肺腺癌的诊治标记物的利记博彩app
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物医药领域,涉及一种用于肺腺癌诊治的标记物,所述标记物为 PLD5〇
【背景技术】
[0002] 肺癌是严重危害人类健康和生命的疾病,在世界范围内其发病率和死亡率均已跃 居至癌症的首位。在中国,肺癌是发病率和死亡率上升速度最快的恶性肿瘤,已取代肝癌成 为恶性肿瘤死亡的首要因素。腺癌是肺癌最主要的组织学类型,占所有病例的50%以上,是 肺癌防治和研究的重点之一。与其他恶性肿瘤一样,早发现、早诊断、早治疗是降低肺腺癌 死亡率的关键。肺腺癌大多起源于较小的支气管粘膜分泌液的上皮细胞,大多数腺癌位于 肺组织的周围,呈球形肿块,靠近胸膜部位。在周围型肺癌中,肺腺癌的发病率居肺癌各组 织学类型之首,且其发病率呈明显升高趋势。肺腺癌患者中女性病人较多,发病年龄也较 小。
[0003] 肺腺癌早期临床症状隐匿,不易发现,大多患者在就诊时已到中晚期,失去了最佳 手术时机,即使手术,多数患者仍会死于肺腺癌复发的侵袭或转移。有报道表明,早期肺腺 癌患者术后5年生存率约为90%,1-11期患者5年生存率低于70%,而晚期患者仅为1%。临 床上肺腺癌早期诊断主要依赖于X线检查、支气管镜检查、放射性核素检查、细胞学检查、剖 胸探查、ECT检查、纵隔镜检查等。现有的检查手段很难将肺腺癌与肺其他类型的肿瘤以及 胸膜间皮瘤区别开。
[0004] 肺腺癌对放化疗敏感性差,且多数患者就诊时已处于疾病的晚期阶段,手术治疗 受限,所以肺腺癌的预后较差。虽然既往大量的研究意图阐述和解释肺腺癌患者致病的具 体原因,但肺腺癌发生发展的分子生物学机制目前仍不清楚。因此,探索肺腺癌细胞的恶性 转化过程中分子生物学行为的变化,探寻新的有效的肺腺癌分子生物学诊断、治疗和预后 检测标志物,阐明肺腺癌细胞侵袭和转移的分子机制是当前肺腺癌临床治疗和研究中面临 和亟待解决的严峻课题。近年来,随着分子生物学的不断发展,一些新的生物标志物已经出 现,不仅对肺腺癌的病理诊断提供了很大的帮助,并为其预后判断、治疗方案的选择提供了 更全面的依据,在一定程度上发挥了独特的作用。进一步寻找肺腺癌早期诊断和复发转移 的分子标志物,对肺腺癌的诊断和治疗具有重要的理论意义和临床应用价值。
【发明内容】
[0005] 为了弥补现有技术的不足,本发明的目的在于提供一种可用于肺腺癌诊治的分子 标记物-PLD5基因。
[0006] 为了实现上述目的,本发明采用如下技术方案:
[0007] 本发明提供了 PLD5基因及其表达产物在制备诊断肺腺癌的产品中的应用。
[0008] 进一步,上面所述的产品能够通过检测肺组织中PLD5基因的表达水平来诊断患者 是否患有肺腺癌,PLD5基因的高表达与肺腺癌的发生发展相关。
[0009] 进一步,所述检测PLD5基因的表达水平的产品包括:通过RT-PCR、实时定量PCR、免 疫检测、原位杂交或芯片检测PLD5基因及其表达产物的表达水平以诊断肺腺癌的产品。
[0010] 进一步,所述用RT-PCR诊断肺腺癌的产品至少包括一对特异扩增PLD5基因的引 物;所述用实时定量PCR诊断肺腺癌的产品至少包括一对特异扩增PLD5基因的引物;所述用 免疫检测诊断肺腺癌的产品包括:与PLD5蛋白特异性结合的抗体;所述用原位杂交诊断肺 腺癌的产品包括:与PLD5基因的核酸序列杂交的探针;所述用芯片诊断肺腺癌的产品包括: 蛋白芯片和基因芯片;其中,蛋白芯片包括与PLD5蛋白特异性结合的抗体,基因芯片包括与 PLD5基因的核酸序列杂交的探针。
[0011]进一步,所述基因芯片可用于检测包括PLD5基因在内的多个基因(例如,与肺腺癌 相关的多个基因)的表达水平。所述蛋白质芯片可用于检测包括PLD5蛋白在内的多个蛋白 质(例如与肺腺癌相关的多个蛋白质)的表达水平。通过同时检测多个肺腺癌的标志物,可 大大提高肺腺癌诊断的准确率。
[0012] 本发明提供了一种诊断肺腺癌的产品,所述产品能够通过检测肺组织中PLD5基因 的表达水平来诊断肺腺癌。
[0013] 进一步,所述产品包括芯片、或试剂盒;其中,所述芯片包括基因芯片、蛋白质芯 片;所述基因芯片包括固相载体以及固定在固相载体的寡核苷酸探针,所述寡核苷酸探针 包括用于检测PLD5基因转录水平的针对PLD5基因的寡核苷酸探针;所述蛋白质芯片包括固 相载体以及固定在固相载体的PLD5蛋白的特异性抗体;所述试剂盒包括基因检测试剂盒和 蛋白免疫检测试剂盒;所述基因检测试剂盒包括用于检测PLD5基因转录水平的试剂;所述 蛋白免疫检测试剂盒包括PLD5蛋白的特异性抗体。
