一种肿瘤靶向诊疗荧光探针的利记博彩app
【技术领域】
[0001] 本发明设及用于检测肿瘤标记物并结合光动力学疗法实现祀向治疗的巧光探针 及其制备方法与应用。
【背景技术】
[0002] 癌症严重威胁着人类健康。化疗、放疗和基因治疗已经广泛的应用于癌症治疗研 究，但面临着如何进一步提高癌症治疗效果降低药物产生的毒副作用的难题，实现对肿瘤 部位的祀向药物传递已经成为当今临床医学和生物医药领域的研究热点之一;多药耐药性 的产生，肿瘤微环境的变化W及个体之间的差异导致肿瘤治疗的失败，对肿瘤治疗实现个 性化的治疗方式，及时的反馈肿瘤治疗效果，快速优化治疗方案将更有效的解决肿瘤治疗 的难题。
[0003] 近年来，光动力学治疗由于其安全和非侵入性的肿瘤治疗方式，已经被广泛应用 于食道癌、皮肤癌、膀脫癌、老年性黄斑变性等癌症疾病的治疗。获得FDA认证的光动力学治 疗药物有Metvix彩、Hexvix?、Pho^fVin饭、FoscaiT影、Visudyne?等。光动力学治 疗是通过光激发光敏剂，而激发态的光敏剂将能量传递给附近的氧，从而形成具有强氧化 能力的单线态氧(1化），进而与周围的生物大分子作用，从而诱导细胞的调亡或者坏死，实现 对肿瘤的治疗。与传统的化疗和放疗方法相比，光动力学治疗可W通过光照时间和强度控 制光动力学治疗的程度，而受给药量的影响较小。运个独特的特点使光动力学治疗在实际 医疗过程中能够适应因个体差异和微环境的变化导致的治疗效果的差异，及时对治疗方案 做出调整。然而，光敏剂非特异性的定位，通常会导致不理想的治疗效果W及对正常组织非 预期的毒性。近年来越来越多的研究着重于如何提高光敏剂的肿瘤选择性，尤其是光敏剂 的祀向输送和特异性激活。
[0004] 多肤是从生物蛋白中选择出来的，现在可W化学合成的，由一定的氨基酸组合而 成的，具有特殊生理活性的物质。由于其简单的合成方法，广泛的生物活性及多样的可修饰 选择性，已经被广泛的应用到化学分析，生物分析W及生物医药领域。例如，利用特定多肤 序列修饰或者运载小分子药物，可W有效的改善药物的溶解性，提高药物的祀向性，增强药 物在血液循环过程中的稳定性，促使药物跨越血脑屏障，促进肿瘤细胞对药物的内吞等。与 此同时，固相合成技术的成熟和生物分析技术的发展极大的方便和促进了多肤的应用范 围。通过正交化学的应用，可W方便的对多肤序列进行修饰，从而有效的在特定的多肤序列 中引入药物分子或者巧光分子。并且，利用生物分子所特异性识别的多肤序列，联合巧光成 像技术，可W有效的满足不同的检测和分析等需求。
[0005] 由于光动力学治疗(PDT)能够诱导细胞调亡或者坏死，并且能够促进细胞内诸如 色素沉积、调亡酶激活、DNA破碎等生物化学反应的变化，而运些变化为肿瘤治疗效果的早 期评估提供了途径。因此，从分子水平上评估光动力学治疗效果是可行的，可W极大的推动 个性化的肿瘤治疗的发展。调亡酶是一种半脫氨酸水解酶，在调控细胞程序死亡过程中扮 演重要角色。大部分的肿瘤治疗药物都具有调亡相关的机制，比如，阿霉素，喜树碱，顺销类 化疗药物W及献菁和化嘟类光动力学治疗药物。调亡酶的检测有利于早期肿瘤治疗效果的 评价、推进和优化肿瘤治疗方案。而调亡酶-3是调亡酶家族中的执行调亡酶，激活的调亡 酶-3可W识别和切断含特定序列的多肤或者蛋白，从而影响细胞周期促进细胞程序死亡。 因此，调亡酶-3被广泛应用到相关疾病的检测，W及肿瘤治疗效果的评价。
[0006] 小分子巧光探针被广泛的应用于化学分析，生物分析W及生物动态过程实时、非 侵入性监测。因此，小分子巧光探针被广泛用于药物筛选和治疗效果的评估，实现了肿瘤治 疗效果的早期监测。但是，传统的小分子巧光探针与治疗药物分步进行，而由于药物分子和 小分子巧光探针在生物环境中的分布的区别，使小分子巧光探针在肿瘤治疗效果的监测和 检测上造成延迟。近年来，为实现对肿瘤治疗的原位监测，人们提出了诊疗一体的载药系统 的概念。运种诊疗为一体的载药系统同时具有肿瘤治疗和成像(包括药物释放监测，肿瘤诊 断，治疗评价等）的性质，不仅解决了肿瘤治疗和成像监测不同步、治疗药物和成像探针分 布不可控的问题，同时也极大的推动了肿瘤治疗效果的早期诊断、实时监测的进步。但是， 运种诊疗系统应用在复杂的生理环境中时，同样面临着一些问题。传统的诊疗为一体的系 统利用诊疗系统与祀向底物作用前后巧光强度的变化，从而验证生物环境中的动态过程。 运种方法应用在体外过程中可W有较高的准确度，但是在复杂的生理环境中，探针在局部 位置的富集可能造成背景巧光增强，而运些背景巧光会对检测的准确性造成极大的干扰。 同时，生物体或者细胞的内吞及外排的动态作用也会导致局部区域巧光强度的变化。此外， 个体的差异性和生理环境的复杂性同样可能造成假阳性信号。因此，依赖单一的巧光强度 的变化不能对生物体内的动态过程进行准确的反馈和监测。
