鱼鳞酶解生产胶原蛋白的制备工艺的利记博彩app
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种生产胶原蛋白的制备工艺，特别涉及鱼鳞酶解生产胶原蛋白的制 备工艺，属于胶原蛋白提取技术领域。
【背景技术】
[0002] 胶原蛋白是人体内含量最多、分布最广的蛋白质，是结缔组织的主要蛋白质成分， 约占机体总蛋白的25%，它主要分布在动物的皮肤，骨，软骨，角膜，血管内壁等组织内。动 物的结缔组织中提取的胶原蛋白，因具有特殊的蛋白质结构和身体亲和性，广泛应用于食 品，化妆品和医疗等与人体健康相关的行业。目前工业生产中使用的胶原蛋白主要是I型 胶原蛋白，它是由3条1000个氨基酸肽链组成的高分子硬蛋白，人们直接食用高分子胶原 蛋白很难消化吸收，将胶原水解为小分子肽，消化吸收率就会大大提高。另外，近年来人们 发现，经蛋白质水解反应获得的小分子胶原蛋白肽具有美容护肤、抗高血压、胃粘膜保护、 预防和抑制关节炎、骨质疏松症等诸多生理功能。低分子胶原蛋白的制备可采用强酸、强碱 等化学方法水解胶原蛋白。采用强酸、强碱等化学方法水解胶原蛋白时，水解反应难以调 控，难以获得高含量的低分子组分胶原蛋白肽。另外大量使用化学物质，影响食品安全性的 同时造成严重的环境污染。利用工业酶水解胶原蛋白的生物学水解方法，很难获得低分子 胶原蛋白。虽然目前有利用复合酶酶解胶原蛋白获得低分子胶原肽的报导，但常用的复合 酶法酶解胶原蛋白获得的低分子胶原蛋白肽，容易出现分子量分布不集中或低分子胶原蛋 白肽中氨基酸含量过高的现象，而且难以去除影响胶原蛋白产品外观的色素类物质，鱼腥 鱼臭味较浓。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的在于提供一种鱼鳞酶解生产胶原蛋白的制备工艺，以解决现有技术 中存在的上述问题，本发明所提供的方法不仅可从鱼鳞中获得高含量低分子组分胶原蛋白 肽，而且去除影响胶原蛋白产品外观的色素类物质，减轻胶原蛋白特有的鱼腥鱼臭味，提高 了鱼类胶原蛋白产品的产品价值。
[0004] 本发明的技术方案如下：
[0005] 一种鱼鳞酶解生产胶原蛋白的制备工艺，所述的方法包括以下步骤：
[0006] (1)清洗
[0007] 清洗鱼鳞，剔除杂物，沥干水分；
[0008] (2)碱处理
[0009] 将鱼鳞倒入酶解罐中，并加入质量浓度百分比为0.2% -0.5%的NaOH溶液，鱼鳞 与NaOH溶液的质量体积浓度为800-1500kg/m3，
[0010] 加入纯水，使鱼鳞与NaOH溶液的质量体积浓度调整到300-440kg/m3,并调整酶解 罐内温度至17-19 °C，静置浸泡12-15小时后，过滤掉NaOH溶液，用纯水将鱼鳞清洗至中 性；
[0011] ⑶脱钙
[0012] 在酶解罐内加入适量酸溶液，调整酶解罐内温度至17-19°C，用酸溶液静置浸泡鱼 鳞2-4小时后，过滤掉酸溶液，用纯水将鱼鳞清洗至中性；
[0013] ⑷蒸煮
[0014] 加入纯水，使鱼鳞与纯水的质量体积浓度为300-440kg/m3,调整酶解罐至温度 100-115°C，保温时间50-70分钟；
[0015] (5)冷却
[0016] 将酶解罐内温度冷却至50-60 °C ;
[0017] (6) -道酶解
[0018] 调整酶解罐内液体pH值至8. 2-8. 5,加入胰蛋白酶，所述胰蛋白酶的酶活力为 4000-4300u/g，质量为酶解罐内物料质量的0. 2-0. 7%，调整酶解罐内温度至50-55°C，酶 解4-6个小时；
[0019] (7)二道酶解
[0020] 调整酶解罐内液体pH值至5. 3-5. 7,加入木瓜蛋白酶，所述木瓜蛋白酶的酶活力 为80-100u/g，质量为酶解罐内物料质量的0. 5-0. 8%，加入纯水，调整料液比至1:2-4. 5， 调整酶解罐内温度至50-55°C，酶解4-6小时；
[0021] (8)鱼鳞胶原蛋白液酵母发酵
[0022] 按照葡萄糖1. 8-2. 2%，蛋白胨0. 8-1. 2%，酵母膏0. 4-0. 6%的质量百分比浓度 配制发酵培养基，经121-130?灭菌；从培养皿中挑取酵母菌接种到三角瓶中进行摇瓶培 养70-74小时后，将酵母菌、发酵培养基和步骤（7)获得的酶解液一起转移到发酵罐中， 所述酵母菌、酶解液和发酵培养基的体积配比为为〇. 003-0. 005:5-7:3-5,发酵通气率为 0. 8-1. 2 : 1，调整发酵罐内温度28-32°C，pH值至4. 5-5. 0,发酵培养46-50小时；
