一种非接触式显微测量辅助装置及其测量方法
【技术领域】
[0001]本发明属于微生物显微领域，尤其涉及一种非接触式显微测量辅助装置及其测量方法。
【背景技术】
[0002]在动物学、植物学、细胞学和微生物学实验和研宄中，经常测定细胞、微生物孢子、菌丝的大小，其中包括其宽度和长度，特别是进行真核生物研宄时，要求测定30个或者更多细胞或者孢子的平均宽度和长度。这就给使用绘图显微镜或者利用显微电脑操作系统的人带来测量数据的麻烦。
[0003]目前，测定孢子或者细胞大小的方法主要有以下几种:1、利用绘图显微镜，手动绘出孢子的草图，然后再计算一定数量的孢子的大小平均数；2、利用电脑和数码成像系统系统，将显微镜视野中的图像传输到电脑中，并通过处理软件显示出来，然后再去操作和计算孢子的大小；3、利用目镜测微尺对孢子进行测定；4、用数码相机拍出孢子图片后再测量细胞或者孢子的大小。
[0004]以上测定孢子的方法，存在的缺点是:1、绘图测量法太麻烦，操作时要不停前后和左右移动显微镜载物台，而且玻片种细胞等位置形态各异，有时造成从任何角度都不能很好测量细胞大小的情况；2、利用显微成像系统专业软件处理和计算孢子大小，也存在鼠标频繁移动、定位不准和无法处理特殊细胞大小的问题，费时、费力，而且配合显微镜的操作；
3、目镜测微尺测定细胞大小时，需要前后、左右频繁移动载物台，而且测定角度不正的细胞时，要移动载物台数次，才能定位准确，非常麻烦；4、用数码相机拍出孢子图片后再测量的方法，存在一次性要选取大量孢子的麻烦，再者还要把相关图像打印或者洗出来，费时费力。
[0005]从手动绘图或测定的角度来看，目前的测定方式要么利用手动，要么利用电脑测绘，手动方法自动性差，耗时长，容易出错，记录不准确，但是存在可选择性，灵活性等优点，利用辅助测绘装置的话，一般又不够灵活，方式较死板，电脑测绘的话，自动性强，但是在识别和计算所需数据时，人工识别往往又不可替代，尤其是所测定样本本身有多种杂质或是有选择地测定特殊细菌或孢子的时候。
【发明内容】
[0006]本发明属于多功能绘图显微镜的配套仪器，利用手动绘制或者测量细胞或者孢子时，可以克服目前细胞或者孢子大小测定的缺点和麻烦，快速、有效和准确的解决该问题，具体优点如下:1、该产品属于外置式和手持式，使用方便，移动灵活，不需要像目镜测量尺一样反复移动；2、可测量任意角度的细胞大小，测定培养样本中的何种细菌或孢子可以方便选择；3、不需要校正和换算，可以直接读出近似读数；4、廉价、简易；5、配置专用记录板，可实现数据及时记录，可换纸利用，也可利用可擦写纸，用后一擦即净；7、使用可根据视野光线情况，灵活选用各种外源灯光等。
[0007]本发明要求保护一种非接触式细菌或孢子显微测量辅助装置，其特征在于，组成如下:
由透明测定盘和套板，计数纸配件三部分组成；
透明测定盘由透明材料制成，其为圆形板状，具有一定厚度，从圆心向外绘有若干条半径线，该若干条半径线均与接触圆周处的法线垂直，该若干条半径线上有垂直于该半径线自身的均匀刻度线，每条半径线上的均匀刻度线所对应的单位刻度均不同，每隔一定数量刻度线设置一个数值用于示意性读数，在每个半径线靠近圆心处都注以标示，以标明该半径线上的单位刻度为何种大小，这里的标示可以是特定的形状的符号，也可以是特定颜色的符号；
