一种稳定、抗干扰能力强的血清磷脂检测试剂及检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及血清憐脂检测技术领域，特别设及一种血清憐脂检测试剂，还设及使 用此检测试剂的检测方法。
【背景技术】
[0002] 血清憐脂主要包括卵憐脂、溶血卵憐脂、神经憐脂和脑憐脂等四部分。临床工作中 一般只测定血清总憐脂，血清憐脂的增高见于糖尿病、肾病综合症、慢性出血性贫血、肝硬 化、肝坏死、胆道阻塞、甲状腺功能减退、原发性高血压、梅毒等;减退见于甲状腺功能亢进、 急性感染性发热、营养不良性肝硬化等。
[0003] 目前，血清总憐脂的检测有化学法和酶法等，现W酶法最为常用。化学法，方法稳 定，但操作繁琐，试剂对操作人员危害较大，易造成环境污染，且难W实现自动化操作。而酶 法试剂，操作简便，灵敏度高，适用自动化分析，但试剂稳定性稍差，容易受胆红素和抗坏血 酸等干扰物质干扰。
[0004] 鉴于此，本发明在酶法的基础上采用Trinder反应新色原DAOS，添加稳定剂聚乙二 醇6000、薦糖、甘露醇、海藻糖、BSA、黄原胶等，有效提高了试剂的稳定性;并且通过添加胆 红素氧化酶和抗坏血酸氧化酶，可W有效胆红素和抗坏血酸的干扰，大大增强试剂的抗干 扰能力。此外，优选的新型非离子表面活性剂聚氧丙締氧化乙締甘油酸(Pluranic L64)的 加入可防止反应体系浑浊，增强底物的稳定性，提高试剂的抗干扰能力。该试剂操作简便快 速，适用于自动化分析，是一种更加稳定、抗干扰能力强的血清血清憐脂(PLIP)试剂。
【发明内容】
[000引本发明的目的是提供一种用于检测血清憐脂(PLIP)的试剂及使用该试剂检测血 清憐脂含量的方法。该试剂盒采用酶法，可W有效检测血清憐脂的含量，抗干扰能力强，稳 定性好等优点。
[0006] 基本原理； 憐脂在憐脂酶D的作用水解生成胆碱和憐脂酸，胆碱被胆碱氧化酶氧化生成过氧化氨， 过氧化氨与4-氨基安替比林、DAOS反应生成蓝色染料。此染料在600nm有最大吸收峰，吸收 强度与血清中憐脂含量成正比。
[0007] 憐脂酶D 憐脂+也胆碱+憐脂酸 胆碱氧化酶 胆碱 + 2〇2+ 也0 甜菜碱 + 2也〇2 P孤 2也02 + DA0S+4-AA 擬薩《师? 4也0+蓝色染料 注:DAOS: Ν-乙基-Ν-( 2-径基-3-横丙基)-3 ' 5-二甲氧基苯胺钢盐 4-AA:4-氨基氨替化嘟 POD:过氧化物酶 本发明是通过W下步骤得到的： 一种血清憐脂检测试剂，包括试剂R1和试剂R2,所述试剂R1和试剂R2的组成如下： 1) 试剂R1中含有 缓冲液......................................................lOOmmol/L， 憐脂酶D.....................................................1KU/L， DAOS........................................................1.4mmol/L, 抗坏血酸氧化酶..............................................2KU/L, 胆红素氧化酶................................................2KU/L, 聚乙二醇6000................................................lOg/L， 薦糖........................................................20g/L, 黄原胶......................................................〇.5g/L， 甘露醇......................................................20g/L, 海藻糖......................................................lOg/L， BSA.........................................................2g/L, 聚氧丙締氧化乙締甘油酸(Pluranic L64)........................Ig/L, 防腐剂......................................................〇.5g/L; 2) 试剂R2的组分为： 缓冲液......................................................lOOmmol/L， 4-氨基氨替口比口林..............................................2.5mmol/L， 过氧化物酶..................................................20KU/L, 胆碱氧化酶..................................................8KU/L， 聚乙二醇6000................................................lOg/L， 薦糖........................................................20g/L, 黄原胶......................................................〇.5g/L， 甘露醇......................................................20g/L, 海藻糖......................................................lOg/L， BSA.........................................................2g/L, 聚氧丙締氧化乙締甘油酸(Pluranic L64)........................Ig/L, 防腐剂......................................................〇.5g/L; 所述的血清憐脂检测试剂，试剂R1中缓冲液为25°C，pH为7.2的肥PES缓冲液。
[0008] 所述的血清憐脂检测试剂，试剂R2中缓冲液为25°C，pH为7.2的肥PES缓冲液。
[0009] 所述的血清憐脂检测试剂，所述防腐剂为NaN3。
[0010] 所述的血清憐脂检测试剂来检测血清憐脂含量的检测方法，使用全自动生化分析 仪利用终点法进行测定，检测主波长为600nm。
[0011] 所述的检测方法，R1试剂和R2试剂的比例为4:1。
[0012] 本发明的有益效果： 1)优化反应体系，采用化inder反应新色原DAOS，并添加聚乙二醇6000、薦糖、甘露醇、 海藻糖、BSA、黄原胶等多种稳定剂，可W显著改善试剂的稳定性； 2) 添加胆红素氧化酶和抗坏血酸氧化酶，可W有效避免胆红素和抗坏血酸的干扰，大 大增强试剂的抗干扰能力； 3) 新型非离子表面活性剂聚氧丙締氧化乙締甘油酸(Pluranic L64)的加入可防止反 应体系浑浊，增强底物的稳定性，提高试剂的抗干扰能力； 4) 试剂的准确度和稳定性良好，抗干扰性强，使用方便，完全可W满足临床需要。
【附图说明】
[0013] 图1为两种试剂的相关性曲线图， 图2为两种试剂效期稳定性曲线图。
【具体实施方式】
[0014] 下面结合具体实施例对本发明进行进一步说明： 实施例1 血清憐脂的检测试剂，包试剂R1和试剂R2: 1) 其R1的组成为： 肥阳S(4-径乙基赃嗦乙横酸）缓冲液(pH=7.2，25°C) . 1 OOmmo 1 /L， 憐脂酶D.......................................IKU/L， DAOS..........................................1.4mmol/L, 抗坏血酸氧化酶................................2KU/L, 胆红素氧化酶..................................2KU/L, 聚乙二醇6000..................................lOg/L， 薦糖..........................................20g/L, 黄原胶........................................〇.5g/L， 甘露醇........................................20g/L, 海藻糖........................................lOg/L， BSA...........................................2g/L, 聚氧丙締氧化乙締甘油酸(Pluranic L64)..........Ig/L, 防腐剂 NaN3....................................〇.5g/L; 2) 试剂R2的组分为： 肥阳S(4-径乙基赃嗦乙横酸）缓冲液(pH=7.2，25°C) . 1 OOmmo 1 /L， 4-氨基氨替口比口林................................2.5mmol/L， 过氧化物酶........