[0023] (9)活性炭吸附反应
[0024] 在发酵罐中加入活性炭粉末，所述活性炭粉末质量为酶解罐内物料质量的 0. 5-1. 5%，调整发酵罐内温度至50-55°C，保温40-60分钟；
[0025] (10)过滤
[0026] 将发酵罐内物料用压滤机过滤后，然后袋式过滤；所述压滤机采用孔径为 200-300目的隔膜；所述袋式过滤采用孔径为I. 0 μ m-10 μ m微孔滤膜；
[0027] (11)浓缩
[0028] 滤液先经过孔径为0. 1-0. 22 μ m的微滤膜过滤，接着经过孔径为0. 01-0. 02 μ m的 超滤膜过滤，超滤通过液经过孔径为l_2nm的纳滤膜浓缩，得纳滤液；
[0029] (12)灭菌
[0030] 纳滤液在温度121-130°C下灭菌8-10s，然后待温度冷却至45-55°C时出料；
[0031] (13)喷雾干燥
[0032] 将灭菌后的纳滤液在喷雾干燥装置中通过喷雾使其提炼成粉末，得成品。
[0033] 此外，本发明上述技术方案还进一步改进如下：
[0034] 为了进一步提高胶原蛋白的产量，可以将步骤（11)中所述的超滤膜过滤后所 得到的未通过超滤膜的超滤截留液转移到酶解罐中，调整酶解罐内液体pH值至8. 2-8. 5， 加入胰蛋白酶，所述胰蛋白酶的酶活力为4000-4300u/g，质量为酶解罐内物料质量的 0. 2-0. 7 %，调整酶解罐内温度至50-55°C，酶解4-6个小时；之后调整酶解罐内液体pH值 至5. 3-5. 7,加入木瓜蛋白酶，所述木瓜蛋白酶的酶活力为80-100u/g，质量为酶解罐内物 料质量的〇. 5-0. 8 %，加入纯水，调整料液比至1:2-4. 5,调整酶解罐内温度至50-55°C，酶 解4-6小时得酶解液；之后按照葡萄糖1. 8-2. 2%，蛋白胨0. 8-1. 2 %，酵母膏0. 4-0. 6 % 的质量百分比浓度配制发酵培养基，经121-130°C灭菌；从培养皿中挑取酵母菌接种到三 角瓶中进行摇瓶培养70-74小时后，将酵母菌、发酵培养基和酶解液一起转移到发酵罐 中，所述酵母菌、酶解液和发酵培养基的体积配比为为〇. 003-0. 005:5-7:3-5,发酵通气 率为0.8-1. 2 :1，调整发酵罐内温度28-32°C，pH值至4.5-5. 0,发酵培养46-50小时；之 后在发酵罐中加入活性炭粉末，所述活性炭粉末质量为酶解罐内物料质量的0. 5-1. 5%， 调整发酵罐内温度至50-55°C，保温40-60分钟；之后将发酵罐内物料用压滤机过滤后， 然后袋式过滤；所述压滤机采用孔径为200-300目的隔膜；所述袋式过滤采用孔径为 1. 0 μ m-10 μ m微孔滤膜；之后滤液先经过孔径为0. 1-0. 22 μ m的微滤膜过滤，接着经过孔 径为0. 01-0. 02 μ m的超滤膜过滤，将过滤后所得的滤液与所述超滤通过液合并，合并后的 液体再通过液经过孔径为l_2nm的纳滤膜浓缩，得纳滤液。
[0035] 所述喷雾干燥装置中，莫诺泵进料速度为90-110kg/h，进风温度为180-198°C，出 风温度为75-90 °C。
[0036] 步骤（3)中所述的酸溶液采用柠檬酸溶液，所述柠檬酸溶液的配制方法如下：先 按照5. 0-8. 5 :70. 0-85. 0的质量配比量取适量EDTA二钠和柠檬酸后，再加入纯水，配制成 质量浓度百分比为15% -18. 7%的柠檬酸溶液；
[0037] 将柠檬酸溶液倒入酶解罐中时，鱼鳞与柠檬酸溶液的质量体积浓度为 800-1500kg/m3,之后加入纯水，使鱼鳞与柠檬酸溶液的质量体积浓度调整到300-440kg/m3。
[0038] 步骤（3)中所述的酸溶液也可以采用浓度为0. 04-0. 06mol/L的盐酸溶液。
[0039] 本发明所提供的鱼鳞酶解生产胶原蛋白的制备工艺对比现有技术有如下优点： [0040] 1)跟常规生产工艺相比本工艺减少了活性炭反应罐和活性炭过滤设备两套设备 投资，将二道酶解罐与过滤设备组合配套使用，在发酵罐中即可进行活性炭过滤，实现脱色 脱腥的效果，既减少了工艺步骤，又降低了生产成本。
[0041] 2)在二道酶解之后进行酵母发酵，能较好地去除鱼腥味，同时改善胶原蛋白液气 味，使其具有一定的芳香味。
[0042] 3)跟常规生产