【发明内容】
[0007] 为解决现有技术的不足，本发明提供了一种肿瘤祀向光动力学治疗诊疗探针，其 如图1所示。
[0008] 所述探针是W调亡酶特异性识别多肤序列B和肿瘤祀向多肤序列D为骨架，能量共 振转移的分子巧光对C和光动力学治疗光敏剂A组成，所述的能量共振转移的分子巧光对C 由给体Cl和受体C2组成，Cl和C2分别键合在B的两边，结构如下述任意一式：
[0009] A-C1-B-C2-D、A-C2-B-C1-D、A-D-C1-B-C2、A-D-C2-B-C1、D-A-C1-B-C2、D-A-C2-B-Clo
[0010] 所述的光动力学治疗光敏剂为献菁类光敏剂或化嘟类光敏剂。
[0011] 所述的能量共振转移的分子巧光对为巧光素和二甲氨基偶氮苯、二甲氨基偶氮苯 和四甲基罗丹明、四甲基罗丹明和巧光素中的一种。
[0012] 所述的调亡酶是早期调亡诊断信号，为调亡酶-9,调亡酶-3,或者其它调亡酶。
[0013] 所述的肿瘤祀向多肤序列为精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸、甘氨酸-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸、天冬酷胺-甘氨酸-精氨酸、半脫氨酸-精氨酸-谷氨酸-赖氨酸-丙氨酸中 的一种。
[0014] 所述的调亡酶特异性识别多肤序列为天冬氨酸-谷氨酸-鄉氨酸-天冬氨酸、亮氨 酸-谷氨酸-组氨酸-天冬氨酸或者色氨酸-谷氨酸-组氨酸-天冬氨酸中的一种。
[0015] 本发明的目的是提供一种肿瘤祀向光动力学治疗诊疗探针，原化嘟-赖氨酸(巧光 素)-丝氨酸-天冬氨酸-谷氨酸-鄉氨酸-天冬氨酸-丝氨酸-赖氨酸(二甲氨基偶氮苯)-精氨 酸-甘氨酸-天冬氨酸，Pp IX-K (FAM) SDEVDSK (Dab巧I) RGD，结构式为式（I)所示：
[0016
[0017] 本发明所提供的肿瘤祀向光动力学治疗诊疗探针，是采用多肤固相合成的方法制 备。
[0018] 本发明的再一个目的是提供肿瘤祀向光动力学治疗诊疗探针的应用，1)在制备抗 肿瘤光动力治疗药物中的应用；2)通过巧光成像，可W应用到药物筛选和肿瘤治疗效果的 评价。
[0019] 上述应用可W实现对肿瘤进行光动力学治疗，并能对治疗效果进行原位、精确和 实时的评估。
[0020] 所述的在巧光成像中的应用，是采用比例巧光成像的方法，在响应巧光信号中引 入参比巧光信号，所述的响应巧光信号是巧光给体Cl发出的，参比巧光信号由光动力学治 疗光敏剂A发出的，探针中巧光给体Cl的巧光强度和光动力学治疗光敏剂A的巧光强度的比 例用于记录对祀向底物的检测。
[0021] 所述的响应巧光信号是巧光素FAM发出的，参比巧光信号由原化嘟发出的，探针中 巧光素的巧光强度和原化嘟的巧光强度的比例用于记录对祀向底物的检测。
[0022] 本发明的优点是：
[0023] 1)整个合成过程采用固相多肤合成技术，制备方法简单，提纯过程简便。
[0024] 2)通过引入多肤片段，可W显著改善光动力学治疗光敏剂的溶解性，，降低光敏剂 的暗毒性，提高光敏剂对肿瘤细胞的祀向性。
[0025] 3)运种诊疗巧光探针有较高的巧光巧灭效率，对调亡酶-3具有很好的响应性和特 异性，在不具有调亡酶-3的情况下具有相对的稳定性。
[0026] 4)运种巧光探针采用比例巧光成像的方式检测调亡酶-3,可W提高巧光探针在检 测应用中的准确性。
[0027] 5)运种巧光探针同时具有光动力学治疗和治疗效果评价的作用，尤其可W对治疗 效果进行原位，精确和实时的评估，可W极大的推进个性化治疗方案。
[0028] 6)运种光动力学治疗探针在不光照的情况下具有良好的生物相容性，可W作为通 用的比例巧光探针作为药物筛选和治疗效果评价。
[0029] 7)运种光动力学治疗探针可W被广泛应用到肿瘤的早期诊断，药物分子的肿瘤祀 向运输，肿瘤的选择性治疗，具有广泛的实用性价值。
【附图说明】
[0030] 图1:肿瘤祀向诊