利用PCR‑SSCP快速检测绵羊NELF基因单核苷酸多态性的方法及其应用与流程

文档序号:12109231阅读:来源:国知局

技术特征:

1.利用PCR-SSCP快速检测绵羊NELF基因单核苷酸多态性的方法,其特征在于:以待测绵羊全基因组DNA为模板,以引物对P为引物,PCR扩增绵羊NELF基因片段,将PCR扩增的片段变性成单链DNA,然后通过聚丙烯酰胺凝胶电泳进行检测,根据凝胶电泳结果判定绵羊NELF基因上单核苷酸多态性位点的基因型;

所述的引物对P为:

上游引物:5’-TTGCCCCTTTCGTTGCTC-3’

下游引物:5’-TTTCTCCACTGTCACCGCC-3’。

2.如权利要求1所述的利用PCR-SSCP快速检测绵羊NELF基因单核苷酸多态性的方法,其特征在于:所述PCR扩增反应程序为:95℃预变性5min;95℃变性30s,64℃退火50s,72℃延伸30s,34个循环;72℃延伸10min。

3.如权利要求1所述的利用PCR-SSCP快速检测绵羊NELF基因单核苷酸多态性的方法,其特征在于:所述绵羊NELF基因的单核苷酸多态性为绵羊NELF基因第454位T>C突变的单核苷酸多态性。

4.如权利要求1所述的利用PCR-SSCP快速检测绵羊NELF基因单核苷酸多态性的方法,其特征在于:所述聚丙烯酰胺凝胶的浓度为10-12%。

5.如权利要求1所述的利用PCR-SSCP快速检测绵羊NELF基因单核苷酸多态性的方法,其特征在于:所述聚丙烯酰胺凝胶电泳的条件包括:先于200-250V预电泳20-60min,再于120-150V电泳3-4h。

6.如权利要求1所述的利用PCR-SSCP快速检测绵羊NELF基因单核苷酸多态性的方法,其特征在于:所述绵羊NELF基因的单核苷酸多态性表现为TT、TC以及CC三种基因型,电泳结果分别为:TC基因型具有三个条带,TT和CC基因型具有两个条带。

7.如权利要求1所述的利用PCR-SSCP快速检测绵羊NELF基因单核苷酸多态性的方法在绵羊分子育种中的应用。

8.如权利要求7所述的应用,其特征在于:建立基因型为TC的绵羊群体,提高绵羊的产羔数。

9.如权利要求8所述的应用,其特征在于:所述绵羊选自湖羊。

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