本发明属于茶叶的综合开发利用领域，主要涉及一种茶叶醇溶蛋白的提取方法。
背景技术：
：我国是茶叶生产加工大国，茶园面积和产量逐年增长，出现茶资源供过于求的趋势。中国茶产业消费报告指出，2015年中国茶园面积为287.75亿m2，占世界茶园总面积的78.57%；茶叶产量227.8万吨，占世界茶叶总产量的43.11%，茶叶消费量没有相应的增长，而大量茶叶功能性提取物产业和茶饮料产业迅速发展，年产大量茶渣。同时，还有大量的未被采摘的鲜叶以及夏秋茶低档茶。这些茶渣、茶鲜叶和夏秋低档茶资源量大，但未有效地开发利用途径，造成茶叶资源浪费。故如何合理利用大量茶渣成为急需解决的问题。多途径、全方位综合利用茶叶资源符合国家茶产业发展战略。目前茶渣大部分作为肥料处理。在茶渣中含有大量的未被利用的蛋白。茶叶中蛋白质含量约15%~30%（以干重计算），比小麦、大米和玉米等主要粮食作物的蛋白质含量高。其中约82%为谷蛋白，14%为醇溶蛋白，3%为白蛋白和约1%为球蛋白。其中，谷蛋白溶于稀酸或稀碱，白蛋白溶于水，球蛋白溶于盐类。可见，茶叶中大部分蛋白质不溶于水，残留在茶渣中，不能被人体吸收利用。目前，对于茶叶蛋白质的研究开发相对较少，更未见对茶叶醇溶蛋白相关研究。现有的关于茶叶蛋白质的专利主要有：解新安等人申请号为201610212197.4的“一种微波辅助提取茶渣蛋白的工艺方法”的发明专利，主要用微波辅助提高茶渣蛋白提取效率；潘顺顺等人申请号为201610313547.6的“一种绿茶茶渣中蛋白的提取方法”的发明专利，主要利用酶解破壁，碱溶酸沉得到茶蛋白；张士康等人申请号为201110225665.9的“一种茶叶蛋白产品的提取方法”的发明专利，主要利用超声辅助碱提茶叶蛋白；王洪新等人申请号为201010236137.9的“一种从茶叶制备茶叶蛋白乳化剂的方法”的发明专利，主要利用茶渣经过果胶酶+纤维素酶复合酶法辅助热水提取出茶叶蛋白质。针对这些研究主要是对碱提茶叶蛋白的研究。还未见有关茶叶醇溶蛋白相关研究。醇溶蛋白是一种植物种子的储存蛋白，不溶于水，可溶于50%~90%乙醇溶液中。醇溶蛋白可以作为一种食品保鲜膜，为生物可降解材料，在人体内分解不会产生有害物质，生物相容性良好，醇溶蛋白制备的载药系统具有优良的缓释效果和一定的肝靶向效应。此外，醇溶蛋白还具有一定的美容护肤作用。在茶叶中醇溶蛋白也是主要蛋白之一，对茶叶中醇溶蛋白的开发有利于茶叶资源的综合利用。经查新，国内外尚未见到茶叶醇溶蛋白提取方法的研究报道或专利公开。技术实现要素：本发明的目的是针对现有的茶鲜叶、低档茶、茶渣等综合利用技术中存在的不足之处，提供一种茶叶醇溶蛋白的提取方法，该方法提取茶叶中醇溶蛋白的方法工艺简单，生产成本低。本发明解决现有技术问题所采用的技术方案如下：一种茶叶醇溶蛋白的提取方法，包括以下几个步骤：s1.原料预处理：茶鲜叶先微波干燥杀青，再烘干，将干燥的茶鲜叶、茶叶或茶渣作为原料进行清洗除杂脱酚，干燥后粉碎备用；s2.茶蛋白浸提：采用醇提制得茶叶蛋白质提取液；s3.对茶叶蛋白质提取液进行脱色；s4.对茶叶蛋白质提取液进行旋蒸浓缩处理；s5.从步骤s4获得的浓缩液中沉淀出茶蛋白；s6.将s5中沉淀出的茶蛋白经干燥，即得茶叶醇溶蛋白。作为优选，步骤s1中原料经沸水浴洗涤，料液比为1:20~1:40(w/v)，去除原料中的灰尘和残留的酚类物质，沥干后干燥。作为优选，步骤s2中所述浸提具体过程为：向原料中加入5~30倍重量的60~85%(v/v)醇溶液在30~80℃下搅拌浸提1~6h。作为优选，所述醇溶液为乙醇溶液或异丙醇或叔丁醇。作为优选，步骤s1中原料粉碎后，过60~100目筛，室温储藏备用。作为优选，步骤s3所述脱色具体操作为：向蛋白质提取液中缓慢加入3~5%的体积比浓度为30%的双氧水溶液，在20~30℃下搅拌混合反应30~120min。作为优选，步骤s4中所述浓缩过程为采用真空浓缩，温度控制在40~60℃，浓缩至原体积的15~40%。作为优选，步骤s5中所述沉淀过程为静置1h得蛋白质沉淀。作为优选，步骤s6所述干燥采取喷雾干燥或真空冷冻干燥。本发明的优点在于采用醇提蛋白的方法，进行工艺优化，提取茶叶中的醇溶蛋白。本发明具有工艺简单，能耗低，效率高，过程中不需要加入不同种类的试剂，提取成本低，对环境污染小，提取条件温和等优点。且提取茶叶醇溶蛋白具有一定的成膜性，可开发成为一种食品绿色保鲜膜。