半日花型二萜衍生物及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及半日花型二萜衍生物及其制备方法和应用，属于医药技术领域。
【背景技术】
[0002] 块根糙苏（Phlomis tuberose L.)为唇形科糙苏糙苏属植物。蒙药名：奥古乐 今-土古日爱[别名]:野山药、鲁各木日。中药味微苦，性温。有小毒。活血通经，解毒疗 疮。蒙药味甘，性轻、糙、平。清热，止吐，消"奇哈"。主治：中药治月经不调，腹痛，痈疮肿 毒，梅毒。蒙药治感冒发烧，鼻痒喷嚏，痰咳，咽热干燥，胸热，头痛，关节痛，骨"奇哈"病，脉 "奇哈"，肌"奇哈"病。具有治疗胸部发热、止咳、咽喉干燥、喘气等感冒的功能块根糙苏的主 要化学成分包括环烯醚萜、二萜、苯乙醇苷、黄酮、有机酸等。据报道，这些成分具有细胞毒 活性、抗氧化活性、抗炎活性。目前没有块根糙苏提取物及其化学成分治疗糖尿病的报道。
【发明内容】
[0003] 针对现有技术存在的上述问题和需求，本发明提供几类新的半日花型二萜类衍生 物及其制备方法和应用，为治疗糖尿病筛选理想的药物。
[0004] 本发明所述的半日花烷型二萜衍生物，是具有通式I、II或III所示结构的化合 物：
[0005]
[0006] 或其与药学上可接受的酸或碱所形成的加成盐；
[0007] 其中，R1为氢、羟基或Cl~C3的烷氧基或酰氧基或单糖和二糖；R2为Cl~C3的 饱和或不饱和烃基或单糖和二糖、Cl~C3的含氧烷基或Cl~C3的酸及其酯或盐或单糖 和二糖。
[0008] 作为一种优选方案，所述的&选自氢、羟基或甲氧基或单糖和二糖；所述的R2选自 甲基、羟甲基或甲氧羰基或单糖和二糖。
[0009] 作为进一步优选方案，所述半日花型二萜衍生物包括下述化合物中的一种：
[0010]
[0011] -种制备本发明所述的半日花型二萜衍生物的方法，包括如下步骤：
[0012] 以唇形科糙苏属植物块根糙苏的根部或地上部分为原料，经溶剂提取、萃取、柱层 析分离和纯化制得；其中：提取溶剂为任意比例的醇-水混合物；提取方法采用回流提取 法、超声提取法、冷浸提取法、温浸提取法、渗漉提取法中的任意一种；萃取剂选自Cl~ClO 的烷烃或卤代烃、Cl~ClO的醇、Cl~ClO的酮、Cl~ClO的酯或其混合物，及以上溶剂 与水任意比例的混合溶剂；进行柱层析分离的洗脱溶剂选自石油醚、环己烷、正己烷、氯仿、 二氯甲烷、乙酸乙酯、乙醇或甲醇中的至少一种；洗脱方式包括单一溶剂或混合溶剂的正相 洗脱、反相洗脱或梯度洗脱；柱层析填料选自硅胶、硅藻土、氧化铝、吸附树脂、葡聚糖凝胶、 MCI填料或ODS反相填料中的至少一种。
[0013] 作为一种优选方案，所述烷烃类溶剂的通式为CnH 2n+2或CnH2n, n<10;卤代烃溶 剂通式为 CnH2n+1R、CnH2nR2 或 CnH2n 此，n < 10, R = Cl, Br 或 I ;醇类溶剂通式为 CnH2n+10H 或CnH2n邮，n < 10 ;酮类溶剂通式为CnH2nO或CnH2n 20, n < 10 ;酯类溶剂通式为CnH2nO2或 QAn 2〇2。
[0014] 作为一种优选方案，所述制备方法包括如下步骤：
[0015] a)以块根糙苏为原料，粉碎后，用体积分数为95%的乙醇水溶液进行回流提取 2~3次，每次回流1~2小时；
[0016] b)过滤，合并提取液，减压浓缩；将得到的浸膏混悬于水中，用小极性有机溶剂 (如石油醚、正己烷、石油醚与乙酸乙酯的混合液等溶剂）萃取，有机相通过硅胶柱进行层 析，用石油醚或石油醚与乙酸乙酯的混合液进行梯度洗脱，用薄层色谱法检视，分段收集；
[0017] c)将硅胶柱分离部位用凝胶柱进行层析，用体积比为I:1的二氯甲烷和甲醇的 混合液进行洗脱，然后再用硅胶柱进行层析，用体积比为9 : 1~2 : 1的二氯甲烷和甲醇 的混合液进行洗脱，用薄层色谱法检视，直至得到所述衍生物的纯品。
