基于食材的冬虫夏草菌丝体固体培养法及所用固体培养基的利记博彩app
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物材料培育方法领域，特别设及一种用于冬虫夏草菌丝体的固体培 养基与培养方法。
【背景技术】
[0002] 冬虫夏草(0地iocordyceps sinensis)是鱗翅目骗幅蛾科幅蛾属幼虫被中国被毛 抱化irsutella sinensis)寄生所形成的虫菌复合体，在我国民间流传应用已有两千多年 的历史，有关文献记载可追溯到千年之前。据历版《中华人民共和国药典》记载，其主要功效 是补肾益肺，止血化疲;用于治疗肾虚精亏，阳瘦遗精，腰膝酸痛，久咳虚喘，劳嗽咯血。现代 医学和药理学研究证明，冬虫夏草具有多种治疗和滋补保健功能:对呼吸系统具有扩张支 气管、止咳平喘、桂疲抗炎作用;对屯、血管系统具有抗屯、律失常、抗屯、肌缺血缺氧等作用;对 免疫功能呈双向调节作用，还具有抗癌活性和镇静催眠作用和抗疲劳作用。冬虫夏草又因 其性平力缓，能平补阴阳，许多人即使一年四季长期服用，也不会出现不良反应，因而也是 年老体衰者、术后体虚者和亚健康人群的滋补食疗佳品。冬虫夏草菌寄生性苛刻，其寄主幅 蛾属昆虫的生境独特，主要分布在我国青藏高原海拔3500m~5000m的高寒草甸生态系统， 幅蛾完成一个生命周期通常需要3~4年，所W冬虫夏草的天然资源十分稀少。在巨大的市 场需求和经济利益的驱使下，掠夺式的采挖已对冬虫夏草资源的再生带来严重威胁，也给 当地脆弱的生态环境带来沉重压力。开发冬虫夏草的人工替代品是解决野生资源匿乏与巨 大的药用和保健需求矛盾，保护我国Ξ江源生态安全的有效途径。冬虫夏草的人工培育虽 已获得成功但尚未实现规模化生产，目前应用最普遍的冬虫夏草人工替代品，来自利用冬 虫夏草无性型即麦角科真菌中国被毛抱化irsutella sinensis)或伴生菌骗幅蛾拟青霉 (Paecilomyces h邱iali)等通过深层液体发酵培养的菌丝体。冬虫夏草菌丝体的液体发酵 生产，已有多篇专利报道，如申请号03135623.0,85107991，2011101568723， 200410025517.2,200410101728.X，200710142960.1等，它们的共同特点（1)需发酵罐，设备 投资大；（2)生产过程需不断压送无菌空气，能耗大；（3)工艺复杂，需通过固液分离制取菌 丝体，由此产生大量有机废液，须治理达标排放，既浪费资源又加大环保压力。所W液体深 层发酵冬虫夏草菌丝体产品，价格依然昂贵，未能作为普通民众的日常滋补品食用。
[0003] 申请号为03135622.2的发明专利，公开了一种冬虫夏草菌的固体发酵生产法，该 专利用固体发酵罐来取代液体发酵罐，让中国被毛抱在含有薦糖、酵母和蚕蛹粉等固体基 质上生长，其终产品为固体培养物，生产中亦无废液排放，但该法仍需用发酵罐，并需要向 罐内压送无菌空气，其能耗大。申请号为200510014467.2的发明专利，公开了一种冬虫夏草 菌体麦片的制备方法，该法W麦粒或麦片为冬虫夏草菌的固体培养基，接种后2周左右菌丝 体包裹麦粒，终止培养。由于麦子的主要成分为淀粉，其营养组分的构成与冬虫夏草菌的宿 主骗幅蛾虫体相差甚远，难W充分满足冬虫夏草菌生长的营养需求。有多篇发明专利，如申 请号为 200910197957.9,201110228542.0,2104164.4,200810147785. X，99117265.5， 201310398242.6,201210509164.8等所报道的冬虫夏草菌的固体发酵法中的固体培养基在 主料谷物的基础上，添加蚕蛹粉、麦教、蛋白腺、酵母浸膏、牛肉膏、憐酸二氨钟，硫酸儀等的 一种或几种为辅料，W补充谷物所缺乏的营养。然而，运些辅料并非正常食材，其中的蚕蛹 具有特殊气味会影响产品的适口性，有的会导致化学品残留。此外，由于冬虫夏草菌为好氧 菌，其菌丝体在固体培养基的间隙附着谷物颗粒等的表面生长，一般固体培养时间相对较 长，如申请号为200910197957.9的发明专利公开的固体培养时间长达8~12周。
【发明内容】
[0004] 本发明要解决的技术问题是提供一种基于食材的冬虫夏草菌丝体固体培养法及 所用固体培养基，该培养基完全W食材作为主料与辅料，并使得培养基具有较大的比表面 积和良好的疏松透气性，可为冬虫夏草菌丝体生长提供良好营养条件和物理空间。
[0005] 为了解决上述技术问题，本发明提供一种冬虫夏草菌丝体固体培养基，其由W下 重量含量的成分组成： 粒径<2mm的主料30~50% (较佳为45~46%), 畜禽樂 0.1~15% (较佳为3.5~4.5%)，
[0006] 蔬菜类 0.1~15% (敎佳为4~6.5%) 糖类 0 1~15〇/〇 (较佳为1.6~2.8%)，
[0007] 余量为水；
[0008] 所述主料为非懦性谷物或豆类，所述畜禽类和蔬菜类组成了辅料，所述糖类为单 糖或双糖。
[0009] 作为本发明的冬虫夏草菌丝体固体培养基的改进：
[0010] 所述非懦性谷物为小米、玉米、釉米、梗米、慧米、小麦；
[0011] 所述豆类为大豆、芸豆、魏豆、红豆、黑豆、绿豆、蚕豆.
