一种海马催产剂及其编码基因的利记博彩app
【技术领域】：
[0001] 本发明属于生物化学和分子生物学领域，具体设及一种海马催产剂及其编码基 因。
【背景技术】：
[0002] 脊椎动物的生殖活动主要由"脑/下丘脑-脑垂体-性腺"的生殖轴（brain- pituitary-gonad axis, BPG轴）调控。脑/下丘脑分泌产生促性腺激素释放激素 (gonadotropin releasing hormone,Gn畑），刺激脑垂体促性腺激素（gonadotropin,G地）， 包括促黄体生成激素 (Xuteinizing Hormone ,LH)与促滤泡激素 （Follicle stimulating hormone, FSH)的合成与释放，促性腺激素作用于性腺，增加性腺性类固醇激素的生成与分 泌，进而促进性腺发育成熟、配子生成与排放。而位于生殖轴（GnRH-GtH轴）上游的的基 因--Kisspeptin，由kiss基因编码，经翻译后断裂修饰产生包括Kissp邱tin-10的酷胺化 短肤。研究已经证实:Kisspeptin通过激活GnRH神经元，刺激G地分泌，对调控生殖的"脑/下 丘脑-脑垂体-性腺"轴起着直接的刺激作用，运一发现被认为是近年来生殖生理学研究的 一个主要突破。
[0003] 目前，鱼类人工繁殖中常用的催产剂有Ξ种：即绒毛膜促性腺激素化CG)、促黄体 生成素释放激素类似物化畑-A)和鱼类的脑下垂体(PG)。但运些传统的催产剂只对淡水鱼 类催产效果较好，而对海水鱼类没有明显的效果，表明不同种类的亲鱼对不同催产剂的敏 感性有很大差异。
[0004] 海马是海龙科海马属（Syngnathidae Hippocampus spp.)所有鱼类的统称，是珍 稀的海洋药源动物，在我国素有"南方人参"之称，具有极高的经济价值，是一种高档的中药 材。由于过度捕拱和环境污染等因素，生态环境破坏严重，使得海马的自然资源急剧下降， 目前已被列为海洋溯危动物。加强人工养殖是有效减缓海马自然资源被捕拱的压力和满足 市场对海马的需求。目前，海马的人工养殖产业处于发展初期，还没能实现低成本大规模养 殖W满足市场需求。解决苗种繁育是实现海马养殖规模化的关键，了解并掌握海马催产技 术是人工育苗关键技术之一。
【发明内容】
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[0005] 本发明的目的是提供一种高效的海马催产剂及其编码基因。
[0006] 本发明的海马催产剂，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
[0007] 本发明的海马催产剂的编码基因-线纹海马kiss2基因，其核巧酸序列如SEQ ID NO. 1所示，其含有37化p碱基，编码123个氨基酸，N端前15aa为信号肤，且其N端第88个氨基 酸为断裂位点（GKP);线纹海马kiss2基因同样具有十分保守的核屯、十肤（图1阴影部分标 注），其序列为FNVNPFGLRF(图1)。过收集雌雄海马的脑、觸、肝、肠、肾、肌肉、育儿袋、皮肤、 精巢、卵巢等组织，提取RNA，运用巧光定量PCR检测线纹海马kiss2基因在各组织中的mRNA 表达情况。如图4所示，线纹海马kiss2基因的mRNA表达极为广泛，在我们所收集的组织中均 能检测到，在脑和卵巢中的表达丰度最高。通过人工合成线纹海马kiss2基因的核屯、十肤 (FNVNPFGLRF，代号Kiss2-10)，WlOOng/gbw的浓度对线纹海马进行腹腔注射，分别在3和6 小时后收集下丘脑、垂体样品，提取RNA，用巧光定量PCR分别检测其配体GPR54、sGn畑和FSH 的基因表达变化。如图5所示，lOOng/gbw的kiss2-10处理化和化后，下丘脑GPR54和sGn畑的 表达没有显著变化，而垂体促滤泡激素(FSH)的表达量在多肤刺激化和化后都显著的升高， 表明kiss2-10肤能激活垂体促性腺激素(GtH)，参与海马的生殖调控。如图6所示:kiss2-10 注射后化，血清中睾酬的含量没有显著变化;注射后化后，血清中睾酬的含量有个显著的升 高，表明kiss2-10可W促进下游性腺性类固醇激素的分泌。
[000引本发明还提供一种多肤，其特征在于，其氨基酸序列为:FNVNPFGLRF。
[0009] 本发明还提供一种激活垂体分泌促滤泡激素或促进性腺性类固醇激素的分泌的 药物，其特征在于，含有上述海马催产剂或多肤，所述的多肤的氨基酸序列为:FNVNPFGLRF。
[0010] 本发明从线纹海马中分离得到一种新的海马催产剂，其能激活垂体分泌促滤泡激 素和促进性腺性类固醇激素的分泌，从而参与海马的生殖调控，为解决海马苗种繁育提供 了条件，有利于海马养殖规模化的实现。
【附图说明】：
[0011] 图1是线纹海马kiss2基因的cDNA序列和推导出的蛋白序列，信号肤部分用下划线 标示，断裂位点用箭头表示，核屯、十肤区域用灰色阴影部分标注。
[0012] 图2是硬骨鱼类kisspeptin的氨基酸多重比对，核屯、十肤用方框表示，断裂位点用 箭头表示，其中kiss2_Seahorse代表本发明的海马催产剂(线纹海马KISS2)。
[0013] 图3是Kissp邱tin系统进化树。通过ClustalX 2.0比对各物种kissp邱tin氨基酸 序列，并使用MEGA 6.0软件中的邻近发构建进化树（Neighbor-Joining)，自展值 (bootstrap)为1000。进化树中选取的相关物种及其基因在的GenBank的序列号为：Human kissl(NP_002247.3)；Pig kissl(ACH68409.1)；Mouse kissl(AAI17047.1)；Bovine kissl (BAM28696.1)；Xenopus kissl(ACJ50538.1)；Zebrafish kissl(ABV03802.1)；Seabass kissl(ACM07422.1)；Zebrafish kiss2(NP_001136057.1)；Medaka kiss2(NP_ 001153913.l)；Takifugu kiss2(BAJ15497.1)；Grouper kis2(ACT65993.1)；Seabass kiss2(ACM07423.1)，其中kiss2 Seahorse代表本发明的海马催产剂(线纹海马KISS2)。
[0014] 图4是线纹海马kiss2基因的mRNA在雌雄海马各组织中表达模式。
[001引图5是kiss2-10肤腹腔注射3小时和6小时后对海马下丘脑GPR54和sGnRHW及垂体 F細的mRNA表达影响，*表示显著差异（p<0.05)，图中的Kiss-2代表kiss2-10肤，而对照组 control代表不注射ki