[0018] 本发明所述的半日花型二萜衍生物的一种应用，是以所述的半日花型二萜衍生物 作为活性成分之一或唯一活性成分用于制备治疗糖尿病的药物。
[0019] 作为一种优选方案，所述的由脂代谢异常所引起的疾病包括I型糖尿病（胰岛素 依赖型糖尿病）、11型糖尿病（非胰岛素依赖型糖尿病）、111型糖尿病（妊娠糖尿病）、IV 型糖尿病（其他型糖尿病）的至少一种。
[0020] 作为一种优选方案，所述的半日花型二萜衍生物为如下化合物：
[0022] 及其与药学上可接受的酸或碱所形成的加成盐中的至少一种。
[0023] 本发明的有益效果在于：本发明在分离得到半日花烷型二萜类衍生物的基础上， 证实了该类化合物具有抑制a -葡萄糖苷酶活性的作用，为开发治疗糖尿病的药物提供了 先导化合物，对开发天然产物和植物药的新用途具有重要意义。
【具体实施方式】
[0024] 下面结合实施例对本发明技术方案做进一步详细、完整地说明。
[0025] 实施例1
[0026] 取块根糙苏根2kg，粉碎后加入6L体积分数为95%的乙醇中进行回流提取，回流 提取3次，每次2小时，过滤并合并提取液，减压回收乙醇后将浸膏混悬于水中，用乙酸乙酯 萃取混悬液5次，合并乙酸乙酯层并减压回收溶剂，得乙酸乙酯部位；将得到的乙酸乙酯部 位通过硅胶柱层析，依次用体积比为20 : 1、10 : 1、8. 5 : 1.5、7 : 3和I : 1的石油醚和 乙酸乙酯的混合液进行梯度洗脱，薄层色谱法检视，分段收集，得5个部位（Fr. 1~Fr. 5)， 其中，Fr. 2和Fr. 4先经Sephadex LH-20柱层析，用体积比为I : 1的二氯甲烧和甲醇的混 合液进行洗脱，再经硅胶柱层析，用体积比分别为10 : 1、8.5 : 1.5、4 : 1的石油醚与乙 酸乙酯的混合液进行梯度洗脱，得化合物IV、V和IX ;Fr. 5先经S印hadex LH-20柱层析，用 体积比为I : 1的二氯甲烷和甲醇的混合液洗脱后，再经ODS柱层析，分别用体积为8 : 2、 9 : I、I : 0的甲醇和水的混合液进行梯度洗脱，得化合物VI、VII和VIII。
[0027]
[0028] 实施例2
[0029] 取块根糙苏全株3kg，粉碎后加入9L体积分数为95 %乙醇进行超声提取，提取3 次，每次30分钟，过滤并合并提取液，减压回收乙醇后将浸膏混悬于水中；用乙酸乙酯萃取 混悬液5次，合并乙酸乙酯层并减压回收溶剂，得乙酸乙酯部位；将得到的乙酸乙酯部位通 过硅胶柱层析，依次用体积比为20 : 1、10 : 1、8 : 2、和I : 1的石油醚和乙酸乙酯的混 合液进行梯度洗脱，薄层色谱法检视，分段收集含二萜的流份，得4个部位（Fr. 1~Fr. 4); 其中Fr. 2和Fr. 3先经S印hadex LH-20柱层析，用体积比为I : 1的二氯甲烷和甲醇的混 合液洗脱后，再经硅胶柱层析，依次用体积比为10 : 1、8. 5 : 1.5、7 : 3、4 : 1的石油醚和 乙酸乙酯的混合液洗脱，得化合物IV、V和IX ;Fr. 4先经S印hadex LH-20柱层析，用体积比 为I : 1的二氯甲烷和甲醇的混合液洗脱后、再经硅胶柱层析，分别用体积比为8.5 : 1.5、 7 : 3、4 : 1、2 : 1的石油醚和乙酸乙酯的混合液进行梯度洗脱，最后经ODS柱层析，分别 用体积比为8 : 2、8. 5 : 1.5、9 : 1、9. 5 : 0. 5的甲醇和水的混合液进行梯度洗脱，得化 合物 VI、VII 和 VIII。
[0030] 化合物IV :糙苏酸，为白色无定型粉末。
[0031] HRESIMS(高分辨质谱）：315. 2413, [M-H]-(calcd. for315. 2420);
[0032] M2S: +7. 4 (c0. 08, CH3OH);
[0033] UV (CH3OH):入nax (log e ) 204 (4. 36)nm;
[0034] IR(KBr) :vnax3831，3648, 3372, 2910, 28