所述单位刻度可以为 lmm、0.5mm、0.2mm、0.1mm、0.05mm、0.02mm、0.01mm.0.005mm 尺寸，可以每2、5、10、20个单位刻度给出示意性读数，标明该半径线上的单位刻度为何种大小的标示可以为文字，厘米/毫米/十分之一毫米/百分之一毫米/微米，也可以为，英文简称，，cm/mm/1/lOmm/l/OOmm/um也可以为自行约定的符号，如α、β、γ等；
套板为长方形，在其长度方向相对的两侧，一侧有用于放置透明测定盘的圆形槽，另一侧有放置计数纸配件的计数纸槽，计数纸槽为正方形，圆形槽的厚度与透明测定盘相当；计数纸槽的厚度也可以较圆形槽为浅；
计数纸配件包括设在计数纸槽上下两端的上卡槽和下卡槽，以及由上卡槽和下卡槽共同夹持的计数纸若干张，上卡槽、下卡槽、计数纸高度均低于计数纸槽的深度；
透明测定盘和套板的表面光滑或是有一定摩擦性，透明测定盘和套板表面均平整，透明测定盘和套板上的用于放置透明测定盘的圆形槽大小相适应，透明测定盘刚好可以卡入转动并且不明显松动；
所夹持的计数纸可以为长方形或正方形，计数纸上印有计数格，计数纸可以适于普通笔书写或者适于荧光笔书写；
前述的一种测量辅助装置，利用其进行的非接触式细菌或孢子显微测量方法，其特征在于；
1)根据需要制备适合的装置:
按用于测量的培养皿或培养平板的情况，选择适合的透明测定盘的大小，并由此决定相配的套板和计数纸配件的尺寸:透明测定盘的尺寸可以比圆形槽尺寸小0.1mm-1mm距离不等。
[0008]三步灭菌:用环氧乙烷将透明测定盘、套板和计数纸槽中的上卡槽和下卡槽用环氧乙烷灭菌处理，并除去残留；再用高温蒸汽进行二次灭菌，干燥，然后将透明测定盘、套板和计数纸槽中的上卡槽和下卡槽和测定用的计数纸一起用紫外灯照射2-10min灭菌；
将透明测定盘卡入圆形槽、将所需数量的计数纸卡入上卡槽和下卡槽固定；即制得所需测量辅助装置；圆形槽边缘可以设有复数个沿圆形槽边缘均匀分布的卡扣以固定透明测定盘;
2)利用显微镜针对培养皿或者培养平板上的细菌或孢子进行显微测定，先选择合适的培养皿或者培养平板，然后根据使用的培养皿或者培养平板的规格或尺寸，选择或制备尺寸相符的测量辅助装置；
3)根据培养皿或者培养平板上细菌或孢子处于靠上或靠下的位置，将测量辅助装置放置在培养皿或者培养平板之上或之下，以便于测量；
根据放置在培养皿或者培养平板之上或之下的不同，圆形槽可以向上面开或者向下面开，透明测定盘可以是从上向下放置或者从下向上放置；
4)开启显微镜，将培养皿或者培养平板与叠合的测量辅助装置一并放置于载物台上，调节显微镜，在视野中观察寻找欲测量尺寸的种类的细菌或孢子；
这里的细菌或者孢子，可以是某一类或者某几类，或者是某一类中尺寸在要求范围内的，如革兰氏阳性菌，或孢子尺寸在1um-1um之间的；
5)可借助外界光源辅助，调节显微镜视野内的光线强弱，针对视野中找到的欲测量尺寸的种类的细菌或孢子，调节显微镜，使得其清晰可辨，在此前提下，转动透明测定盘，将符合显微镜放大倍数观测需要的单位刻度的半径线转动到欲测量尺寸的种类的细菌或孢子附近，并依据该单位刻度及其上的标示将欲测量尺寸的种类的细菌或孢子的尺寸大致读出，用笔记载在计数纸上；
6)在套板的圆形槽底部设置网格，网格线是水平垂直交叉的，或者是以圆形槽圆心处放射线与以该圆心为圆心的半径不同的圆形线，网格线有反光特性，网格给予编号，在步骤4中欲测量尺寸的种类的细菌或孢子清晰可辨的前提下，确认其处于的网格编号，在登记其尺寸时一并登记；
在此，如果是以圆形线和半径线切割成的区域，则可以以字母+数字来命名，例如最小圆与圆心之间切割成的扇形，最内圈区域以A1-A9编号，外一层用B1-B9编号，再外一层用C1-C9编号，依次类推，数字依半径线