一种提取虫草中有效成分的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及提取冬虫夏草中有有效成分的方法。更具体地说，本发明涉及大孔吸附树脂提取冬虫夏草中虫草素的方法，也提供了提取虫草多糖和生物碱的方法。
【背景技术】
[0002]冬虫夏草是我国的一种名贵中药材，属于药用真菌，是寄生于昆虫体上的真菌与其寄生昆虫形成的虫菌复合体，隶属于子囊菌纲、麦角菌科和虫草属。在近年的研宄表明，冬虫夏草具有镇静、抑菌、抑制癌症、增强机体免疫功能等多方面的药理作用。其有效成分生物碱，其含量较少，包含虫草素、尿嘧啶、胸腺嘧啶、腺嘌呤等13种，具有抗肿瘤、抗菌抗病毒、免疫调节和清除自由基等多种药理作用，其中虫草素具有很好的抗真菌、细菌、病毒的活性，对链球菌、鼻疽杆菌、炭疽杆菌及葡萄糖球菌等病原菌的生长有抑制作用。
[0003]专利201110004151.0公布了一种虫草素的提取方法，首先用行星球磨机将虫草粉碎成粒度0.1微米的颗粒，再将粉末加入到PH值为2-3的水中，利用超生溶解法促进虫草素的在水溶液中的溶出，经离心后收集上清液。之后上清液用活性炭去除色素，再用乙酸乙酯和氯仿分别萃取上清液除杂，移除萃取层的上清液，经大孔吸附树脂吸附后，树脂用水洗除色后用乙醇水溶液洗脱，收集并干燥洗脱液得到虫草素产品。此发明提取的虫草素纯度达到98%以上，提取率为0.31%。。但是此发明在吸附虫草的吸附剂选用DlOl型树脂，使虫草提取率偏低，在除色和溶剂萃取过程中使虫草中损失掉大量其他活性成分。
【发明内容】
[0004]本发明提供一种提取虫草中有效成分的方法，大孔吸附树脂提取工艺有效提取虫草中虫草素，对虫草素的提取率增加了 I倍。
[0005]本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。
[0006]本发明还有一个目的是可提取虫草中活性成分虫草多糖和生物碱。
[0007]为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种提取虫草中有效成分的方法，所述方法为:
[0008]步骤1:在装有温度计和搅拌器的三口烧瓶中加入虫草素水溶液，将烧瓶至于恒温水浴中，水温恒定为20?60°C，开启搅拌器后放入大孔吸附树脂，大孔树脂与水溶液质量比为0.5?0.8: 1，20?60分后停止实验；之后进行减压抽滤将溶液与树脂分离；
[0009]步骤i1:树脂装入三口烧瓶中，将烧瓶至于恒温水浴中，水温恒定为20?60°C，开启搅拌器后放入乙醇，用乙醇解吸树脂中虫草素，树脂与乙醇质量比为1: 1.5?4，20?60分后停止实验。
[0010]优选的是，其中，所述虫草素水溶液经以下3步制备:
[0011]步骤1:将冬虫夏草粉碎成粒径为100目的粉末；
[0012]步骤2:将虫草粉末加入到pH值为2的水中，粉末与水的质量比为1: 15，混合液在50°C条件下用超声波处理I小时，之后将混合液离心处理得到上清液和沉淀，收集上清液；
[0013]步骤3:上清液用乙酸乙酯萃取，再用氯仿萃取。
[0014]优选的是，其中，所述步骤2离心所得沉淀分别用乙酸乙酯和氯仿萃取。
[0015]优选的是，其中，所述乙酸乙酯萃取液合并后精馏除去乙酸乙酯，得到虫草多糖。
[0016]优选的是，其中，所述氯仿萃取液合并后精馏除去乙酸乙酯，得到生物碱。
[0017]优选的是，其中，所述步骤i的实验时间为45min。
[0018]优选的是，其中，所述步骤ii的温度恒定为25°C。
[0019]优选的是，其中，所述步骤ii中树脂与乙醇质量比为1: 3。
[0020]优选的是，其中，所述步骤ii中实验时间为20分钟。
[0021]优选的是，其中，所述大孔吸附树脂以下型号中的一种:NKA-1I，AB-8，D101，D62。
[0022]本发明至少包括以下有益效果:本发明提供一种大孔吸附树脂从酸性水溶液提纯虫草素的方法，大孔吸附树脂对虫草素的提取率增加了 I倍，且可同时提取虫草中活性成分虫草多糖和生物碱。
【具体实施方式】
