一种新的睡茄内酯类化合物及其制备方法和用于神经保护的医药用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物技术领域，具体设及从檐子的干燥成熟果实中分离得到的一种具 有神经保护作用的睡茄内醋类化合物及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 檐子（GardeniajasminoidesEllis.)是茜草科（Rubiaceae)檐子属常绿灌木， 又名山檐子、黄檐子、黄枝子等，主产于浙江、福建、江西、湖南、广东。檐子的干燥成熟果实 入药称檐子，中国历版药典和本草均有记载，为常用中药。其性寒味苦，无毒，主归屯、、肺、= 焦经，具有泻火除烦、清热利尿、凉血解毒等功效。临床广泛用于热病屯、烦、黄痘尿赤、血淋 涩痛、血热吐赃、目赤肿痛、火毒疮瘍等证；其根功能清热、凉血、解毒，民间主要用于黄痘性 肝炎、肾炎水肿、感冒高热、出血吐血、跌打损伤、疮瘍肿毒等病症的治疗；叶可消肿止痛，治 疗跌打损伤；花可清肺热凉血降脂，治疗肺热咳嗽、鼻赃。
[0003] 檐子属植物化学成分的研究始于20世纪20年代，具有特征性的化合物主要包括 环締酸祗类、有机酸类和黄酬类。檐子中含有大量的环締酸祗类化合物，有4种主要类型： 环締酸祗烧类、环締酸祗巧类、环締酸祗二缩醒醋类和裂环締酸祗巧类。环締酸祗基本骨架 经环氧化、径基化及由莽草酸途径得到的芳香酸醋化，导致了该类化合物的多样性，同时也 导致其药理活性的多样性。
[0004] 跪子是常用中药，备受国内外学者的重视，研究工作较多。现代药理实验表明，檐 子中的环締酸祗类成分有明显的抗炎镇痛、保肝利胆、抗血栓等活性；有机酸类中的藏红花 巧类成分具抗炎、抗血栓、调血脂、抗屯、肌缺血等活性。随着科学技术的不断进步，对其研究 也有了许多创新和突破，尤其对其中的环締酸祗类成分的研究，新的化合物和药理作用不 断被发现，药理作用机制也得到了深入的研究。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种从檐子的干燥成熟果实中分离得到的一种具有神经保 护作用的睡茄内醋类化合物及其制备方法。
[0006] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得W实现的：
[0007] 具有下述结构式的化合物（I)，
[0008]
[0009] 所述的化合物（I)的制备方法，包含W下操作步骤：(a)将檐子的干燥成熟果实 粉碎，用75~85%乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油酸、乙酸乙醋 和水饱和的正下醇萃取，分别得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物；化）步 骤（a)中乙酸乙醋萃取物用大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱8个柱体积，再用75%乙醇 洗脱10个柱体积，收集75 %乙醇洗脱液，减压浓缩得75 %乙醇洗脱物浸膏；(C)步骤化） 中75 %乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为85:1、40:1、20:1、12:1和1:1的二 氯甲烧-甲醇梯度洗脱得到5个组分；（d)步骤（C)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次 用体积比为20:1、12:1和5:1的二氯甲烧-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤（d)中 组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为70%的甲醇水溶液等度洗 脱，收集8~10个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物（I)。
[0010] 进一步地，步骤（a)中，用80%乙醇热回流提取，合并提取液。
[0011] 进一步地，所述大孔树脂为AB-8型大孔吸附树脂。
[0012] 药物组合物，其中含有治疗有效量的所述的化合物（I)和药学上可接受的载体。
[0013] 所述的化合物（I)在制备神经保护的药物中的应用。
[0014] 所述的药物组合物在制备神经保护的药物中的应用。
[0015] 本发明化合物用作药物时，可W直接使用，或者W药物组合物的形式使用。
[0016] 该药物组合物含有治疗有效量的本发明化合物（I)，其余为药物学上可接受的、 对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。
