一种西柏烷二萜化合物及其分离与应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于化合物技术领域，具体涉及一种西柏烷二萜化合物及其分离与应用。
【背景技术】
[0002] 天然产物是药物的重要来源，也在抗肿瘤药物开发中起着重要的作用。据报道，在 1981年至2006年间上市的新药中有50%直接或间接来源于天然产物，其中，约有2/3的抗 肿瘤药物来源于天然产物。
[0003] 西松烧二砲属于十四元大环二砲，最早于1951年分离自植物ineoleresins和烟 草中。1960年代以来，相继从海洋生物中分离得到了一系列西松烷二萜类化合物，至2013 年2月，已报道从自然界得到西松烷二萜700多个，这类化合物结构新颖、复杂、种类繁多， 目前所得到的大多数西松烷型二萜类化合物都具有较好的细胞毒、抗肿瘤、抑菌和调节植 物生长等生物活性。
[0004]目前，分离获得的西松烷二萜主要来至海洋生物软珊瑚、柳珊瑚等软体海洋动物。 相对于海洋生物，烟草不仅资源丰富，生物产量高，生产成本低，而且西松烷二萜含量丰富， 据报道，目前从烟草中分离获得的西松烷二萜化合物已达50多个。因此，进一步挖掘烟草 西松烷二萜资源，寻找新的西松烷二萜化合物，研究其抗肿瘤活性，不仅促进天然抗肿瘤药 物的开发和利用，而且挖掘烟草在人类健康领域的作用，趋利避害，提高烟草的综合利用价 值。
[0005]另外，西松烷二萜存在于海洋生物体内，且含量低，提取、分离较困难，而烟草西松 烷二萜是烟草表面腺毛分泌物的主要成分，主要存在于烟草叶片、花表面，提取及分离纯化 简便，便于批量生产。
【发明内容】
[0006] 针对现有技术中存在的技术问题，本发明的目的在于提供一种西柏烷二萜化合物 及其分离与应用。
[0007] 本发明采取的技术方案为：
[0008] -种西柏烷二萜化合物，其特征在于，该化合物为10, 11-环氧_2, 7-西柏二 烯-4, 7, 12-三醇，分子式为：C2(]H3404,其结构式如式I所示：
[0009]
[0010] 进一步的，该化合物在高分辨质谱给出准分子离子峰为361. 2331 [M+Na]+，计算值 为 361.2349。
[0011] 进一步的，该化合物在以MeOH为溶剂的紫外吸收UV的吸收峰为204,吸光 度为1. 25。
[0012] 进一步的，该化合物在以KBr为溶剂的红外吸收IR的吸收峰v_为3400, 2960， 1720, 1475, 1390, 1380, 1120, 980cmi。
[0013] -种西柏烷二萜化合物，该化合物的分离步骤如下：
[0014] (1)制粗提物浸膏：选取大田生产盛花期烤烟烟草花序为原料，依次在3个盛有二 氯甲烷的玻璃烧容器连续浸提两次，每次ls_2s，浸提过程中，烧杯中二氯甲烷颜色变黄褐 时及时更换溶剂，浸提液合并，无水硫酸钠干燥后过滤，40°C减压浓缩，回收溶剂，获得粗提 物浸膏；
[0015] (2)洗脱制馏分：取浸膏250g过硅胶柱层析，以石油醚：丙酮的体积比分别为 100 :0,60 :1，30 :1，10 :1，5 :1，3 :1，1 :1，0 :1的混合物和甲醇梯度洗脱，将所得馏份经薄层 层析检测合并，得到不同的馏分；
[0016] (3)二度洗脱制馏分：以石油醚：丙酮的体积比为10 :1的混合物和甲醇梯度洗脱 得到的馏分部分通过硅胶柱层析，以氯仿：甲醇的体积比分别为60 :1，20 :1的混合物为洗 脱剂进行梯度洗脱，得到三个馏分；
[0017] (4)取步骤（3)中的第三个馏分部分过硅胶柱层析，以氯仿：甲醇的体积比为20: 1的洗脱剂进行洗脱，然后过S印hadexLH-20,以CHCl3:MeOH的体积比为1 :1的混合物为洗 脱液，最后过硅胶柱层析，以CHCl3:Me2C0的体积比为2 :1的洗脱液反复洗脱得到化合物。
[0018] 进一步的，该化合物在制备抗肿瘤的治疗药物中的应用。
[0019] 进一步的，该化合物对结肠癌细胞HTC-116有抑制活性，在20-80yg/mL范围内， 呈剂量-效应关系，其半抑制浓度为65yg/mL。
[0020] 进一步的，该化合物对肺腺癌细胞A549有抑制活性，在20-120yg/mL范围内，呈 剂量-效应关系，其半抑制浓度为83yg/mL。
[0021 ] 进一步的，该化合物对肝癌细胞IfepG2有抑制活性，在40-120yg/mL范围内，呈剂 量-效应关系，其半抑制浓度为84yg/mL。
[0022] 本发明的有益效果为：
[0023] 本发明为充分利用烟草资源，寻找新型抗肿瘤药物医药中间体，对采自我国山东 诸城大田开花期烟草花絮表面分泌物二氯甲烷提取物进行分离、结构鉴定，经现代波谱技 术（一维和二维核磁、高分辨质谱和红外光谱等）确定了该化合物的化学结构及立体构 型为一新化合物获得一个结构新颖的化合物，10,11-环氧-2, 7-西柏二烯-4, 7,12-三醇 (10,ll-epoxy-2, 7-cembradiene_4, 7,12-triol)，分子式为：C2QH3404。其应用为制备抗肿瘤 药物，经体外抗肿瘤活性测定，该化合物对结肠癌细胞HTC-116、肺腺癌细胞A549、肝癌细 胞IfepG2等3种肿瘤细胞株有明显的抑制作用，本发明不仅为研制新的抗肿瘤药物提供了 先导化合物，而且该西松烷化合物提取、分离方法简单，便于批量生产。
【附图说明】
[0024] 图1为化合物对结肠癌细胞HTC-116的抑制活性图。
【具体实施方式】
[0025] 1、化合物的分离过程
[0026] 该化合物是从烟草花序表面分泌物提取物获得的。选取大田生产盛花期烤烟烟 草花序为原料，依次在3个盛有二氯甲烷的玻璃烧容器连续浸提两次，每次ls_2s，浸提过 程中，烧杯中二氯甲烷颜色变黄褐时及时更换溶剂，浸提液合并，无水硫酸钠干燥后过滤， 40°C减压浓缩，回收溶剂，获得粗提物浸膏。取浸膏250g过硅胶柱层析，以石油醚：丙酮 (100 :0 ;60 :1 ;30 :1 ;10 :1 ;5 :1 ;3 :1 ;1 :1 ;0 :1 ;v/v)和甲醇梯度洗脱。将所得馏份经薄 层层析检测合并，得到十个馏分，即Fr. 1 (100 :1)，Fr. 2 (60 :1)，Fr. 3 (30 :1)，Fr. 4 (10 :1)， Fr.5(5 :1)，Fr.6(5 :1)，Fr.7(3 :1)，Fr.8(3 :1)，Fr.9(l:1)和Fr. 10 (丙酮和甲醇洗脱部 分）。Fr. 4 (115g)部分通过硅胶柱层析，以氯仿：甲醇（60:1，20:1)为洗脱剂进行梯度洗 脱，共得Fr. 4. 1 -Fr. 4. 3三个馏分。取F