本发明涉及一种提取方法，尤其涉及一种从西洋参须根中提取西洋参多糖的方法。
背景技术：
西洋参(Panax quinquefolius L.)为五加科人参属植物干燥的根，多年生草本植物，又名西洋人参、洋参、花旗参、广东人参等，原产于加拿大、美国、法国等地。20世纪80年代起，我国大面积引种，目前种植主要集中在东北三省、山东、北京等地，目前我国已成为世界上生产西洋参的第三大国，也是世界上最大的西洋参消费国。西洋参具有与人参相似的功能，但又因性凉而不同于人参，具有补气养阴，清热生津的功效，主治阴虚发热、口干舌燥、消渴等症。西洋参多糖(PPQ)是西洋参中含量最多的一类具有特殊生物活性的物质，目前分离出来的成分有蔗糖、人参三糖、麦芽糖、葡萄糖、果糖、山梨糖、半乳糖醛酸、半乳糖、阿拉伯糖、木糖、鼠李糖等。有关研究表明，西洋参多糖不仅能增强机体网状内皮系统的吞噬功能，还能增加机体的非特异性免疫和细胞免疫功能。具有免疫调节、抗肿瘤、降血糖、抗辐射、预防流行性感冒和上呼吸道感染等作用。
目前，对于西洋参多糖提取工艺研究主要是热水浸提法、水提醇沉法等传统的提取方法，经查，现有专利号为CN201110157090.1的中国专利《西洋参多糖肽的制备生产方法》，包括以下步骤：用西洋参茎、叶、须根为原料，以水提取，料液比1:10，在60℃，提取时间2h，两次，过滤合并滤液，真空浓缩滤浓成10:1，75％酒精沉淀，离心取上清液回收酒精并提取皂苷，再用95％食用酒精洗脱沉淀物，回收酒精；对沉淀物按1:10加水溶解，加入1％风味蛋白酶，在55℃，PH 5.6，水解4h，灭酶，过滤真空浓缩，喷雾干燥，制成灰白色的西洋参多糖肽，此方法采用了传统的水提醇沉提取方法以及单酶解辅助工艺，存在有效成分提取率低、得率低、操作繁琐、耗时长等缺点。因此，优化西洋参多糖的制备工艺具有重要的研究和开发应用价值。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题是提供一种工艺简单、操作方便且提取率高的从西洋参须根中提取西洋参多糖的方法。
本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种从西洋参须根中提取西洋参多糖的方法，其特征在于包括以下步骤：
1)粉碎：将干燥的西洋参须根用粉碎机粉碎后，过35～45目筛备用；
2)碱浸：将上述过筛后的西洋参须根粉末加入85～95℃质量浓度2～4％氢氧化钠溶液中浸泡，过滤得滤渣，滤渣挥干；
3)复合酶酶解：将步骤2)所得的滤渣加入酶底质量比为0.9～1.1％复合酶，在恒温振荡器上酶解50～70分钟；
4)超声波法提取：将步骤3)酶解后的滤渣加入蒸馏水，超声提取2～4次，离心收集滤液；
5)浓缩：将上述所得的滤液减压浓缩；
6)醇沉：将浓缩后的滤液冷却后加入无水乙醇，静置过夜，离心后收集沉淀；
7)真空干燥：将所得的沉淀真空干燥，得到目标产物西洋参多糖。
作为改进，所述步骤2中的西洋参须根粉末与氢氧化钠溶液的料液比为1g:20ml～1g:25ml，碱浸时间为2～3小时。
优选的，所述氢氧化钠溶液的温度为90℃，质量百分比为3％，西洋参须根粉末与氢氧化钠溶液的料液比为1g:25ml，碱浸时间3小时。
作为优选，所述步骤3)的复合酶为纤维素酶、果胶酶、葡聚糖酶、果汁酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白或枯草杆菌蛋白酶中的二种，复合酶中二种酶的质量比为1:1，复合酶酶解料液比为1g:8ml～1g:12ml，恒温振荡器的温度为45～50℃。
再优选，所述复合酶酶解料液比为1g:10ml，酶解时间1小时、恒温振荡器的温度为50℃。
作为优选，所述步骤4)的滤渣与蒸馏水的料液比为1g:25ml～1g:30ml，超声提取功率为45～60W，超声提取3次，每次时间为15～30min。
再优选，所述滤渣与蒸馏水的料液比为1g:25ml,超声提取功率为60W，每次提取时间为20min.