[0017] 所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料 W及药物制品辅剂。将本发明的药物组合物W单位体重服用量的形式使用。本发明药物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等；用于注射时，可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。
【附图说明】 阳〇1引图1为化合物（I)结构式；
[0019] 图2为化合物（I)理论ECD值与实验ECD值比较；
[0020] 图3为化合物（I)对培养不同时间海马神经元细胞活力的影响；
[0021] 图4为化合物（I)对AP25-35诱导海马神经元细胞活力的影响；
[0022] 图5为化合物（I)对AP25-35诱导的海马神经细胞调亡的影响。
【具体实施方式】
[0023] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不W此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可W对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0024] 实施例1 :化合物（I)分离制备及结构确证
[00巧]试剂来源：乙醇、石油酸、乙酸乙醋、正下醇、二氯甲烧为分析纯，购自上海凌峰化 学试剂有限公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。 W26] 制备方法：（a)檐子的干燥成熟果实（IOkg)粉碎，用80%乙醇热回流提取 (2化X3次），合并提取液，浓缩至无醇味（3L)，依次用石油酸（化X3次）、乙酸乙醋0LX3 次）和水饱和的正下醇（3LX3次）萃取，分别得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物（398g) 和正下醇萃取物；(b)步骤（a)中乙酸乙醋萃取物用AB-8型大孔树脂除杂，先用10%乙醇 洗脱8个柱体积，再用75 %乙醇洗脱10个柱体积，收集75 %乙醇洗脱液，减压浓缩得75% 乙醇洗脱物浸膏（163g) ; (C)步骤化）中75%乙醇洗脱浸膏用200-300目正相硅胶分离，依 次用体积比为85:1 (8个柱体积）、40:1 (8个柱体积）、20:1(8个柱体积）、12:1(10个柱体 积）和1:1巧个柱体积）的二氯甲烧-甲醇梯度洗脱得到5个组分；（d)步骤（C)中组分 4 (49g)用200-300目正相硅胶进一步分离，依次用体积比为20:1 (8个柱体积）、12:1 (10个 柱体积）和5:1巧个柱体积）的二氯甲烧-甲醇梯度洗脱得到3个组分；(e)步骤（d)中 组分2 (25g)用十八烷基硅烷键合的反相硅胶0DS-C18分离，用体积百分浓度为70 %的甲 醇水溶液等度洗脱，收集8~10个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物（I) (44mg)。
[0027] 结构确证：白色无定形粉末；HR-ESIMS显示[M+Na]+为m/z491. 2406,结合核磁 特征可得分子式为CzsHseOe,不饱和度为11。核磁共振氨谱数据5H(ppm,DMSO-de，500MHz):H-2(2. 89，dd，J= 18. 8,3. 3)，H-2(2. 41，dd，J= 18. 8,2. 2)，H-3(4. 19，dd，J= 3. 3,2. 2)， H-4(3. 60,d，J= 9. 4)，H-7(2. 20,dt，J= 14. 6,3. 5)，H-7(1.98,dd，J= 14. 6,11.3)， H-8(I. 52,m)，H-9 (I. 39,m)，H-Il(I. 09,m)，H-Il(0. 91，dd，J= 13. 2,4. 0)，H-12 (I. 79,m)， H-12 (I. 13,m)，H-14 (I. 01，m)，H-15 (I. 55,m)，H-15 (I. 08,m)，H-16 (I. 59,m)，H-16 (I. 27， m)，H-17 (I. 03,m)，H-18 (0. 80,s)，H-19 (4. 09,d，J= 9. 0)，H-19 (3. 77,d，J= 9. 0)， H-20 (I. 89,m)，H-21 (0. 95,d，J=6. 7)，H-22 (4. 26,dt，J= 13. 3, 3. 5)，H-23 (2. 33， br，dd，J= 17. 0,13.3)，H-23 (1.95,m)，H-27 (2.21，s)，H-28 (2.07,s);核磁