附图说明图1为乙醇浓度对茶叶醇溶蛋白提取的影响。图2为料液比对茶叶醇溶蛋白提取的影响。图3为提取时间对茶叶醇溶蛋白提取的影响。图4为提取温度对茶叶醇溶蛋白提取的影响。具体实施方式为了使本发明的目的、技术方案更加清晰明白，下面结合以乙醇溶液作为提取溶剂举例，对本发明进行进一步详细说明。本发明所用设备仪器和试剂均为本领域所常用。应当理解，此处所描述的举例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。实施例1醇提茶叶蛋白的方法一种茶叶醇溶蛋白的提取方法，步骤为：s1.原料预处理：茶鲜叶先微波干燥杀青，再烘干，将干燥的茶鲜叶、茶叶或茶渣作为原料进行沸水浴清洗除杂脱酚，洗涤时料液比1：25(w/v)，干燥后粉碎过80目筛，备用；s2.茶蛋白浸提：向原料中加入5~30倍60-85%(v/v)乙醇溶液在30~80℃下提取1-6h，8000r/min离心5min，弃去残渣，得醇溶蛋白提取液；s3.对茶叶蛋白质提取液进行脱色：按蛋白质提取液中体积的4%加入浓度为30%的双氧水溶液，在25℃下搅拌混合反应60min；s4.对茶叶蛋白质提取液进行旋蒸浓缩处理：对蛋白质提取液进行真空旋转浓缩，温度控制在40℃，浓缩至原体积的25%；s5.从步骤s4获得的浓缩液中沉淀出茶蛋白：经脱色浓缩后的蛋白质提取液静置1h，使蛋白质充分沉淀，8000r/min离心5min，弃去上清液，得蛋白质提取物沉淀；s6.将s5中沉淀出的茶蛋白经真空冷冻干燥，即得茶叶醇溶蛋白。茶叶醇溶蛋白提取率可达4.23~10.48%，经无水乙醇室温洗涤2次，每次2h，最终茶叶醇溶蛋白纯度可达45.36~68.04%。实施例2乙醇浓度对茶叶醇溶蛋白提取率的影响组1-6制备步骤同实施例1，组1-6不同之处及不同乙醇浓度对茶叶醇溶蛋白提取率的影响如表1和附图1。表1乙醇浓度对茶叶醇溶蛋白提取率的影响组别料液比（w/v）乙醇溶液浓度(v/v)茶蛋白浸提时间提取温度提取率组11:1060%4h50℃5.08%组21:1065%4h50℃5.48%组31:1070%4h50℃6.40%组41:1075%4h50℃7.60%组51:1080%4h50℃7.09%组61:1085%4h50℃6.77%实施例3料液比对茶叶醇溶蛋白提取率的影响组7-12制备步骤同实施例1，组7-12不同之处及不同料液比对茶叶醇溶蛋白提取率的影响见表2和附图2。表2料液比对茶叶醇溶蛋白提取率的影响组别料液比（w/v）乙醇溶液浓度(v/v)茶蛋白浸提时间提取温度提取率组71:575%4h50℃3.78%组81:1075%4h50℃8.03%组91:1575%4h50℃8.55%组101:2075%4h50℃8.96%组111:2575%4h50℃9.33%组121:3075%4h50℃9.65%实施例4提取时间对茶叶醇溶蛋白提取率的影响组13-18制备步骤同实施例1，组13-18不同之处及不同提取时间对茶叶醇溶蛋白提取率的影响如表3和附图3所示。表3提取时间对茶叶醇溶蛋白提取率的影响组别料液比（w/v）乙醇溶液浓度(v/v)茶蛋白浸提时间提取温度提取率组131:1075%1h50℃6.33%组141:1075%2h50℃6.68%组151:1075%3h50℃6.77%组161:1075%4h50℃6.71%组171:1075%5h50℃6.58%组181:1075%6h50℃6.06%实施例5提取温度对茶叶醇溶蛋白提取率的影响组19-24制备步骤同实施例1，组19-24不同之处及不同提取温度对茶叶醇溶蛋白提取率的影响如表4和附图4所示。表4提取温度对茶叶醇溶蛋白提取率的影响组别料液比（w/v）乙醇溶液浓度(v/v)茶蛋白浸提时间(h)提取温度(℃)提取率组191:1075%4305.60%组201:1075%4406.70%组211:1075%4507.47%组221:1075%4607.69%组231:1075%4707.91%组241:1075%4808.10%以上所述，仅为本发明部分具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本
技术领域：
的技术人员在本发明披露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。当前第1页12