[0023]下面对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
[0024]应当理解，本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不配出一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。
[0025]虫草素水溶液制备方法:
[0026]步骤1:将200g冬虫夏草粉碎成粒径为100目的粉末；
[0027]步骤2:将200g虫草粉末加入到pH值为2的400g的盐酸水溶液中，混合液在50°C条件下用超声波处理I小时，之后将混合液离心处理得到上清液和沉淀，收集上清液和沉淀物。
[0028]步骤3:上清液用乙酸乙酯萃取，再用氯仿萃取，得到虫草素水溶液。
[0029]虫草多糖和生物碱的提取:
[0030]步骤4:将沉淀物先用乙酸乙酯萃取，再用氯仿萃取。
[0031]步骤5:将步骤3和4所得乙酸乙酯萃取液合并，蒸发掉乙酸乙酯，所得浓缩液用75°C水清洗3次后，干燥后得到虫草多糖；将步骤3和4所得氯仿萃取液合并，蒸发掉氯仿，所得浓缩液用55°C水清洗3次后，干燥后得到生物碱。
[0032]< 实例 1>
[0033]步骤1:在装有温度计和搅拌器的三口烧瓶中加入20g虫草素水溶液，将烧瓶至于恒温水浴中，水温恒定为35°C，开启搅拌器后放入1g大孔吸附树脂D101，搅拌45分后停止实验；之后进行减压抽滤将溶液与树脂分离。
[0034]步骤i1:在装有温度计和搅拌器的三口烧瓶中加入树脂，将烧瓶至于恒温水浴中，水温恒定为25V，开启搅拌器后加入30g乙醇，用乙醇解吸树脂中虫草素，20分钟后停止实验。
[0035]将乙醇溶液进行常压精馏除去乙醇，真空干燥后得到虫草素，其提取率为0.35%0。
[0036]< 实例 2>
[0037]步骤1:在装有温度计和搅拌器的三口烧瓶中加入20g虫草素水溶液，将烧瓶至于恒温水浴中，水温恒定为35°C，开启搅拌器后放入1g大孔吸附树脂AB-8，搅拌45分后停止实验；之后进行减压抽滤将溶液与树脂分离。
[0038]步骤i1:在装有温度计和搅拌器的三口烧瓶中加入树脂，将烧瓶至于恒温水浴中，水温恒定为25V，开启搅拌器后加入30g乙醇，用乙醇解吸树脂中虫草素，20分钟后停止实验。
[0039]将乙醇溶液进行常压精馏除去乙醇，真空干燥后得到虫草素，其提取率为0.19%0。
[0040]< 实例 3>
[0041]步骤1:在装有温度计和搅拌器的三口烧瓶中加入20g虫草素水溶液，将烧瓶至于恒温水浴中，水温恒定为35°C，开启搅拌器后放入1g大孔吸附树脂D62，搅拌45分后停止实验；之后进行减压抽滤将溶液与树脂分离。
[0042]步骤i1:在装有温度计和搅拌器的三口烧瓶中加入树脂，将烧瓶至于恒温水浴中，水温恒定为25V，开启搅拌器后加入30g乙醇，用乙醇解吸树脂中虫草素，20分钟后停止实验。
[0043]将乙醇溶液进行常压精馏除去乙醇，真空干燥后得到虫草素，其提取率为0.29%0。
[0044]< 实例 4>
[0045]步骤1:在装有温度计和搅拌器的三口烧瓶中加入20g虫草素水溶液，将烧瓶至于恒温水浴中，水温恒定为35°C，开启搅拌器后放入1g大孔吸附树脂NKA-1I，搅拌45分后停止实验；之后进行减压抽滤将溶液与树脂分离。
[0046]步骤i1:在装有温度计和搅拌器的三口烧瓶中加入树脂，将烧瓶至于恒温水浴中，水温恒定为25V，开启搅拌器后加入30g乙醇，用乙醇解吸树脂中虫草素，20分钟后停止实验。
[0047]将乙醇溶液进行常压精馏除去乙醇，真空干燥后得到虫草素，其提取率为0.41%0。
[0048]比较实施例1-4可知，在相同实验条件下，大孔吸附树脂NKA-1I的吸附效果较AB-8，D101, D62好，本发明选用大孔吸附树脂NKA-1I提取水溶液中的虫草素，下面实施例比较树脂吸附最佳吸附条件。
[0049]< 实例 5>
[0050]步骤1:在装有温度计和搅拌器的三口烧瓶中加入20g虫草素水溶液，将烧瓶至于恒温水浴中，水温恒定为35