[0014] 本发明中所述固相载体包括塑料制品、微颗粒、膜载体等。所述塑料制品可通过非 共价或物理吸附机制与抗体或蛋白抗原相结合,最常用的塑料制品为聚苯乙烯制成的小试 管、小珠和微量反应板;所述微颗粒是由高分子单体聚合成的微球或颗粒,其直径多为微 米,由于带有能与蛋白质结合的功能团,易与抗体(抗原)形成化学偶联,结合容量大;所述 膜载体包括硝酸纤维素膜、玻璃纤维素膜及尼龙膜等微孔滤膜。
[0015] 进一步,所述基因检测试剂盒可用于检测包括PLD5基因在内的多个基因(例如,与 肺腺癌相关的多个基因)的表达水平。所述蛋白免疫检测试剂盒可用于检测包括PLD5蛋白 在内的多个蛋白质(例如与肺腺癌相关的多个蛋白质)的表达水平。将肺腺癌的多个标志物 同时进行检测,可大大提高肺腺癌诊断的准确率。
[0016] 本发明提供了PLD5基因及其表达产物在制备治疗肺腺癌的药物组合物中的应用。
[0017] 进一步,所述药物组合物包括PLD5基因和/或其表达产物的抑制剂。所述抑制剂包 括抑制PLD5基因表达的物质、抑制PLD5基因表达产物稳定性的物质、和/或抑制PLD5基因表 达产物活性的物质。
[0018] 进一步,所述抑制剂包括:通过干扰RNA抑制PLD5基因表达的双链核糖核酸,或基 于PLD5抗原蛋白的肿瘤疫苗,或用于抑制PLD5蛋白活性的蛋白质。
[0019] 优选的,所述抑制剂是针对PLD5基因的siRNA。
[0020] 本发明还提供了一种治疗肺腺癌的药物组合物,所述药物包含PLD5基因和/或其 表达产物抑制剂。所述抑制剂包括抑制PLD5基因表达的物质、抑制PLD5基因表达产物稳定 性的物质、和/或抑制PLD5基因表达产物活性的物质。
[0021 ]本发明的药物组合物还可与其他治疗肺腺癌的药物联用,多种药物联合使用可以 提尚治疗的成功率。
[0022] 进一步,上述药物组合物还包括药学上可接受的载体,所述载体可以是一种也可 以是多种,所述载体包括但不限于稀释剂如乳糖、氯化钠、葡萄糖、尿素、淀粉、水等;粘合剂 如淀粉、预胶化淀粉、糊精、麦芽糖糊精、鹿糖、阿拉伯胶、明胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素、 乙基纤维素、聚乙烯醇、聚乙二醇、聚乙烯比咯烷酮、海藻酸及海藻酸盐、黄原胶、羟丙基纤 维素和羟丙基甲基纤维素等;表面活性剂如聚氧化乙烯山梨聚糖脂肪酸酯、十二烷基硫酸 钠、硬脂酸单甘油酯、十六烷醇等;致湿剂如甘油、淀粉等;吸附载体如淀粉、乳糖、斑脱土、 硅胶、高岭土和皂粘土等;润滑剂如硬脂酸锌、单硬脂酸甘油酯、聚乙二醇、滑石粉、硬脂酸 钙和镁、聚乙二醇、硼酸粉末、氢化植物油、硬脂富马酸钠、聚氧乙烯单硬脂酸酯、单月桂蔗 糖酸酯、月桂醇硫酸钠、月桂醇硫酸镁、十二烷基硫酸镁等;填充剂如甘露醇(粒状或粉状)、 木糖醇、山梨醇、麦芽糖、赤藓糖、微晶纤维素、聚合糖、偶合糖、葡萄糖、乳糖、蔗糖、糊精、淀 粉、海藻酸钠、海带多糖粉末、琼脂粉末、碳酸钙和碳酸氢钠等;崩解剂如交联乙烯吡咯烷 酮、羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基甲基、交联羧甲基纤维素钠、大豆多糖等。
[0023] 所述的药物组合物可以使用不同的添加剂进行制备,例如稳定剂、杀菌剂、缓冲 剂、等渗剂、螯合剂、pH控制剂及表面活性剂。
[0024]稳定剂包括人类血清蛋白、L-氨基酸、糖及纤维素衍生物。L-氨基酸还可以包括甘 氨酸、半胱氨酸及谷氨酸中的任意一个。糖类包括单糖,例如葡萄糖、甘露糖、半乳糖、果糖 等;糖醇,例如甘露醇、纤维醇、木糖醇等;二糖,例如蔗糖、麦芽糖、乳糖等;多聚糖,例如葡 聚糖、羟丙基淀粉、硫化软骨素、透明质酸等及它们的衍生物。纤维素衍生物包括甲基纤维 素、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙甲基纤维素及羟甲基纤维素钠。
[0025]表面活性剂包括离子或非离子表面活性剂,例如聚氧化乙烯烷基酯、山梨聚糖单 酰基酯、脂肪酸甘油酯。
[0026] 添加剂缓冲剂可以包括硼酸、磷酸、乙酸、柠檬酸、谷氨酸及相应的盐(它们的碱金 属或碱性稀土金属盐,例如钠盐、钾盐、钙盐及镁盐)。等渗剂包括氯化钾、氯化钠、糖及甘 油。螯合剂包括乙二胺四乙酸钠及柠檬酸。
[0027] 本发明所述携带基因