一种具有酪氨酸激酶抑制活性的噻唑类化合物的合成方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种具有酪氨酸激酶抑制活性的噻唑类化合物的合成方法，特别是涉 及N-[5-[(4-乙酰基-1-哌嗪基)羰基]-4-甲氧基-2-甲基苯基]巯基]-2-噻唑基]-4-[[(1， 2,2_三甲基丙烷)氨基]甲基]-苯甲酰胺及其衍生物的合成方法，属于有机合成领域。
[0002]背景介绍
[0003] 蛋白酪氨酸激酶是一类具有酪氨酸激酶活性的蛋白质，可分为受体型和非受体型 两种，其功能是催化ATP分子上的磷酸基转移到下游蛋白的酪氨酸(Tyr)残基上，使其发生 磷酸化。蛋白酪氨酸激酶在细胞内的信号转导通路中占据了十分重要的地位，调节着细胞 体内生长、分化、死亡等一系列生理化过程。蛋白酪氨酸激酶功能失调则引发生物体内一系 列疾病，大量资料表明，超过50 %的原癌基因和癌基因产物都具有蛋白酪氨酸激酶活性，它 们的异常激活或过度表达将导致细胞无限增殖，周期紊乱，进而导致肿瘤发生。此外，酪氨 酸基酶的异常表达还与肿瘤的侵袭、转移，肿瘤新生血管生成，肿瘤化疗抗性等都密切相 关。因此，以酪氨酸激酶为靶点的药物研发已经成为国际上抗肿瘤药物研究的热点，已有超 过20个不同家族的受体型酪氨酸被作为靶标进行抗肿瘤药物筛选，目前为止，已有十多种 蛋白酪氨酸激酶抑制剂和抗体进入I-II期临床试验阶段，个别的已经上市，并取得了很好 的治疗效果。
[0004] 癌细胞扩散(又称癌转移)能够侵袭更多的组织和功能，最终导致机体崩溃，90% 的癌症死亡都是由癌转移造成的。上皮-间质转化(EMT)是肿瘤细胞获得侵袭和转移能力的 最主要途径，目前有报道表明一类噻唑类化合物有一定的EMT抑制活性(W02002050071)，其 通式如式1所示，其中Ql为噻唑环，Q2为含取代基的芳环或芳杂环，N-[5-[(4-乙酰基-1-哌 嗪基)羰基]-4-甲氧基-2-甲基苯基]巯基]-2-噻唑基]-4-[[(1，2,2_三甲基丙烷)氨基]甲 基]-苯甲酰胺(BMS-509744)为其中重要的一种，其结构式如下式。
[0006] 现有的关于BMS-509744的合成方法的报道较少，专利W02002050071和文献 Bioorganic&Medicinal Chemistry Letters 16(2006)3706-3712公开的合成方法均为使 用化合物3与4-氯甲基苯甲酰氯反应得到化合物2后再与1，1，2_三甲基丙胺反应得到BMS-509744,使用该方法第二步需要使用闷罐密封反应，安全性差，且两步总收率低，最终产品 纯化困难，需要柱层析纯化，不利于放大生产。
[0008] 因此，需要开发新的简单、收率高、操作简便、后处理简单的合成方法，以利于工业 化生产。
【发明内容】
[0009] 本发明的目的是提供了一种具有下面通式（I)的化合物的合成方法，该方法简单、 收率高、操作简便、后处理简单，利于工业化生产。
[0011] 其中，R为&~C6的烷基、醇、醚。
[0012]本发明的制备方法可以用以下流程表示，化合物3与化合物II在溶剂中，缩合剂的 作用下反应得到化合物I。
[0014] 所述的缩合剂为1-羟基苯并三唑(HOBt)，1-(3_二甲氨基丙基)-3_乙基碳二亚胺 盐酸盐(EDCI )，2-( 7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N'，Ν'-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)，苯并三氮 唑-Ν，Ν，Ν'，Ν'_四甲基脲六氟磷酸盐(HBTU)，苯并三唑-1-基氧基三(二甲氨基)鱗六氟磷酸 盐(BOP)，IH-苯并三唑-1-基氧三吡咯烷基六氟磷酸盐(PyBOP)。
[0015] 所述的溶剂为乙腈，二氯甲烷，乙醇，甲醇，四氢呋喃，DMF，DMSO，NMP，二氧六环，乙 酸乙酯，甲苯，水，等或上述溶剂的任意组合。
[0016] 我们尝试了多种方法合成化合物I，本领域常用缩合条件下，反应效果皆不理想， 最后在使用HOBt和EDCI为缩合剂时，我们意外的发现加入微量水，提高反应温度，同时缩合 剂用量大大过量的条件下，可以得到纯度和收率较高的化合物I;
