防治番茄根结线虫病的复合微生物菌剂及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及农作物防病治病技术领域，特别涉及一种防治番茄根结线虫病的复合 微生物菌剂及其应用。
【背景技术】
[0002] 根结线虫病是由根结线虫（Meloidogyne spp.)引起的一类世界性的重要植物线 虫病害，是当前保护地蔬菜（番茄、黄瓜、南瓜、青椒等）重要病害之一，广泛分布于世界各 地。目前，国际上报道的根结线虫有90多种，主要寄生在蔬菜、粮食作物、经济作物、果树植 物及杂草等3000多种寄主上，温带、亚热带、热带地区的植物受害尤其严重。据2000年的 统计，全世界每年因线虫为害给粮食和纤维作物造成的损失约为12. 7%，对蔬菜、花生、烟 草和某些果树造成的损失超过20%。线虫已成为植物的一类重要病原物，线虫病害已成为 农林生产上的重要问题。随着保护地蔬菜生产面积的增加，特别是日光温室的大面积推广 以来，复种指数增加，加之重茬严重，导致根结线虫危害日趋严重，一般减产10%左右，严重 的高达75%以上。
[0003] 目前根结线虫病的防治措施主要分为化学农药防治、物理防治和生物防治。对于 根结线虫的防治，其中化学农药防治是目前应用最为普遍的农业措施，通常采用卤代烃类 化合物、异硫氰酸甲酯类、有机磷类和氨基甲酸酯类化合物，这些化合物能够杀死或麻痹根 结线虫，但是其缺点是显而易见的，能导致线虫抗药性增强、虫口密度上升、污染环境、杀伤 天敌、农药残留、病虫菌的抗药性增强、威胁人类健康等。除了化学农药防治方法以外，另 一个应用较广的方法是物理防治，主要有：热力处理、种子淘汰、高频处理、射频处理、高温 闷棚、水肥管理、改良土壤、材料隔离等方法。高温闷棚、热力处理、种子淘汰、高频处理、射 频处理主要是用来处理温室的种子、苗床和苗木，可能需要较长一段休棚期，打乱生产计 划，影响作物生长周期，一般不适用于大田防治线虫。其应用范围有限，防治效果一般，有 些需要特殊的仪器设备，增加生产成本。所以除继续探索一些化学和物理防治根结线虫的 有效方法外，对根结线虫的生物防治应越来越重视。根结线虫生防资源包括食线虫真菌 (Nematophagous fungi)、细菌（bacteria)、放线菌（Actinomycetes)、病毒（Virus)、立克 次氏体（Rickettsia)、原生动物（Protozoa)、水熊（Tardigrade)、扁虫（Turbellarians)、 螨类（Mites)、跳虫（Collembola)、Enchytraids 以及捕食性线虫（Predacious nematodes) 等。其中较常见有淡紫拟青霉素、厚坦孢普奇尼亚霉、阿维菌素、芽孢杆菌等，防治效率在 40%-60%左右，其防治根结线虫的效果较好，但是作用菌株单一，导致生防机制单一，无菌 株间的协同增效作用，不能进一步提高防治效率。
【发明内容】
[0004] 本发明针对现有技术中存在的不足，提供一种防治番茄根结线虫病的复合微生物 菌剂及其应用，将番茄共生丛植菌根（AM)真菌与植物根围促生细菌（PGPR)共用，利用二者 的协同增效作用，提高根结线虫的防治效率。
[0005] 本发明的技术方案是：
[0006] -种复合微生物菌剂，所述的微生物菌剂的活性成分由地表球囊霉（Glomus versiforme，G.v)和枯草芽抱杆菌（Bacillus subtilis, BS)组成。
[0007] 其中，地表球囊霉G. V为AM真菌的一种，与植物共生，购自青岛农业大学菌根技术 研宄所。
[0008] 枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis, BS)属于芽孢杆菌属，是一种植物根围促生细 菌（plant growth-promoting rhizobacteria，PGPR)，购自中国普通微生物菌种保藏管理 中心，菌株编号为BS 1.936。
