富马酸替诺福韦艾拉酚胺杂质的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及富马酸替诺福韦艾拉酚胺杂质的制备方法。
【背景技术】
[0002] 富马酸替诺福韦艾拉酸胺（tenofoviralafenamidefumarate)，化学名为 9- [ (R) -2- [[ (S) - [[ (S) -1-(异丙氧基羰基）乙基]氨基]苯氧基氧膦基]甲氧基]丙基]腺 噪呤富马酸盐，是一种新型核苷酸类逆转录酶抑制剂。该化合物是由美国GileadSciences 公司研发，2015年在美国上市，用于治疗成人HIV感染。该药物也被用于治疗乙肝，目前处 于III期临床。本品口服后迅速转变为替诺福韦，在细胞激酶的作用下被磷酸化为替诺福 韦二磷酸盐，通过竞争性地与天然脱氧核糖底物相结合抑制病毒聚合酶和插入到病毒NDA 后引起DNA链延长终止，从而抑制HIV和HBV活性。
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[0004] 富马酸替诺福韦艾拉酚胺及替诺福韦艾拉酚胺（VIII)的合成主要反应路线如 下：
[0005] (1)以（R)_替诺福韦为原料，经DCC缩合得9-[(R)-2_[[(苯氧基氧膦基） 甲氧基]丙基]]腺嘌呤（II)，经过氯代、与L-丙氨酸异丙酯反应得9-[(R)-2-[[(R， s)-[[(s)-i-(异丙氧基羰基）乙基]氨基]苯氧基氧膦基]甲氧基]丙基]腺嘌呤，拆分 后得9-[(R)-2-[[(S)-[[(S)-l-(异丙氧基羰基）乙基]氨基]苯氧基氧膦基]甲氧基] 丙基]腺嘌呤（VIII)，最后经成盐得富马酸替诺福韦艾拉酚胺。
[0006] ⑵以（R)_替诺福韦为原料，经氯代，与苯氧基三甲基硅烷酯化得 9_ [ (R)-2-[[(苯氧基氧膦基）甲氧基]丙基]]腺嘌呤（II)，再经过氯代，与L-丙氨酸异丙 酯反应得成盐得9-[0?)-2-[[0?，幻-[[(5)-1-(异丙氧基羰基）乙基]氨基]苯氧基氧膦 基]甲氧基]丙基]腺嘌呤，拆分后得9-[(R)-2-[[(S)-[[(S)-l-(异丙氧基羰基）乙基] 氨基]苯氧基氧膦基]甲氧基]丙基]腺嘌呤（VIII)，最后经成盐得富马酸替诺福韦艾拉 酚胺。
[0007] (3)以（R)_替诺福韦为原料，与亚磷酸三苯酯反应得9-[(R)-2_[[(苯氧基氧膦 基）甲氧基]丙基]]腺嘌呤（II)，经过氯代、与L-丙氨酸异丙酯反应得9-[(R)-2-[[(R， s)-[[(s)-i-(异丙氧基羰基）乙基]氨基]苯氧基氧膦基]甲氧基]丙基]腺嘌呤，拆分 后得9-[(R)-2-[[(S)-[[(S)-l-(异丙氧基羰基）乙基]氨基]苯氧基氧膦基]甲氧基] 丙基]腺嘌呤（VIII)，最后经成盐得富马酸替诺福韦酯。
[0008] 其中，富马酸替诺福韦艾拉酚胺合成关键在于杂质的控制，因此富马酸替诺福韦 艾拉酚胺杂质的合成研究具有重要意义。文献指出富马酸替诺福韦艾拉酚胺需要研究的 杂质包括：替诺福韦艾拉酚胺异丙酯杂质，化学名：9-[ (R) -2-[[ (S) -[[ (S) -1-异丙氧基苯 氧基氧膦基]甲氧基]丙基]腺嘌呤（IV);替诺福韦艾拉酚胺二苯酯杂质（VI)，化学名： 9-[(R)_2-[[(S)-[二-(苯氧基）氧膦基]甲氧基]丙基]腺嘌呤；替诺福韦艾拉酚胺二 酰胺杂质（VII)，化学名：9-[(R)-2-[[二-[[(S)-l-(异丙氧基羰基）乙基]氨基]氧膦 基]甲氧基]丙基]腺嘌呤等。国内外对于富马酸替诺福韦艾拉酚胺杂质的合成报道文献 极少。
