柑橘籽中亚油酸的提取方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种柑橘籽中亚油酸的提取方法。
【背景技术】
[0002] 柑橘籽是柑橘果实加工过程中的废弃物之一，柑橘籽中含有丰富的油脂和植物蛋 白，其中油脂含量不亚于油料作物大豆，尤其柑橘籽中含有的亚油酸，具有降低胆固醇、预 防粥样动脉硬化、降低血压等作用，是人体所需的必需脂肪酸，具有丰富的产业利用价值。 但由于缺乏良好的提取利用方式，目前柑橘籽更多地还是作为废弃物丢弃，尤其在作为柑 橘主产区的福建省，加工或食用柑橘后大量的柑橘籽堆积如山，在造成资源浪费的同时，也 对垃圾处理、环境保护等带来了难题。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供了一种柑橘籽中亚油酸的提取 方法，操作简单、提取率好、纯度高，为亚油酸的生产工艺研究及柑橘籽的废物再利用提供 了思路。
[0004] 本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：
[0005] -种柑橘籽中亚油酸的提取方法，包括：
[0006] 1)将柑橘籽粉碎成粒径为10~40目的柑橘籽粉，按料液比（w/v) 1:3~8加入正 己烷，在35°C~60°C水浴中提取0. 5~2. 5h，重复提取1~3次；合并提取液，过滤分离， 滤液经减压蒸馏除去溶剂，得到柑橘籽油；
[0007] 2)取上述之柑橘籽油，按料液比（w/v) 1:2~4加入35~45% (w/v)Na0H-CH30H 溶液，在75°C~85°C水浴中反应1. 5~2. 5h;取出，加水搅拌至溶解，调节pH值至1~3， 搅拌均匀，分出油层，加入正己烷萃取，加水洗涤正己烷层至pH值为6. 8~7. 2 ;减压蒸馏 除去溶剂，加入干燥剂除水干燥，得到混合脂肪酸；
[0008] 3)取上述之混合脂肪酸，按尿素和混合脂肪酸1~3:1 (w/w)的比例，加入1:2~ 5 (w/v)的尿素-乙醇溶液，搅拌均匀，75°C~85°C回流25~35min，冷却至室温；在-10°C~ 〇°C下包合3~12h，抽滤，滤液经减压蒸馏除去溶剂；加水溶解残渣，调节pH值至1~3,转 移至分液漏斗中，加水洗涤至pH值为6. 8~7. 2,加入干燥剂除水干燥，得到亚油酸。
[0009] -实施例中：所述步骤1)中，将柑橘籽粉碎成粒径为20目的柑橘籽粉，按料液比 (w/v) 1:7加入正己烷，在40°C水浴中提取2h，重复提取2次；合并提取液，过滤分离，滤液 经减压蒸馏除去溶剂，得到柑橘籽油。
[0010] 一实施例中：所述步骤3)中，取上述之混合脂肪酸，按尿素和混合脂肪酸2:l(w/ w)的比例，加入1:4 (w/v)的尿素-乙醇溶液，搅拌均匀，75°C~85°C回流25~35min，冷 却至室温；在_5°C下包合4h，抽滤，滤液经减压蒸馏除去溶剂；加水溶解残渣，调节pH值至 1~3,转移至分液漏斗中，加水洗涤至pH值为6. 8~7. 2,加入干燥剂除水干燥，得到亚油 酸。
[0011] -实施例中：所述步骤3)中，尿素-乙醇溶液的制备方法为：将尿素和乙醇按 1:2~4 (w/v)混合后，75°C~85°C回流至尿素全部溶解，得到尿素-乙醇溶液。
[0012] 一实施例中：所述干燥剂为无水硫酸钠。
[0013] 一实施例中：还包括：
[0014] 4)测定步骤3)所得之亚油酸纯度：该亚油酸纯度通过气相色谱法测定：
[0015] 待测样品处理：取步骤3)所得之亚油酸，按料液比（w/v)l:38~42加入9:l(v/ v)的甲醇-硫酸溶液，75°C~85°C水浴回流10~20min，按料液比（w/v) 1:18~22加入 正己烧，称重，继续回流1.4~1.6h;取出放冷，补回失重；分液，取正己烷层水洗至pH值为 6. 8~7. 2后，取100μL与100μL肉豆蘧酸甲酯内标物混合，得到待测样品；
[0016]色谱条件：DB-WAX色谱柱；FID检测器；程序升温，起始温度195~210°C，以：TC/ min速率升至235~250°C并保持4~6min;进样口温度270~290°C，检测器温度270~ 290°C;载气为N2，柱体积流速0. 55~0. 65mL/min，分流比为18~22:1。
