一种液体菌种种子罐及其使用方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种菌体培养及接种的设备，具体涉及一种液体菌种种子罐，本发明还涉及所述液体菌种种子罐的使用方法，属于微生物培养制备领域。
【背景技术】
[0002]目前，利用种子罐培养菌种在本领域内基本上是现有技术。但是目前的现有技术，培养和接种时操作繁琐，容易产生细菌感染，造成失败。
【发明内容】
[0003]本发明的目的之一在于提供一种液体菌种种子罐。
[0004]液体菌种种子罐，在罐顶有一个接种口5，以及一个灭菌蒸汽通道1、空气精密过滤器2、净化空气通道3和废气出口 4，在罐体上部有一个观察窗6;所述灭菌蒸汽通道包括一个与罐体内部连通的蒸汽进口 KI，蒸汽进口 KI上有球阀F2，球阀F2与蒸汽进口 KI入口之间有一个分支管道，分支管道上有球阀Fl，在蒸汽进口Kl通过管道与空气精密过滤器连接，空气精密过滤器2上有压力表BI，蒸汽进口 Kl与空气精密过滤器2之间的管道上有球阀F3，球阀F3与空气精密过滤器2之间的管道上通过一个分支管道连接球阀F4和空气进口 K2，空气精密过滤器2与球阀F5相连;空气精密过滤器2与净化空气通道3之间有止回阀Zl，净化空气通道3上顺序安装有球阀F6和球阀F8，净化空气通道3与罐体内部连通，球阀F6和球阀F8之间通过一个分支管道连接有球阀F7，废气出口管道安装在罐顶上，废气出口管道上分别安装有压力表B2，球阀F9，压力表B2与球阀F9之间通过一个分支管道连接的止回阀Z2和安全阀Al0
[0005]本发明的液体菌种种子罐，结构合理，能极大程度避免菌种培养和接种时造成污染。液体菌种种子罐特定的管路，对菌球有破碎作用，在对液体菌种发酵罐接种时，产生大量菌丝碎片，有利于菌丝体在液体菌种发酵罐中迅速增殖。
[0006]本发明的另一个目的在于提供所述液体菌种种子罐的使用方法，具体包括如下步骤:
[0007]步骤一、空气除菌空气精密过滤器进行灭菌:球阀Fl、球阀F2、球阀F4、球阀F7闭，球阀F3、球阀F6、球阀F9通，蒸汽进口 Kl接通高温蒸汽，球阀F5微微出气排水，调节球阀F8使压力表BI稳定在0.14MPa，保持30分钟。
[0008]步骤二、空气除菌空气精密过滤器吹干:闭球阀F3，空气进口K2接通洁净空气，通球阀F4、球阀F7，球阀F8通气I分钟后关闭(防止形成真空，管路吸入培养液导致灭菌不彻底)，对滤芯进行吹干，直到液体菌种种子罐灭菌结束。
[0009]步骤三、液体菌种种子罐培养液进行灭菌:通球阀F2，培养沸腾后，球阀Fl微微通气，调节球阀F9使压力表B2稳定在0.14MPa，保持40分钟，闭球阀Fl、球阀F2。空气除菌空气精密过滤器吹干与液体菌种种子罐培养液进行灭菌同时进行。
[0010]步骤四、液体菌种种子罐通入空气:待压力表B2显示0.05MPa左右时，闭球阀F5、球阀F7，通球阀F8，调节球阀F9使压力表B2稳定在0.1MPa0
[0011 ]步骤五、接入菌种:待培养液温度下降至25度左右时，用火圈保护接种口，接入三角瓶菌种。
[0012]步骤六、取样检测:准备对液体菌种发酵罐进行接种的前一天进行取样检测，闭球阀F6、球阀F9，在火焰的保护下，微微打开球阀F7，液体菌种自动流出，完成取样，取样结束后，阀门恢复到取样前的状态。检测取样，如无污染，液体菌种种子罐即可用于液体菌种发酵罐接种。
[0013]步骤七、对液体菌种发酵罐接种:液体菌种发酵罐灭菌时，用硅胶管连接液体菌种发酵罐顶部菌种接入口与液体菌种种子罐蒸汽进口Kl，打开液体菌种发酵罐菌种接入口阀门，调节球阀Fl，使其微微出气排水，直到液体菌种发酵罐灭菌结束，闭球阀Fl。液体菌种发酵罐冷却后进行接种，闭球阀F9，通球阀F2，液体菌种种子罐内液体菌种通过硅胶管全部自动注入液体菌种发酵罐，关闭液体菌种发酵罐顶部菌种接入口，完成接种工作。
[0014]本液体菌种种子罐适用对200-5000L的液体菌种发酵罐进行接种。
[0015]容积为液体菌种发酵罐的5%。
[0016]—般而言，本液体菌种种子罐使用时需要如下条件:1、有无油洁净的空气源。2、有压力0.2MPa以上的蒸汽源。3、室内有空调。
[0017]本发明具有如下优势:
[0018]1、液体菌种种子罐与液体菌种发酵罐分离，单独灭菌、接种，每个液体菌种种子罐均可接种不同的液体菌种发酵罐。如果液体菌种种子罐污染，不影响液体菌种发酵罐正常使用，损失较小。
[0019]2、液体菌种发酵罐灭菌前，用硅胶管连接液体菌种发酵罐与液体菌种种子罐，液体菌种发酵罐灭菌时，同时对接种管路进行灭菌，接种过程污染概率为零，液体菌种种子罐如无污染，则液体菌种发酵罐接种成功率100 %。
[0020]3、创新管路连接，灭菌蒸汽入口兼作菌种出口，净化空气通道兼作采样口，管路独特简洁，操作方便，无死角，可方便地完成灭菌、通气、接入菌种、采样和对液体菌种发酵罐接种等各项操作。菌种出口与采样口分置，可避免采样口万一污染对接种过程的影响。
[0021 ] 4、液体菌种种子罐特定的管路，对菌球有破碎作用，在对液体菌种发酵罐接种时，产生大量菌丝碎片，有利于菌丝体在液体菌种发酵罐中迅速增殖。
【附图说明】
[0022]图1为本发明液体菌种种子罐的整体示意图；
[0023]图2为本发明液体菌种种子罐的剖面图；
[0024]图3为本发明液体菌种种子罐盖面的结构示意图。
【具体实施方式】
[0025]下面结合附图对本发明作进一步的说明。
[0026]如附图1、2、3所示，液体菌种种子罐，在罐顶有一个接种口5，以及一个灭菌蒸汽通道1、空气精密过滤器2、净化空气通道3和废气出口 4，在罐体上部有一个观察窗6;所述灭菌蒸汽通道包括一个与罐体内部连通的蒸汽进口Kl，蒸汽进口Kl上有球阀F2，球阀F2与蒸汽进口Kl入口之间有一个分支管道，分支管道上有球阀Fl，在蒸汽进口Kl通过管道与空气精密过滤器连接，空气精密过滤器2上有压力表BI，蒸汽进口 Kl与空气精密过滤器2之间的管道上有球阀F3，球阀F3与空气精密过滤器2之间的管道上通过一个分支管道连接球阀F4和空气进口 K2，空气精密过滤器2与球阀F5相连;空气精密过滤器2与净化空气通道3之间有止回阀Zl，净化空气通道3上顺序安装有球阀F6和球阀F8，净化空气通道3与罐体内部连通，球阀F6和球阀F8之间通过一个分支管道连接有球阀F7，废气出口管道安装在罐顶上，废气出口管道上分别安装有