[0009] 植物根围促生细菌（plant growth-promoting rhizobacteria，PGPR)是指自由 生活在土壤或附生于植物根围的一类具有固氮、解磷、产生植物激素或分泌抗生素、促进植 物生长的有益细菌。国内外大量试验表明，接种PGPR于农作物根围能调节土壤微生物区 系平衡状况，同时在植物根围形成一个生物屏障，阻止病原物的定殖和侵入、促进植物生 长。其生防机制概括起来主要集中于以下几个方面：PGPR与病原物竞争水分、养分和定殖 位点；分泌噬铁素，与病原物竞争铁离子；有些微生物产生抗生素；诱导植物产生系统抗性 等。PGPR能在根围发生发展是理想的生防因子之一，在当前和今后植物土传病害生物防治 中具有很大应用潜力。
[0010] AM真菌是一类植物活体营养专性共生菌，存在于陆地各生态环境中，与绝大多数 植物建立互惠共生关系，地球上90 %的维管植物都能形成AM。菌根的有益作用主要体现 在：扩大植物根系的吸收面积；增加植物对磷及其它多种矿质元素的吸收和利用，改善营 养状况；改变植物内源激素的平衡状况，从而促进植物萌发、生根和生长；提高植物抗病性 和抗逆性；促进作物生长、提高产量、改善品质。
[0011] AM真菌和PGPR之间至少存在3种关系：即相互促进、相互竞争和互不影响。而AM 真菌、PGPR和寄主植物的种类、环境条件则决定了这些相互作用的性质。而且，发生相互作 用的AM真菌与PGPR之间具有高度的专一性。AM真菌与PGPR于根围进行着一系列有利于 植物生长和健康以及土壤肥力的相互作用，尤其是它们之间的协同作用对植物和土壤具有 十分重要的生理和生态效应。
[0012] 采用上述的复合微生物菌剂制备的防治番茄根结线虫病的生防菌剂。
[0013] 所述生防菌剂产品在防治番茄根结线虫方面的应用。
[0014] 采用上述生防菌剂防治番茄根结线虫病的方法，首先，在番茄育苗期，在育苗土中 接种地表球囊霉G. V ;再次，移栽期、苗期以及开花坐果期分3次接种所述枯草芽孢杆菌BS。
[0015] 在以上方案的基础上，所述G. V的接种剂量为1000-5000IPU/株；所述BS接种剂 量为发酵液 109cfu/ml，200-500ml/ 株?次。
[0016] 优选的，所述G. V的接种剂量为2000IPU/株；所述BS接种剂量为发酵液IO9Cfu/ ml，200ml/ 株?次。
[0017] 其中，所述移栽期为番茄发育至3-4叶时可定植时期；苗期为番茄定植后发育至 4-5叶阶段；开花坐果期为番茄发育至一花一果期。
[0018] 本发明的有益效果是：
[0019] 1、防治效率较高：与一般单一菌剂或菌素的防治效率相比，AM真菌和内生细菌互 作具有明显的协同增效作用，防治率达到60-70%，二者具有更广泛的抑制根结线虫机理， 高于单一菌剂或菌素的防治率。这与两种菌剂协同增效作用及作用机理广泛有密切关系。
[0020] 2、促进番茄根系的发育，提高产量：施用本复合菌剂的番茄植株根系发达，尤其是 须根系较多，这有效增加了番茄的吸收面积。
[0021] 3、本发明的防治方法具有对环境安全、有利于人类健康、不杀伤天敌、无残留、病 虫菌不易产生抗药性、有利于植物根系的发育、不需要特殊设备、无需休棚期、降低化学农 药对番茄根系的损伤和抑制等优点。使用混合菌剂的费用相对较低，远远低于常用土壤熏 蒸剂溴甲烷等，且无须像施用溴甲烷等采用特殊的加热汽化设备，可以节省大量支出。两种 菌剂施于土壤，不会在果实中残留，安全有效。达到既能够防治根结线虫病害、保护并促进 番茄根系生长，又增加产量，减少农药污染等作用。
[0022] 本发明通过盆栽试验和大田试验获得联合接种AM真菌和PGPR对番茄根结线虫病 的抑制效果，得出如下结论：
[0023] 盆栽试验显示：联合接种AM真菌菌株G. V和PGPR菌株BS能有效抑制番茄根结线 虫病。与单接种G. V和BS相比，联合接种处理组根结线虫发病率、病情指数和单株根结数 都远小于单接种处理组，防效达到74% ;且根结线虫繁殖体