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【发明内容】
[0010] 本发明涉及富马酸替诺福韦艾拉酚胺三个杂质：替诺福韦艾拉酚胺异丙酯杂质 (IV)，替诺福韦艾拉酚胺二苯酯杂质（VI)，替诺福韦艾拉酚胺二酰胺杂质（VII)的合成方 法，本发明的合成路线如下：
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[0012] 杂质（VI)和（IV)以9-[(R)-2-[[(苯氧基氧膦基）甲氧基]丙基]]腺嘌呤（II) 为原料，（VII)以（R)_替诺福韦（I)为原料。其中9-[(R)-2_[[(苯氧基氧膦基）甲氧基] 丙基]]腺嘌呤（II)是替诺福韦艾拉酚胺（VIII)合成过程中的中间体。
[0013] 杂质（IV)，（VI)和（VII)的制备方法至今仍未见文献报道。
[0014] 本发明的合成步骤：
[0015] (l)9-[(R)-2-[[(S)-[[(S)-l-异丙氧基苯氧基氧膦基]甲氧基]丙基]腺嘌呤 (IV)的制备
[0016] ①9-[(R)-2-[[(S)-[[(S)_l-异丙氧基苯氧基氧膦基]甲氧基]丙基]腺嘌呤 (IV)以9-[(R)-2-[[(苯氧基氧膦基）甲氧基]丙基]]腺嘌呤（II)为原料，通过氯代，碱 性条件下与异丙醇酯化，酯化反应温度-5~0°C，再经制备液相拆分制得。
[0017] ②9-[(R)-2-[[(S)-[[(S)-l-异丙氧基苯氧基氧膦基]甲氧基]丙基]腺嘌呤 (IV)的制备方法中所用溶剂选自丙酮、四氢呋喃、二氯甲烧、氯仿、乙腈、乙酸乙酯、四氢吡 略、三乙胺、吡啶、哌啶、N-甲基吡咯烷酮、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺，本发明 优选乙腈作为溶剂。
[0018] 9-[(R)-2-[[(S)-[[(S)-l-异丙氧基苯氧基氧膦基]甲氧基]丙基]腺嘌呤（IV) 的制备方法中，9-[(R)-2-[[(苯氧基氧膦基）甲氧基]丙基]]腺嘌呤（II)与溶剂的重量 体积比为1 : 10~20。
[0019] ③9-[(R)-2-[[(S)-[[(S)-l-异丙氧基苯氧基氧膦基]甲氧基]丙基]腺嘌呤 (IV)的制备方法中，所用氯代试剂选自氯化亚砜，草酰氯，三氯化磷，五氯化磷，三光气，本 发明优选氯化亚砜作为氯代试剂。
[0020] 9-[(R)-2-[[(苯氧基氧膦基）甲氧基]丙基]]腺嘌呤（II)与氯化亚砜反应的摩 尔比为1 : 1~2,本发明优选1 : 2。
[0021 ] ④碱性条件下酰氯与异丙醇反应制得的9-[ (R) -2-[ [ (R，S) -[ [ (S) -1-异丙氧基 苯氧基氧膦基]甲氧基]丙基]腺嘌呤，其中所述的碱的种类和用量均可为本领域此类反 应的常规溶剂和用量，本发明优选下述碱和碱的用量：其中，所述的碱较佳的为，碳酸氢钠， 碳酸氢钾，三乙胺、N，N-二异丙基乙胺、二乙胺、吡啶、咪唑、4-二甲基吡啶；所述的碱的用 量较佳的为1~1. 5当量，调节溶液pH至7~9。
[0022] ⑤9-[(R)-2-[[(S)-[[(S)_l-异丙氧基苯氧基氧膦基]甲氧基]丙基]腺嘌呤 (IV)的制备方法中，9-[(R)-2-[[(S)-[[(S)-l-异丙氧基苯氧基氧膦基]甲氧基]丙基] 腺嘌呤（IV)采用制备液相方法拆分。
