一类含有羟肟酸基团的吡唑类衍生物及其制备方法及用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于有机合成领域，具体涉及一种具有羟肟酸基团的吡唑类衍生物及其制 备方法与用途。
【背景技术】
[0002] 近年来，细胞周期蛋白激酶2(CDK2)抑制剂在抗肿瘤药物领域受到了广泛关注。 细胞周期调控机制的缺失是肿瘤细胞的重要特征之一，细胞周期蛋白激酶CDKs在调控肿 瘤细胞的增殖与死亡中起着关键作用。尽管目前有众多CDKs抑制剂进行大规模临床试验， 但普遍表现出活性不够强及一些明显的毒副作用等缺点，导致还没有此类药物批准上市。
[0003] HDAC(组蛋白去乙酰化酶）抑制剂能引起组蛋白高度乙酰化，激活某些抑癌基因 的转录，从而促进肿瘤细胞分化，诱导肿瘤细胞凋亡，与其他作用机制的抗肿瘤药物联合使 用后能产生协同作用。为提高CDK2抑制剂的抗肿瘤活性和降低其毒副作用，本专利采用 "组合药效团"的策略，将选择性CDK2抑制剂与上市HDAC抑制剂中相应的药效团（吡唑环 和羟肟酸基团）进行组合，首次设计并合成作用于CDK2和HDAC的多靶点抑制剂，这些化合 物大多具有高效的CDK2和HDAC抑制活性，对癌细胞具有明显的抑制作用。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是提供一种具有羟肟酸基团的吡唑类衍生物，对癌细胞具有明显的 靶向抑制作用（作用于⑶K2和HDAC)。本发明同时提供了此类衍生物的制备方法，科学合 理、简单易行；本发明所述的具有羟肟酸基团的吡唑类衍生物的用途是制备靶向抗癌药物。
[0005] 本发明所述的羟肟酸基吡唑类衍生物，通式如下：
[0006]
[0007] 式中，R为：异丙基、苯基、苄基、环丙基及环己基。
[0008] 本发明所述的羟肟酸基吡唑类衍生物的制备方法，反应流程如下：
[0009]
[0010] 本发明所述的羟肟酸基吡唑类衍生物的制备方法，其特征在于按照下述步骤进 行：
[0011] ⑴将对羟基苯乙酮、溴代庚酸乙醋、碳酸钾与乙腈置于带有回流装置的圆底烧瓶 中，油浴加热，回流反应，然后滤去沉淀，蒸干滤液，用水和乙酸乙酯萃取，保留有机层，无水 硫酸钠干燥后蒸干得到产物2 ;
[0012] (2)取一定量的盐酸氨基脲，溶于水中，升温至50°C之后，加入无水乙酸钠，继续 保持温度，约3分钟之后发现无水乙酸钠全部溶解，用水乙醇将步骤（1)的产物2溶解，用 滴液漏斗缓慢滴入上述盐酸氨基脲溶液中，圆底烧瓶内部就开始产生白色固体，反应完全 后过滤得到产物3 ;
[0013] (3)以N，N-二甲基甲酰胺为溶剂将步骤⑵产物3与三氯氧磷在75°C条件下反 应5小时，反应物倒入冰水中，20 %氢氧化钠溶液调PH值5-7，溶液中析出黄色固体，过滤即 得到产物4。
[0014] (4)将步骤（3)产物4与各种胺在乙醇中回流反应2小时，降温至室温，加入硼氢 化钠搅拌5小时，反应完毕，蒸掉溶剂，反应物中加入水，析出沉淀。沉淀通过柱层析分离得 到产物5。
[0015] (5)将步骤（4)产物5与游离的羟胺甲醇溶液室温下搅拌6小时，防止过夜，析出 沉淀，即目标产物羟肟酸基吡唑类衍生物6。
[0016] 其中步骤⑴中对羟基苯乙酮、溴代庚酸乙酯、碳酸钾摩尔比为1:1-10:0. 5-5,对 羟基苯乙酮在乙腈中的摩尔浓度为0. 01-lmol/L。
[0017] 其中步骤（2)中的产物2、盐酸氨基脲与无水乙酸钠的摩尔比为1:3-20:2-5。
[0018] 其中步骤（3)中的产物3与三氯氧磷的摩尔比为1:1-10。
[0019] 其中步骤（4)中的产物4、各种胺与硼氢化钠的摩尔比为1:1-5。
[0020] 其中步骤（5)中的产物5与游离的羟胺甲醇的摩尔比为1:1-3。
[0021] 本发明所述的羟肟酸基吡唑类衍生物的用途是可以应用于制备靶向抗癌药物。
[0022] 本发明与现有技术相比，具有如下有益效果：
[0023] 本发明采用"组合药效团"的策略，将选择性⑶K2抑制剂的常见药效团吡唑环与 上市HDAC抑制剂的特征药效团羟肟酸基团进行组合，首次设计并合成作用于CDK2和HDAC 的多靶点抑制剂。这些化合物大多具有高效的CDK2和HDAC抑制活性，对癌细胞具有明显 的靶向抑制作用，选择性好，副作用小，可以应用于制备抗癌药物。
【具体实施方式】
[0024] 实施例1N-羟基-7- (4- (4-((异丙胺基）甲基）-IH-吡唑-3-基）苯氧基）庚酰 胺
