一种提高养殖水体透明度的复合微生态制剂及其应用
【技术领域】
[0001]本发明属于微生态技术领域，涉及一种复合微生态制剂，具体涉及一种提高养殖水体透明度的复合微生态制剂及其应用。
【背景技术】
[0002]“养鱼先养水”，水色和透明度是池塘养殖的重要指标。透明度能够影响整个水体的稳定性以及水的肥力，对于整个水体的稳定、鱼虾健康成长、病害的防治有着积极的作用。随着水产养殖密度增加，投饵量的增加，代谢产物，粪便、残饵等有机物会大量堆积，水体会出现浑浊水、黄泥巴水、黑水等透明度较低的恶化水质。
[0003]微生物作为一种生态调节剂能够增加溶氧、降低氨氮与亚硝酸盐氮、抑制有害微生物的繁殖并迅速降解有机物、维持水生生态平衡。目前应用的净水微生物主要种类有光合细菌、芽孢杆菌、硝化细菌、酵母菌等。在高密度的水产养殖过程中，适时加入芽孢杆菌等微生物制剂等，能加快水体的物质循环，降低养殖水体中氨氮、亚硝酸盐等，经常使用有助于水体保持稳定，水既不太“肥”也不易变“清”，水环境长时间处于良好水平。
【发明内容】
[0004]针对降解有机物、降低氨氮，改善养殖水体环境，本发明提供了一种提高养殖水体透明度的复合微生态制剂及其应用，本发明将两种芽孢杆菌与乳酸菌复配使用，可显著提高水体透明度，净化水质。
[0005]为实现上述发明目的，本发明通过下述技术方案予以实现:
一种提高养殖水体透明度的复合微生态制剂，所述复合微生态制剂包括菌含量不低于5 X 19 CFU/g的解淀粉芽孢杆菌、菌含量不低于IX 101° CFU/g的简单芽孢杆菌和菌含量不低于2 X 19 CFU/g的植物乳杆菌和载体。
[0006]所述简单芽孢杆菌选用保藏编号为=CGMCC N0.10051的简单芽孢杆菌K。
[0007]所述解淀粉芽孢杆菌选用保藏编号为:CGMCC N0.10011的解淀粉芽孢杆菌HFJ-7。
[0008]所述的载体为滑石粉，60目筛上物为O。
[0009]本发明提供了所述的复合微生态制剂在提高养殖水体透明度中的应用。
[0010]所述复合微生态制剂兑水全池泼洒，用量为200?250g/亩，10?15天泼洒一次。
[0011]所述养殖水体包括对虾、草鱼、鲢鱼、鲤鱼和泥鳅的养殖水体。
[0012]与现有技术相比，本发明具有以下优点和技术效果:本发明选用的简单芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、植物乳杆菌对养殖后期的有机物、氨氮、亚硝酸等具有显著的降解效果，降低有机耗氧量，间接增氧，维持藻相、菌相平衡，降低水体pH，净化改善水质，促进养殖动物良好生长。将本发明所述复合微生物制剂施加于水体，可以提高养殖水体的透明度，具有广泛的市场应用前景。
【附图说明】
[0013]图1为所述复合微生态制剂对水体透明度的影响；
图2为所述复合微生态制剂对水体氨氮的影响。
【具体实施方式】
[0014]本发明结合以下具体实例对本发明作进一步详细的说明。
[0015]实施例1、菌株的筛选
一、简单芽孢杆菌f5的分离筛选
2014年7月，从胶南沿海多处采集对虾养殖区域的水样、底泥为样品筛选芽孢菌。底泥通过常规倍比稀释取上清为样品；水样可直接作为样品；样品液保温于75V 20min后，涂布于营养琼脂平板进行菌株的分离、纯化，得到4株芽孢杆菌。
[0016]已纯化的单菌株进行氨氮降解测定。将单菌株接种于LB种子培养基中，37°C 180rpm培养约20h至菌体浓度为10s CFU/mL。按1%接种量(体积比)转接至氨氮培养基中(葡萄糖 5g, MgSO4.7Η20 0.25g, K2HPO4 0.5g，(NH4)2SO4 0.lg，水 lL，pH 7.2 ?7.4，20。。150rpm培养)，定时取样测定氨氮浓度，该菌(编号f5)对氨氮降解效果最好，36h时降解率为99%。
[0017]经生理生化方法初步鉴定，菌株f5为芽孢杆菌属，其生物学特性:革兰氏阳性、好氧杆状菌，生长温度15 °C?40 °C。菌落圆形，边缘整齐，乳白色，菌落光滑平整，较湿润。
[0018]以菌株f5的DNA为模板，16S rRNA通用引物为引物进行扩增，扩增片段进行序列测定。测序结果用Blast软件与GenBank中相关属种的16S rRNA序列进行比对，显示该菌株16S rRNA序列与GenBank基因库中芽抱杆菌属中的的16s rRNA序列同源度最高，同源率达到99%。通过DNAMAN6.0对Genbank中已有的芽孢杆菌属的16S rRNA序列进行遗传进化分析，结果显示，菌株f5 16S rWA与Bacillus si尊同源性最高，判定该菌株为芽孢杆菌属的简单芽孢杆菌。
[0019]将筛选到的菌株f5进行菌种保藏，保藏单位:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC);地址:北京市朝阳区北辰西路I号院3号，中国科学院微生物研究所；保藏日期:2014年11月25日；简单芽孢杆菌也CiWys si尊的保藏编号为CGMCCN0.10051。
[0020]二、解淀粉芽孢杆菌HFJ-7的分离筛选
2012年I月至2012年3月，从山东省潍坊市寿光市上口镇10家辣椒蔬菜大棚取30个辣椒根际土样本。土样分别充分研磨，于75°C水浴内加热处理20min，然后用无菌生理盐水中1000倍稀释，于营养琼脂NA平板上稀释涂布，挑取单菌落划线纯化，共筛选出68株纯菌，经镜检均为芽孢杆菌，其中包括菌株HFJ-7。
[0021]经细菌生理生化方法初步鉴定，菌株HFJ-7为芽孢杆菌属，其生物学特性:革兰氏染色阳性，在营养琼脂平板上形成的菌落直径约3-3.5_，边缘不整齐，中间褶皱，淡黄色。菌体形态呈杆状，芽孢椭圆形，端生，尺寸为0.84 X 0.52 μ m。
[0022]采用分子遗传学方法对菌株芽孢杆菌HFJ-7进一步分类鉴定。首先提取菌株HFJ-7的DNA，以该DNA为模板，16S rRNA通用引物为引物，对16S rRNA片段进行扩增，扩增片段进行序列测定。测序结果用Blast软件与GenBank中相关属种的16S rRNA序列进行比对，结果显示该菌株16S rRNA序列与GenBank基因库中芽孢杆菌属