[0017] 本发明优选的，所述缩合剂为HOBt和EDCI，溶剂中为有机溶剂和水的混合溶剂，其 中水的含量为1%~5%，缩合反应温度为溶剂回流温度，所述的缩合剂与化合物3的摩尔投 料比为HOBt = EDCI :3 = 1~3:2~6:1，所述的化合物II与化合物3的摩尔投料比为1~3:1。 [0018]本发明更优选的一个实施例为，所述溶剂是乙腈和水的混合溶剂，其比例为60:1 ~30:1，所述反应温度为80~85°C。
[0019] 本发明另一更优选的实施例为，所述溶剂是四氢呋喃和水的混合溶剂，其比例为 60:1~30:1，所述反应温度为65~70°C。
[0020] 反应时间以检测反应完成为止，通常为1~24小时，较佳的为5~12小时。
[0021]所述化合物3按专利W02002050071报道的方法合成得到。
[0022]所述的化合物II可用如下流程合成：
[0024] 其中R的定义如前，办为&~(：5的烷基。
[0025] 步骤a:化合物IV与酮或醛在酸催化下，发生还原胺化反应，得到化合物III
[0027]所述反应的还原剂选自硼氢化钠、硼氢化锂、三乙酰氧基硼氢化钠、氰基硼氢化钠 等，优选三乙酰氧基硼氢化钠，所述的还原剂与化合物IV的摩尔比为1~5:1，优选为1.5~ 2.5:1 〇
[0028] 所述反应中醛或酮与化合物IV的摩尔比分别为3~8:1，优选为3~5:1。
[0029]所述反应使用的溶剂为甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷、1，2_二氯乙烷或四氢呋喃、2-甲基四氢呋喃等，优选甲醇；
[0030] 所述的反应时间以检测反应完成为止，通常为5~20小时，优选5~16小时。
[0031] 所述的反应温度为0~35°C，优选20~30°C。
[0032]所述的化合物IV市售购买得到。
[0033] 步骤b:化合物III经水解得到化合物II
[0035]所述的水解的方法和条件可以为本领域此类反应的常规方法和条件。
[0036]本发明的优点在于：
[0037] 1.我们尝试了多种方法合成化合物I，最后发现使用HOBt和EDCI为缩合剂，在高温 条件下，可以得到纯度和收率较高的化合物I;
[0038] 2.使用该方法合成化合物I，收率高、操作简便、后处理简单，适合工业化生产；
[0039] 3.为类似化合物的合成提供方法学参考。 具体实施例
[0040] 下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明 而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条 件进行。
[0041]实施例中所用的原料或试剂除特别说明之外，均市售可得。
[0042]实施例中所述的室温均指20_35°C。除非特别指出，所述的试剂不经纯化直接使 用。所有溶剂均购自商业化供应商，例如奥德里奇(Aldrich)，并且不经处理就可使用。反应 通过TLC分析和/或通过LC-MS分析，通过起始材料的消耗来判断反应的终止。分析用的薄层 层析(TLC)是在预涂覆硅胶60F2540.25毫米板的玻璃板(EMD化学品公司(EMD Chemicals)) 上进行的，用UV光(254nm)和/或硅胶上的碘显象，和/或与TLC染色物如醇制磷钼酸、水合茚 三酮溶液、高锰酸钾溶液或硫酸高铈溶液一起加热。
[0043] IH-NMR谱是在万瑞安-默丘利-VX400(Varian Mercury-VX400)仪上，在400MHz操 作下记录的。
[0044]本发明中使用的缩写具有本领域常规含义，如:DCM表示二氯甲烷，DMF表示N，N-二 甲基甲酰胺。
[0045] 实施例1
[0047] IL三口瓶中加入甲醇600mL，加入化合物IV(60g，363mmol，Ieq)，化合物SM-I (1828，1816111111〇1，569)，醋酸（0.511^，8.8111111〇1，0.02569)和44分子筛（2(^)，反应液在25~ 30°C下搅拌3小时。分10批计入恥8!1((^)3(1548,726111111〇1，269)，25~30°(3反应5小时。反应 液过滤，滤液浓缩干;再用水（I.0L)溶解，加入NaOH(3.0M)调pH至8~9。用乙酸乙酯(800mL* 2)萃取，合并有机相，干燥，浓缩得粗品82g，粗品直接用于下一步。ESI/MS:m/z = 250(M+H ) + ·
