一种全人源抗her3抗体及含有该抗体的组合物和其用于制备治疗her3相关疾病的药物中 ...的利记博彩app
【专利说明】一种全人源抗HER3抗体及含有该抗体的组合物和其用于 制备治疗HER3相关疾病的药物中的用途
[0001]
技术领域
[0002] 本发明涉及基因工程抗体领域，具体涉及与表皮生长因子HER3特异性结合的基 因工程抗体和其用于制备治疗HER3相关疾病的药物中的用途。
【背景技术】
[0003] HER3 又称 ErbB3、LCCS2、ErbB-3、c-erbB3、erbB3-S、MDA-BF-1、c-erbB-3、 pl8〇-ErbB3、p45-sErbB3、p85-sErbB3,是酪氨酸激酶表皮生长因子家族成员之一，大小为 161kDa。人HER3基因定位于染色体12ql3。该家族由4个成员组成，除HER3外，还有EGFR、 HER2、HER4。各成员均由三个部分构成，分别是胞外区配体结合区、跨膜区、胞内激酶区。 HER3的胞外区有神经调节蛋白结合位点但胞内没有激酶活性。因此，必须与该家族其他成 员形成异源二聚体后才能激活MAPK、PI3K-Akt通路。
[0004] 基于HER家族成员EGFR和HER2靶点的多肿瘤基因治疗的重要性已毋庸置疑。现 已确认，EGFR家族在乳腺癌、肺癌、头颈癌等癌症的发病机制中正是依赖于各家族成员的 相互作用。其中，EGFR/HER3、HER2/HER3异源二聚体的形成，在多种癌症发病机制和基于 EGFR、HER2的抗体治疗策略中产生耐药耐药机制中的发挥重要作用。
[0005] HER3高表达的肿瘤类型：1)HER3在HER2介导的乳腺肿瘤中高表达。在HER2高 表达肿瘤中敲低HER3表达后会引起肿瘤缩减，与敲低HER2效果一致，而在该肿瘤模型中敲 低EGFR则不引起肿瘤的消减，此外临床标本检测表明，在HER2高表达乳腺癌标本中，HER3 高表达与HER2的高表达具有高度一致性，而EGFR与HER2的表达无此相关性，上述研宄均 强调了 HER3在HER2致癌机制中的独特的、关键作用。2)HER3在黑色素瘤中高表达。HER2 在黑色素瘤中低表达，但是HER3可能作为EGFR和/或HER4的协同作用分子，在黑色素瘤 中显著高表达，且与疾病的恶性程度和预后差相关。3)HER3在肺癌中的高表达的发生率 是18%-100%，尤其是对EGFR酪氨酸激酶抑制剂（tyrosine kinase inhibitor，TKI)吉 非替尼（gefitinib)治疗耐药的非小细胞肺癌（non-small lung cell lung carcinomas， NSCLC)中，与治疗敏感的NSCLC比较，其HER3高表达率为100%，此外，在NSCLC患者中， HER3高表达与其脑转移、生存期短具有显著相关性。4)HER3在儿童骨肉瘤中显著高表达和 某些类型的前列腺癌、结肠癌和卵巢癌中高表达（表达率在10-90%之间），但其在上述肿 瘤中的高表达的类型还未获得规律性结果，虽然其参与机制尚未阐明，但是可以确定HER3 的尚表达与尚转移、预后差相关。
[0006] 目前，国内外已有多家公司以HER3为靶点着手研发抗癌药物，如U3Phaima GmbH 公司研发的全人源单克隆抗体AMG888已处于临床研宄阶段，而默克公司周痩研发的全人 源单克隆抗体MM-121以及双特异性抗体MM-Ill已处于临床1-2期。特别是针对HER3这 种激酶区活性缺失的位点，不能作为小分子抑制剂型药物的作用靶点，因此只能针对其研 发抗体类药物或基因药物。同时，基于HER3在多种癌症的发生、发展、耐药及预后中扮演着 非常重要的角色，因而以其为靶点的抗体类药物将会在HER3相关癌症的治疗、研宄中发挥 重要作用，这也是目前亟待解决的问题。
【发明内容】
[0007] 本发明的目的是提供一种对HER3有抑制活性的全人源的单克隆抗体。本发明的 另一目的在于提供一种含有该抗体的药物组合物或试剂、试剂盒或芯片。本发明的目的还 在于提供抗HER3抗体用于制备治疗HER3相关疾病的药物中的用途。