[0012] 所述畜禽类为畜肉、禽肉或鱼肉，所述蔬菜类为馨类、块茎、块根、叶菜、瓜果或茹 (即，均为其可食用部分）；
[0013] 所述单糖为葡萄糖、果糖；
[0014] 所述双糖为薦糖、麦芽糖。
[0015] 备注说明：当非懦性谷物为小米时，可直接作为主料;当非懦性谷物为玉米、釉米、 梗米、慧米、小麦时，需事先粉碎至粒径含2mm;同理，上述所有的豆类需事先粉碎至粒径< 2mm 〇
[0016] 上述蔬菜类均为其可食用部分，因此，馨类、瓜果等均需要进行去皮处理。
[0017] 本发明还同时提供了上述冬虫夏草菌丝体固体培养基的制备方法，包括如下步 骤：
[001引①、将主料清洗干净；
[0019] ②、将辅料清洗后粉碎、匀浆，得浆料；
[0020] ③、将洗净后主料、浆料、糖类和水混合，经蒸或煮成熟饭；
[0021] ④、将熟饭经高溫灭菌处理，冷却至室溫后得冬虫夏草菌丝体固体培养基(简称固 体培养基）；待接种。
[0022] 备注说明：
[0023] 蒸或煮成熟饭是指用电饭優、高压锅等煮熟或蒸饭机蒸熟。如何判断米饭是否熟， 此为常规技术。
[0024] 高溫灭菌处理是指于121°C下灭菌20min，此也为常规技术。
[0025] 本发明还同时提供了利用上述固体培养基进行的基于食材的冬虫夏草菌丝体固 体培养法，选用冬虫夏草菌无性型中国被毛抱(Cordyceps SinensiS)，包括如下步骤： [00%] 1)、冬虫夏草菌无性型中国被毛抱(Cordyceps sinensis)制备成二级菌种；
[0027] 所述二级菌种中，中国被毛抱(Cordyc邱S sinensis)的含量为> 108cfu/ml;
[00%] 2)、先对培养箱进行灭菌消毒处理；
[0029] 然后按3~20% (V/W)接种量(例如为5%)将二级菌种接种到固体培养基，然后置 于灭菌后培养箱中于18~25°C培养6~8天(此时菌丝充满培养基间隙与表面），得菌丝体鲜 饼；
[0030] 上述3~20% (V/W)接种量，即是指每lOOg的固体培养基上接种3~20ml的二级菌 种。
[0031] 作为本发明的冬虫夏草菌丝体固体培养法的改进，该培养法还包括W下步骤：
[0032] 3)、菌丝体鲜饼干燥：
[0033] 将菌丝体鲜饼先于85~90°C(例如为85°C)烘30min，再于55°C烘干至含水率低于 8%;
[0034] 备注说明：上述85°C烘30min目的是杀灭烘箱内的微生物;55°C烘干至含水率低于 8%是防止高溫下其中的功能物质如虫草素的挥发损失，在烘干过程中可闻到其香味；
[0035] 4)、粉碎：
[0036] 将步骤3)所得的烘干菌丝饼粉碎过80目，得冬虫夏草菌丝体干粉。真空包装。
[0037] 作为本发明的冬虫夏草菌丝体固体培养法的进一步改进：
[0038] 所述步骤1)为：
[0039] 将中国被毛抱(Cordyc邱S sinensis)斜面菌种接种到PDA平板，得活化菌种;具体 为:无菌操作条件下，挑取冬虫夏草菌斜面菌苔，接种于PDA平板，于15~25°C下培养5d，得 冬虫夏草菌活化菌苔；
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