测试方法中样品处理过程简单,操作简单易行,试剂用量少,大大降低检测成本,检测灵敏度高,能够充分检测出组胺物质,检测耗时短,节省大量时间。

附图说明:

为了易于说明,本发明由下述的具体实施及附图作以详细描述。

图1为本发明实施例中采用高效液相色谱法和本发明比色法测定鱼类肉制品中组胺的数据分析结构示意图。

具体实施方式:

本具体实施方式采用以下技术方案:具体的检测步骤为:a、试剂配置:试剂A:配置10%的三氯乙酸溶液,将10g的三氯乙酸采用蒸馏水定容到100ml;

试剂B1:配置80g/L氢氧化钠溶液,将4g的氢氧化钠采用蒸馏水定容至50ml;

试剂B2:1:11的盐酸溶液;

试剂C:偶氮试剂40mL 1号试剂+5mL 2号试剂;

1号试剂:5g/L亚硝酸钠;将0.5g亚硝酸钠采用蒸馏水定容至100ml;

2号试剂:0.25g对硝基苯胺,加2.5ml盐酸,加水稀释至100ml。

试剂D:配置50g/L碳酸钠溶液,将5g碳酸钠采用蒸馏水定容至100ml;

试剂E:配置250g/L氢氧化钠溶液,12.5g氢氧化钠采用蒸馏水定容至50ml;

b、样品前处理,选择任意一种海产品类肉制品,称取0.1g样品于刻度试管中,加入4mL的试剂A,在60℃超声中提取10min,过滤;用试剂B1和试剂B2调节滤液pH=5,用纯净水稀释至20mL刻度线为样品液;

c、对照样品测试液的配置:c-1、移取4.5mL纯净水于比色管中;c-2、加0.5mL的试剂C和0.15mL试剂D,混匀;c-3、加1滴试剂E,混匀,静置5min后为对照样品测试液;c-4、取2.5ml对照样品测试液于比色皿中;

d、待测样品测试液的配置:d-1、移取1.5mL处理后的样品液于比色管中,加3mL纯净水,混匀;d-2、加0.5mL试剂C和0.15mL试剂D,混匀;d-3、加1滴试剂E,混匀,静置5min后为待测样品测试液,待测;d-4、取2.5ml待测样品测试液于比色皿中;

e、对照样品和待测样品的测试:将病害肉检测仪OK-BH10开机,选择组胺检测项目,然后将盛放对照样品测试液的比色皿放入第一通道,点击“对照测定”即可,然后将盛放待测样品测试液的比色皿,放入第一通道内,点击“样品测量”,仪器会自动显示组胺含量。

作为优选,所述的测试样品中的海产品类肉制品为海产鱼类,如鲐鱼、青鱼、沙丁鱼、竹夹鱼、金枪鱼、秋刀鱼、沙丁鱼、朝鲜方鱼、鱼时鱼、扁鱼、鲐鱼以及其他水产品的肉制品。

实施例:a、试剂配置:试剂A:配置10%的三氯乙酸溶液,将10g的三氯乙酸采用蒸馏水定容到100ml;

试剂B1:配置80g/L氢氧化钠溶液,将4g的氢氧化钠采用蒸馏水定容至50ml;

试剂B2:1:11的盐酸溶液;

试剂C:偶氮试剂40mL 1号试剂+5mL 2号试剂;

1号试剂:5g/L亚硝酸钠;将0.5g亚硝酸钠采用蒸馏水定容至100ml;

2号试剂:0.25g对硝基苯胺,加2.5ml盐酸,加水稀释至100ml。

试剂D:配置50g/L碳酸钠溶液,将5g碳酸钠采用蒸馏水定容至100ml;

试剂E:配置250g/L氢氧化钠溶液,12.5g氢氧化钠采用蒸馏水定容至50ml;

b、样品前处理,选择鲐鱼、青鱼、沙丁鱼、竹夹鱼、金枪鱼共5种鱼类的肉制品作为检测材料,将选取的鲐鱼、青鱼、沙丁鱼、竹夹鱼、金枪鱼各种鱼类的肉制品各两组共10组,分别进行以下处理:分别称取0.1g样品于刻度试管中,加入4mL的试剂A,在60℃超声中提取10min,过滤;用试剂B1和试剂B2调节滤液pH=5,用纯净水稀释至20mL刻度线为样品液;

c、对照样品测试液的配置:c-1、移取4.5mL纯净水于比色管中;c-2、加0.5mL的试剂C和0.15mL试剂D,混匀;c-3、加1滴试剂E,混匀,静置5min后为对照样品测试液;c-4、取2.5ml对照样品测试液于比色皿中;

d、待测样品测试液的配置:d-1、将鲐鱼、青鱼、沙丁鱼、竹夹鱼、金枪鱼的样品液共10组分别进行如下处理:分别移取1.5mL处理后的样品液于比色管中,加3mL纯净水,混匀;d-2、加0.5mL试剂C和0.15mL试剂D,混匀;d-3、加1滴试剂E,混匀,静置5min后为待测样品测试液,待测;d-4、取2.5ml待测样品测试液于比色皿中;

e、对照样品和待测样品的测试:将病害肉检测仪OK-BH10开机,选择组胺检测项目,然后将盛放对照样品测试液的比色皿放入第一通道,点击“对照测定”即可,然后将盛放待测样品测试液的比色皿,放入第一通道内,点击“样品测量”,仪器会自动显示组胺含量。

将鲐鱼、青鱼、沙丁鱼、竹夹鱼、金枪鱼作为检测材料分别分成两组共10组通过高效液相色谱法来进行组胺的检测。

图1为两种方法的检测结果,参照图1所示,采用本发明的比色法测定组胺的过程中,数据的稳定性能较好。

以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解,本发明不受上述实施例的限制,上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理,在不脱离本发明精神和范围的前提下,本发明还会有各种变化和改进,这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。

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