[0008] 本发明所述"抗体"应该解释为涵盖具有所需特异性的结合结构域的任意特异性 结合因子。因而，这个术语涵盖了与之同源的抗体片段、衍生物以及抗体的功能等同物和同 源物，也包括含有抗原结合结构域的任何多肽，无论是天然的还是合成产生的。抗体的实例 是免疫球蛋白亚型（如IgG，IgE，IgM，IgD和IgA)及其亚型亚类；也可以是包含抗原结合 结构域的片段如Fab、scFv、Fv、dAb或Fd,或者双链抗体。融合至另一多肽的、包含抗原结 合结构域的嵌合体分子或者等同物也包括在其中。
[0009] 本发明所述单克隆抗体可以是，例如单价的或单链抗体、双链抗体、嵌合抗体以及 上述抗体的衍生物、功能等同物和同源物，也包括抗体片段和含有抗原结合结构域的任何 多肽。
[0010] 抗体可以通过许多方式修饰，可用DNA重组技术来产生保留原来抗原特异性的其 他抗体或嵌合分子。这种技术可以包括将编码抗体的免疫球蛋白可变区或互补性决定区 (CDRs)的DNA引入不同免疫球蛋白的恒定区或恒定区加框架区。还可以对表达抗体的细胞 进行遗传突变或其它改变，这可以改变或者不改变所产生抗体的结合特异性。
[0011] 本发明所述单克隆抗体除了重链和轻链中的高度可变区⑶R1、⑶R2和⑶R3和链 接序列外，其它为框架区。框架区可在结合所需的三维结构不受影响的条件下倍其他序列 置换，抗体特异性的分子基础主要来源于它的高变区⑶R1、⑶R2和⑶R3。这些区域是与 抗原结合的关键部位。为维持优选的结合特性，CDR的序列应尽可能保留，然而，可能需要 一些氨基酸改变使结合特性最优化，本领域的技术人员可以用标准做法来达到此目的。
[0012] 本发明提供了一种单克隆抗体，其重链可变区含有氨基酸序列如SEQ ID NO:7、 SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9所示的CDR1、CDR2、CDR3,其轻链可变区含有氨基酸序列如SEQ ID N0:10、SEQ ID NO:ll、SEQ ID 勵：12所示的0?1、0)1?2、0)1?3。
[0013] 可变区⑶R的变体与上述⑶R区可以有至多6个氨基酸残基（例如，1、2、3、4或5 个氨基酸取代）的取代，在具有CDR变体的单克隆抗体中，CDR区变体具有与HER3结合活 性。
[0014] 在一个实施方案中，本发明所述单克隆抗体的重链可变区具有如SEQ ID N0:4所 示的氨基酸序列，或该重链可变区的氨基酸序列经过取代、缺失、或添加一个或几个氨基酸 衍生的与SEQ ID N0:4至少有95%的一致性，且所述单克隆抗体具有特异性结合HER3的活 性。
[0015] 在一个具体实施方案中，编码所述重链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO: 1所示。
[0016] 在一个实施方案中，本发明所述单克隆抗体的轻链可变区具有如SEQ ID N0:5所 示的氨基酸序列，或该轻链可变区的氨基酸序列经过取代、缺失、或添加一个或几个氨基酸 衍生的与SEQ ID N0:5至少有95%的一致性，且所述单克隆抗体具有特异性结合HER3的活 性。
[0017] 在一个具体实施方案中，编码所述轻链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
[0018] 在一个实施方案中，本发明所述单克隆抗体的重链氨基酸序列如SEQ ID NO: 15 所示，或其重链的氨基酸序列经过取代、缺失、或添加一个或几个氨基酸衍生的与SEQ ID NO: 15至少有95%的一致性，且所述单克隆抗体具有特异性结合HER3的活性。
[0019] 在一个实施方案中，本发明所述单克隆抗体的轻链氨基酸序列如SEQ ID NO: 16 所示，或其轻链的氨基酸序列经过取代、缺失、或添加一个或几个氨基酸衍生的与SEQ ID NO: 16至少有95%的一致性，且所述单克隆抗体具有特异性结合HER3的活性。
[0020] 在本发明的一个实施方案中，所述的单克隆抗体是一种单链抗体，其重链可变