[0023] (2)9-[(R)-2-[[(S)_[二_(苯氧基）氧膦基]甲氧基]丙基]腺嘌呤（VI)的制 备
[0024] ①替诺福韦艾拉酚胺二苯酯杂质（VI)以9-[(R)-2_[[(苯氧基氧膦基）甲氧基] 丙基]]腺嘌呤（II)为原料，通过氯代，碱性条件下与苯酚酯化制得，酯化反应温度-5~ (TC〇
[0025] ②替诺福韦艾拉酚胺二苯酯杂质（VI)的制备方法中，所用溶剂选自丙酮、四氢呋 喃、二氯甲烷、氯仿、乙腈、乙酸乙酯、四氢吡略、吡啶、哌啶、N-甲基吡咯烷酮、N，N-二甲基 甲酰胺。
[0026] 替诺福韦艾拉酚胺二苯酯杂质（VI)的制备方法中，9-[(R)-2_[[(苯氧基氧膦基） 甲氧基]丙基]]腺嘌呤（II)与溶剂的重量体积比为1 : 10~20。
[0027] ③替诺福韦艾拉酚胺二苯酯杂质（VI)的制备方法中，所用氯代试剂选自氯化亚 砜，草酰氯，三氯化磷，五氯化磷，三光气，本发明优选氯化亚砜作为氯代试剂。
[0028]9-[(R)-2_[[(苯氧基氧膦基）甲氧基]丙基]]腺嘌呤（II)与氯化亚砜反应的摩 尔比为1 : 1~2,本发明优选1 : 2。
[0029]④碱性条件下酰氯与苯酚反应制得的替诺福韦艾拉酚胺二苯酯杂质（VI)，其中， 所述的碱的种类和用量均可为本领域此类反应的常规溶剂和用量，本发明优选下述碱和碱 的用量：其中，所述的碱较佳的为，碳酸氢钠，碳酸氢钾，三乙胺、N，N-二异丙基乙胺、二乙 胺、吡啶、咪挫、4-二甲基吡啶；所述的碱的用量较佳的为1~1. 5当量，调节溶液pH至7~ 9〇
[0030] ⑤替诺福韦艾拉酚胺二苯酯杂质（VI)的制备方法中，替诺福韦艾拉酚胺二苯酯 杂质（VI)精制采用硅胶柱层析方法，洗脱剂采用甲醇/二氯甲烷体系，优选甲醇：二氯甲 烧=1 : 20 ~30。
[0031] (3)9-[(R)-2-[[二_[[(S)-1-(异丙氧基羰基）乙基]氨基]氧膦基]甲氧基] 丙基]腺嘌呤（VII)的制备
[0032] ①替诺福韦艾拉酚胺二酰胺杂质（VII)以9-[(R)-2_(膦酰基甲氧基）丙基] 腺嘌呤（I)为原料，通过氯代，碱性条件下与L-丙氨酸异丙酯酰胺化制得，酰胺化反应温 度-5~0。。。
[0033] ②替诺福韦艾拉酚胺二酰胺杂质（VII)的制备方法中，所用溶剂选自丙酮、四氢 呋喃、二氯甲烷、氯仿、乙腈、乙酸乙酯、四氢吡略、吡啶、哌啶、N-甲基吡咯烷酮、N，N-二甲 基甲酰胺。
[0034] 替诺福韦艾拉酚胺二酰胺杂质（VII)的制备方法中，9-[(R)-2_(膦酰基甲氧基） 丙基]腺嘌呤（I)与溶剂的重量体积比为1 : 10~20。
[0035] ③替诺福韦艾拉酚胺二酰胺杂质（VII)的制备方法中，所用氯代试剂选自氯化亚 砜，草酰氯，三氯化磷，五氯化磷，三光气，本发明优选氯化亚砜作为氯代试剂。
[0036] 9-[(R)-2_(膦酰基甲氧基）丙基]腺嘌呤⑴与氯化亚砜反应的摩尔比为 1 : 1~2,本发明优选1 : 2。
[0037] ④碱性条件下酰氯与L-丙氨酸异丙酯反应制得的替诺福韦艾拉酚胺二酰胺杂质 (VII)，其中，所述的碱的种类和用量均可为本领域此类反应的常规溶剂和用量，本发明优 选下述碱和碱的用量：其中，所述的碱较佳的为碳酸氢钠，碳酸氢钾，三乙胺、N，N-二异丙 基乙胺、二乙胺、吡啶、咪挫、4-二甲基吡啶；所述的