[0048] 实施例2
[0050] IL三口瓶中加入化合物111-1(828,329謹〇1，169)，加入甲醇30〇11^和四氢呋喃 240mL，加入4N氢氧化钠水溶液（164mL，658mmol，2eq)，反应液室温(25~30°C)搅拌过夜。反 应液浓缩，除去甲醇和四氢呋喃;再用水(500ml)稀释，乙酸乙酯萃取(200mL*2)，水相中加 入HC1(6.0M)调pH至3~4析出大量白色固体，过滤，滤饼用20mL水洗一次。滤饼烘干得到化 合物 Π -1 为白色固体 69g，两步总收率:81%，纯度:98.2%<^31/]\^:111/2 = 236(]\1+!〇 +
[0051 ] 实施例3
[0053] 500mL的三口瓶中依次加入化合物3(24g，59mmol，leq)、化合物II_l(27.8g， 118mmol，2 · Oeq)，H0Bt (8g，59mmol，leq)和EDCI · HCl (33 · 9g，177mmol，3eq)，加入乙臆 240mL、水4mL，反应液升温至回流(80~85°C)，反应5小时。将水（100ml)缓慢加入到体系中， 控温T>70°C;再降温至室温，析出白色固体。过滤，滤液浓缩后加入DCM(500ml)溶清，有机相 依次用IN HCl (300mL*2)、水（300mL* 1)，饱和碳酸氢钠（300mL*2)和盐水（300mL* 1)洗，有机 相用干燥，浓缩。将IOOmL MTBE加入到粗品中，升温至回流，搅拌30min，缓慢降温至室温，冷 却至〇°C，过滤，滤饼用少量MTBE洗，收集滤饼烘干，得到化合物BMS-509744为类白色固体 29g，HPLC纯度：98 · 1 %，收率：79 %。
[0054] 1H NMR(400MHz，CDC13)7.881-7.919(d，2H),7.506-7.526(d，2H)，7.248(s，lH)， 7.165(s,lH),6.747(s,lH),3.997-4.032(m,lH),3.211-3.809(m,12H),2.480-2.495(s, 3H),2.267(m,lH),2.051-2.113(d,3H),1.016-1.186(s,3H),0.890(s,9H),ESI/MS:m/z= 624(M+H) +
[0055] 实施例4
[0057] 50mL三口瓶中将化合物3(lg,2·5mmol，leq)溶于DMF(6mL)中，冰水浴降温至0°C， 小心快速加入NaH(0.2g，5mmol，2.Oeq)，大量气泡产生，反应液呈黄色浑浊，将化合物II-I (0.9g，3.8mmol，1.5eq)溶于DMF(3mL)中，缓慢滴加至反应体系。移去冰水浴，升温至40~50 °C反应5小时。LCMS检测反应杂乱。
[0058] 实施例5
[0060] 50mL三口瓶中加入化合物3 (Ig，2 · 5mmol，leq)、化合物II-I (0 · 9g，3 · 8mmol， I · 5eq)、HOBt (0 · 03g，0 · 25mmoI，0 · Ieq)和DMF(5mL)，加入EDCI · HCl (0 · 94g，5mmoI，2 · Oeq) 〇 室温搅拌过夜，LCMS检测，仅有15%的产品。
[0061 ] 实施例6
[0063] 50mL三口瓶中加入化合物3 (Ig，2 · 5mmol，leq)、化合物II-I (0 · 9g，3 · 8mmol， 1.5eq)、HATU(1.4g，3.8mmol，1.5eq)和5mL DMF，室温搅拌过夜LCMS检测，反应杂，仅有5% 的广品。
[0064] 实施例7
[0066] 50mL三口瓶中加入化合物3(lg，2 · 5mmol，leq)、化合物II_1( I · 2g，5mmol，2eq)和 5mL DMAc，反应液降温至-5~0°C，滴加氯化亚砜(0.6g，5mmol，2eq)，反应液室温搅拌5小 时，LCMS检测没有产品生成。
[0067] 实施例8
[0069] 50mL