进一步改进，所述步骤5)的减压浓缩的温度为50～60℃，压力为0.07～0.09MPa，浓缩的相对密度为1.25～1.30。
进一步改进，所述步骤6)的乙醇的最终体积百分数达到70～80％，静置11～13小时。
最后，所述步骤7)的真空干燥的温度为70～80℃，压力为0.08～0.09MPa。
与现有技术相比，本发明的优点在于：
(1)一定量浓度的碱溶液促进西洋参多糖颗粒内部及之间的物理化学反应，而使得颗粒内部的多糖更快更多的溶出，从而提高多糖的提取率；
(2)利用纤维素酶能特异性的降解植物细胞壁的主要成分纤维素，使植物的细胞壁破裂，多糖易从细胞内释放而增加出汁，提高多糖得率；
(3)利用蛋白酶对植物细胞中游离的蛋白质具有分解作用，使其结构松散；
(4)利用蛋白酶还会使糖蛋白和蛋白聚糖中游离的蛋白质水解，降低对原料的结合力，有利于多糖的浸出；
(5)利用木瓜蛋白酶是一种在酸性、中性、碱性环境下均能分解蛋白质的蛋白酶，具有较宽的底物特异性；
本发明突破了传统的水提或醇提西洋参多糖的方法，采用碱浸法结合双酶解和超声辅助工艺进行提取，三重工艺叠加，极大的提高了西洋参多糖的提取率，本发明工艺简单，易操作，显著提高了西洋参多糖的提取率和得率，为西洋参多糖提取的工业化生产提供理论参考依据。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步详细描述。
实施例1
将100g已干燥的西洋参须根用粉碎机粉碎后，过40目筛备用。按料液比1:25(g:ml)加入90℃的3％氢氧化钠浸泡3小时，过滤得滤渣，滤渣挥干；所得的滤渣按料液比为1:10(g:ml)加入酶底质量分数为1％复合酶(纤维素酶:木瓜蛋白酶＝1:1)，在50℃的恒温振荡器上酶解1小时；酶解的滤渣按料液比1:28(g:ml)加入蒸馏水，60W超声提取三次，每次20min，离心回集滤液；所得的滤液料减压浓缩，减压浓缩的温度为60℃，压力为0.07～0.09MPa，浓缩的相对密度为1.25；浓缩液冷却后加入无水乙醇，乙醇的最终体积分数达到80％，静置12小时，离心后收集沉淀；所得的沉淀真空干燥后，得到目标产物西洋参多糖，得率13.55％；真空干燥的温度为70～80℃,压力为0.08～0.09MPa。
实施例2
将100g已干燥的西洋参须根用粉碎机粉碎后，过40目筛备用。按料液比1：20(g:ml)加入90℃的2％氢氧化钠浸泡2小时，过滤得滤渣，滤渣挥干；所得的滤渣按料液比为1:8(g:ml)加入酶底质量分数为1％复合酶(果胶酶:木瓜蛋白酶＝1:1)，在45℃的恒温振荡器上酶解1小时；酶解的滤渣按料液比1:25(g:ml)加入蒸馏水，45W超声提取三次，每次15min，离心回集滤液。所得的滤液减压浓缩，减压浓缩的温度为50℃，压力为0.07～0.09MPa，浓缩的相对密度为1.30；浓缩液冷却后加入无水乙醇，乙醇的最终体积分数达到70％，静置12小时，离心后收集沉淀；所得的沉淀真空干燥后，得到目标产物西洋参多糖，得率11.17％；真空干燥的温度为70～80℃，压力为0.08～0.09MPa。
实施例3
将100g已干燥的西洋参须根用粉碎机粉碎后，过40目筛备用；按料液比1:23(g:ml)加入90℃的4％氢氧化钠浸泡3小时，过滤得滤渣，滤渣挥干；所得的滤渣按料液比为1:12(g:ml)加入酶底质量分数为1％复合酶(纤维素酶:菠萝蛋白酶＝1:1)，在50℃的恒温振荡器上酶解1小时。酶解的滤渣按料液比1:30(g:ml)加入蒸馏水，50W超声提取三次，每次25min，离心回集滤液；所得的滤液减压浓缩，减压浓缩的温度为55℃，压力为0.07～0.09MPa，浓缩的相对密度为1.25；浓缩液冷却后加入无水乙醇，乙醇的最终体积分数达到75％，静置12小时，离心后收集沉淀；所得的沉淀真空干燥后，得到目标产物西洋参多糖，得率12.32％；真空干燥的温度为70～80℃,压力为0.08～0.09MPa。
实施例4(对比例)
将100g已干燥的西洋参须根用粉碎机粉碎后，过40目筛备用；按料液比1:25(g:ml)加入90℃3％氢氧化钠浸泡3小时，过滤得滤渣，滤渣挥干；滤渣按料液比1:25(g:ml)加入水，60W超声提取三次，每次20min，离心回集滤液；所得的滤液料减压浓缩，减压浓缩的温度为60℃，压力为0.07～0.09MPa，浓缩的相对密度为1.25；浓缩液冷却后加入无水乙醇，乙醇的最终体积分数达到80％，静置12小时，离心后收集沉淀；所得的沉淀真空干燥后，得到目标产物西洋参多糖，得率7.15％；真空干燥的温度为70～80℃，压力为0.08～0.09MPa。
可以看到，本实施例没有酶解步骤，碱浸后直接用超声波提取，最终西洋参多糖的得率较低。
实施例5(对比例)
将100g已干燥的西洋参须根用粉碎机粉碎后，过40目筛备用；按料液比1:25(g:ml)加入90℃的3％氢氧化钠浸泡3小时，过滤得滤渣，滤渣挥干；所得的滤渣按料液比为1:10(g:ml)加入酶底质量分数为1％复合酶(纤维素酶:木瓜蛋白酶＝1:1)，在50℃的恒温振荡器上酶解1小时；酶解的滤渣按料液比1:28(g:ml)加入蒸馏水，100℃水浴回流2次，每次2.5个小时，离心回集滤液；所得的滤液料减压浓缩，减压浓缩的温度为60℃，压力为0.07～0.09MPa，浓缩的相对密度为1.25；浓缩液冷却后加入无水乙醇，乙醇的最终体积分数达到80％，静置12小时，离心后收集沉淀；所得的沉淀真空干燥后，得到目标产物西洋参多糖，得率10.77％；真空干燥的温度为70～80℃,压力为0.08～0.09MPa。
本实施例在酶解后采用水浴回流提取的方法，可以看到与采用超声波提取相比较，得率有所下降。