短小芽孢杆菌和蛭弧菌的粉状制剂及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及饲料添加剂技术领域，具体地说，是短小芽孢杆菌和蛭弧菌的粉状制 剂及其应用。
【背景技术】
[0002] 弧菌属于弧菌科弧菌属，是一类革兰氏阴性、具极生鞭毛、能运动、无芽孢的短杆 状细菌，其中有的弧菌有一定的弯曲，欠柔软，有的弯曲不明显。弧菌是海洋细菌的优势类 群之一，广泛分布于世界各地各类河口、内湾、沿岸、水体养殖区和外海的水体及沉积物中， 各种海洋生物体表或体内也常生存着高密度海洋弧菌，在海洋环境中占据着重要的生态地 位，具有多种多样的生理、生态功能，在海洋微食物环中扮演重要角色，对海洋的营养物的 循环起着非常重要的作用。但同时，弧菌又是水生动物中的一类重要的病原菌。
[0003] 随着高密度海水养殖业快速发展，对养殖环境的污染日益加剧。水产品的病害已 成为海水养殖业发展的主要问题。弧菌病是由弧菌属细菌引起的一类细菌性疾病，该病在 全球范围内广泛发生，其爆发性流行不仅给海水养殖鱼类、贝类及甲壳类等经济动物的养 殖业造成巨大的经济损失，还导致野生的海水鱼类、贝类及甲壳类的大量死亡。弧菌病是最 严重的疾病之一，其死亡率甚至高达100%。
[0004] 为了控制病害，通常过度使用抗生素类药物，这不仅造成养殖产品的药物残留，而 且还提高了病原细菌的耐药性，引起抗性基因的转移，导致生态失调。2005年，欧盟已禁止 在动物养殖中使用一切非治疗性抗生素。因此，寻找抗生素的替代药物、探索新的防治方式 已经迫在眉睫。
[0005] 中国专利文献CN101781627A公开了一种海水蛭弧菌微生态制剂的制备与应用， 涉及一种海水微生态制剂，需要提供适合于海水养殖用的蛭弧菌制剂的制备方法。该发 明由以下步骤组成：制备宿主菌悬液；蛭弧菌的分离、纯化；蛭弧菌增殖培养，其特征是将 施氏假单胞菌接斜面活化后，在试管中加入生理盐水制得菌悬液，然后用营养肉汤增殖培 养，在所得菌液中加入絮凝剂，摇匀后静置沉淀，加入生理盐水得到10 12cfu/mL的宿主菌 悬液；用双层琼脂平板法对采集的海水和底泥样品进行蛭弧菌的分离和纯化，将含有宿主 菌悬液和采集样品的培养基混匀后倒入下层海水琼脂上培养，将宿主菌和分离得到的蛭 弧菌加入到灭菌天然海水中培养至輕弧菌浓度为1〇 8?10 9pfu/mL，备用。中国专利文献 CN102217655A公开了一种粉状噬菌蛭弧菌制剂及其制备方法，以沸石粉作为赋形载体，利 用喷雾干燥技术制备粉状噬菌蛭弧菌制剂。中国专利文献CN102726634A公开了一种海参 用微生态饲料及其制备方法，饲料包括噬菌蛭弧菌、枯草芽孢杆菌和辅料；所述噬菌蛭弧 菌在微生态饲料中的浓度为1〇 6_1〇1(1个/g，所述枯草芽孢杆菌在微生态饲料中的浓度为 106-101(|个/g，所述辅料包括氮源、碳源和磷酸盐。中国专利文献CN103719535A公开了一种 噬菌蛭弧菌微胶囊，所述微胶囊的壁为明胶，颗粒呈球形，表面有凹陷，但没有孔和裂纹，所 述颗粒粒径大小为3?12ym，分布基本均匀，且其中，噬菌蛭弧菌的含量为3. 69X107pfu/ g?3. 70X107pfu/g，大肠杆菌DH5a的含量为 8. 6X109pfu/g?2. 10X101Qpfu/g。该微 胶囊的制备方法，其包括步骤：1)大肠杆菌DH5a菌悬液的制备；2)噬菌蛭弧菌培养液的 制备；和3)将步骤1)的大肠杆菌DH5a菌悬液和步骤2)的噬菌蛭弧菌培养液与无菌明胶 溶液均匀混合后，进行喷雾干燥，最终制备成微胶囊。
[0006] 中国专利文献CN103525723A公开了一种具有群体感应系统抑制作用的短小芽孢 杆菌，其保藏编号为CCTCCM2013240。该发明还提供这种短小芽孢杆菌的应用以及以这种 短小芽孢杆菌或其发酵液为活性成分的微生物制剂。该发明以紫色杆菌为筛选模型，利用 "T"型划线法和滤纸片法筛选出一株能够抑制紫色杆菌紫色色素产生的菌株F3-1，试验结 果表明菌株F3-1能够抑制紫色杆菌的QS信号分子，具有抑制细菌群体感应的作用，可用于 制备防治水产细菌性病害的微生物制剂。
[0007] 但是关于本发明的可以清除弧菌引起的疾病的一种短小芽孢杆菌和蛭弧菌的粉 状制剂及其应用目前还未见报道。
【发明内容】
[0008] 本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种短小芽孢杆菌和蛭弧菌的粉状 制剂。
[0009] 本发明的再一的目的是，提供一种短小芽孢杆菌和蛭弧菌的粉状制剂的应用。
[0010] 为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：一种短小芽孢杆菌和蛭弧菌的粉状 制剂，所述的粉状制剂中包含保藏编号为CCTCCM2013240的短小芽孢杆菌和蛭弧菌。
[0011] 所述的蛭弧菌为噬菌蛭弧菌、斯托普蛭弧菌和斯塔尔蛭弧菌中的一种或多种。
[0012] 为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是：所述的短小芽孢杆菌和蛭弧 菌的粉状制剂在制备饲料添加剂中的应用。
[0013] 所述的饲料添加剂可以清除弧菌引起的疾病。
[0014] 所述的弧菌包括：霍乱弧菌、拟态弧菌、梅契尼科夫弧菌、霍利斯弧菌、海鱼弧菌、 河流弧菌、弗尼斯弧菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌、创伤弧菌、辛辛那提弧菌、鲨鱼弧菌。
[0015] 所述的饲料添加剂为对虾饲料添加剂。
[0016] 所述的短小芽孢杆菌和蛭弧菌的粉状制剂在制备饲料中的应用。
[0017] 所述的饲料为对虾饲料。
[0018] 本发明优点在于：
[0019] 本发明制备的具有群体感应系统抑制作用的短小芽孢杆菌和蛭弧菌的粉状制剂 可以广谱、有效地清除弧菌引起的疾病，添加到对虾饲料中不仅可以抑制对虾肠道病原弧 菌的生长、减少对虾弧菌病的发生，还能促进对虾生长、降低养殖成本，值得在水产养殖中 广泛应用。
【具体实施方式】
[0020] 下面结合实施例对本发明提供的【具体实施方式】作详细说明。
[0021] 具有群体感应系统抑制作用的短小芽孢杆菌，其释放出来的蛋白酶可以淬灭群体 感应信号分子，进而使致病菌调控毒力因子表达的机能丧失或者减弱，那么致病菌就是一 头没有獠牙的狼，而宿主有足够的时间把它围困进而依靠自身免疫消除抗原。
[0022] 将具有群体感应系统