[0025] (1)中间体2的制备
[0026]
[0027] 将Immol对羟基苯乙酮，Immol 7-溴庚酸乙醋，I. 5mmol碳酸钾，25mL乙腈置于带 有回流装置的圆底烧瓶中，油浴加热，在85°C下回流反应5h。然后滤去沉淀，蒸干滤液，用 水和乙酸乙酯萃取，保留有机层，无水硫酸钠干燥后蒸干得到产物。
[0028] 白色粉末，产率为 85 %，m.p· 48. 1-48.5 °C NMR(400MHz, DMS0) δ (ppm) : 7. 91 (d, 2H, J = 8. 8Hz), 7. 02 (d, 2H, J = 8. 8Hz), 4. 04 (m, 4H), 2. 28 (m, 2H), 2. 13 (s ，3H), I. 73 (m, 2H), I. 54 (m, 2H)，I. 46-1. 31 (m, 4H), I. 17 (t, 3H, J = 7. 0Hz)。
[0029] (2)中间体3的制备
[0030]
[0031] 称取IOmmol盐酸氨基脲（约0· 076mol)于单口圆底烧瓶中，加入60ml蒸馏水，加 热至50°C，此时盐酸氨基脲已经全部溶解。将30mmol无水乙酸钠一次性加入单口圆底烧瓶 中，继续保持温度至无水乙酸钠全部溶解，IOmmol第一步产物溶于40ml无水乙醇，缓慢滴 加至盐酸氨基脲溶液中，圆底烧瓶内部就开始产生白色固体，低价完毕，继续保持温度让其 反应2小时左右。过滤出沉淀，无水乙醇洗涤，干燥，即得产物。
[0032] 白色粉末，产率为 96 %，m.p· 231-233 °C NMR(400MHz, DMS0) δ (ppm) :9. 19(s, 1H), 7. 76(d, 2H, J = 8. 8Hz) , 6. 98 (d, 2H, J = 8. 8Hz), 6. 43 (m, 2H), 4. 04 (t, 2H, J = 7. 0Hz), 3. 78 (m, 2H), 2. 28 (m, 2H), 2. 14 (s, 2H), L 72 ( m, 2H), I. 54 (m, 2H)，I. 28-1. 49 (m, 4H), I. 28 (t, 3H, J = 7. 0Hz)。
[0033] (3)中间体4的制备
[0034]
[0035] 冰浴条件下，取3mmol三氯氧磷，缓慢滴加至25ml N, N-二甲基甲酰胺中，控 制滴加速度，使反应温度保持在5°C以下。滴加完毕，取3mmol步骤（2)中的产物，分批 加入上述三氯氧磷反应液中，保持反应温度始终低于l〇°C。加入完成后，将反应物加热 至75°C反应5h。反应物倾入100mL冰水中，20 %的氢氧化钠溶液调节PH值至6. 8-7. 2， 将混合液静置，析出大量固体，抽滤得到黄色固体即产物。白色粉末，产率为96%，m. p. 283-285 °C !1H NMR(400MHz, DMS0) δ (ppm) : 10. 30 (m, 1H), 8. 13 (s, 1H), 7. 73 (d, 2H, J = 8. 8Hz), 6. 91 (d, 2H, J = 8. 8Hz), 4. 01 (m, 4H), 2. 26 (m, 2H), 2. 14 (s, 2H), I. 75 (m, 2H), L 51 ( m, 2H)，I. 23-1. 47 (m, 4H), I. 28 (t, 3H, J = 7. 0Hz)。
[0036] (4)中间体5的制备
[0037]
[0038] 取3mmol步骤（3)中所述的产物和3. 2mmol异丙胺，溶于25ml无水乙醇中，搅拌 下回流反应2小时。反应完毕，降至室温后分批加入6_〇1硼氢化钠，再在50°C条件下反应 5小时。反应完成后，减压蒸掉溶剂，反应物倾入50ml 5%的稀盐酸中，析出白色固体，不需 分离，直接投入下一步反应。
[0039] (5)产物6的制备
[0040]
[0041] 取3mmol步骤（4)中所述的产物和25ml含4. 5mmol轻胺的甲醇溶液，室温下搅拌 反应2小时。静置过夜，析出白色固体，过滤，甲醇重结晶，即得产物。
[0042] 灰色粉末，产率为 66% ,1114.231-232^;? NMR(400MHz，DMS0), δ :8.33(s, 1H)，7 .83 (d, 2H, J = 8. 8Hz), 7. 11 (d, 2H, J = 8. 8Hz), 4. 88 (s, 2H), 4. 02 (m, 2H), 3. 31 (m, 2H), 2. 23