[0017] 本发明所述步骤1)中，当料液比低于1:3时，柑橘籽油提取率降低，当料液比超 过1:8后，再增加溶剂用量，柑橘籽油提取率变化不明显，保持稳定；而当温度低于35°C或 高于60°C，柑橘籽油提取率降低；提取时间低于0. 5h，柑橘籽油提取率降低，提取时间超过 2. 5h后，柑橘籽油提取率升高不明显，趋于稳定；提取次数低于2次时，柑橘籽油提取率降 低，提取次数高于4次时，增加提取次数，柑橘籽油提取率变化不大。
[0018] 本发明所述步骤3)中，当尿素与混合脂肪酸比例低于1:1时，随着尿素用量减少， 亚油酸纯度降低，尿素与混合脂肪酸比例高于3:1时，随着尿素用量增加，亚油酸回收率降 低；尿素-乙醇溶液中尿素与乙醇比例低于1:2时，亚油酸纯度降低，高于1:5后，亚油酸回 收率降低；包合温度低于-i〇°c，亚油酸回收率降低，高于0°C，亚油酸纯度降低；包合时间 低于3h，亚油酸纯度降低，高于12h，亚油酸回收率降低。
[0019] 本发明中所述室温为25°C。
[0020] 本发明中所述包合意义如下：尿素是四方晶体，当尿素在低温条件下如本发明所 述的-10°C~0°C条件下与直链脂肪酸化合物溶液混合后，尿素将以直链脂肪酸化合物为 轴心，围绕脂肪酸化合物盘旋堆积上升，将脂肪酸化合物包住，此过程即称为包合。
[0021] 本技术方案与【背景技术】相比，它具有如下优点：
[0022] 1.柑橘是我国的传统优势产品，占柑橘国际贸易额的七成，但原料的加工比例低， 产生大量的废渣，还需要花费很多额外成本进行废料处理，成本高昂，也造成资源的极大浪 费，本发明首次提供了从柑橘籽中提取亚油酸的工艺，使柑橘籽能够得到充分再利用，减少 浪费的同时也大大减轻了废料处理和环境污染的压力。
[0023] 2.本发明速提供的柑橘籽中亚油酸的提取方法，操作简单，亚油酸的提取率高、纯 度可高达90%，为亚油酸的生产工艺研究及柑橘籽的废物再利用提供了思路，且所需设备 简单经济，试剂价格低廉、来源广泛、易于获得，尤其适合推广用于亚油酸的大规模生产。
[0024] 3.本发明提供的亚油酸纯度气相色谱测定方法具有较高的精密度和准确度，在线 性范围内表现出良好的稳定性，分析时间短，具有广泛的适用性，可以作为柑橘籽油中亚油 酸的测定方法。
【附图说明】
[0025] 下面结合附图和实施例对本发明作进一步说明。
[0026] 图1为本发明的气相色谱法对照品及内标物谱图，图中1为内标物峰，图中2为对 照品峰。
[0027] 图2为本发明的气相色谱法线性关系图。
【具体实施方式】
[0028] 下面通过实施例具体说明本发明的内容：
[0029] 实施例1
[0030] 1)将柑橘籽（购自浙江某生物科技有限公司）粉碎成粒径为20目的柑橘籽 粉，精密称取5. 0g置于100ml锥形瓶中，按料液比1:7加入35ml正己烷，在40°C水 浴中提取2h，重复提取2次；合并提取液，过滤分离，滤液置于旋转蒸发仪中，在40°C， 50rpm，-0. 1~-0. 08MPa条件下减压蒸馈回收溶剂后，得到柑橘籽油；
[0031] 柑橘籽油在105°C干燥lh后称重，重复称重2次取其平均值得到柑橘籽油质量，按 下式计算柑橘籽油提取率：
[0032] 柑橘籽油提取率=(柑橘籽油质量/柑橘籽粉质量）X100 %
[0033] 本实施例中，柑橘籽粉质量为5. 0g。
[0034] 经计算，柑橘籽油提取率为40. 05%。
[0035] 2)取上述之柑橘籽油150g，按料液比1:3加入450ml的40 % (w/v)Na0H-CH30H溶 液，在80°C水浴中反应2h;取出，加适量50~70°C温水溶解，搅拌30min，缓慢加入20%HC1 调节成pH值为2的酸性溶液，搅拌15min，分出油层，加入正己烷萃取，用50~70°C温水洗 涤正己烷层至pH值为6. 8~7. 2,置于旋转蒸发仪中，在40°C，50rpm，-0. 1~-0. 08MPa条 件下减压蒸馏除去溶剂后，加无水硫酸钠干燥，得到混合脂肪酸；
[0036] 3)将尿素和95%乙醇按l:4(w/v)混合后，80°C回流至尿素全部溶解，得到尿 素-乙醇溶液；取步骤2)所得之混合脂肪酸5. 0g，按尿素和混合脂肪酸2:1 (w/w)的比例， 加入40ml尿素-乙醇溶液，搅拌均匀，80°C回流30min，冷却至室温；在-5°C下包合4h;抽 滤，滤液置于旋转蒸发仪中，在40°C，5〇rpm，-0. 1~-