一种提取秋葵黄酮类化合物的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于天然提取物技术领域，具体涉及一种从秋葵中提取秋葵黄酮类化合物 的工艺。
【背景技术】
[0002] 秋葵(Abelmoschus esculentus L.Moench)又名黄秋葵、羊角豆、咖啡黄葵、毛前， 黄蜀葵，民间也称〃洋辣椒〃。原产于非洲，20世纪初由印度引入中国，多见于中国南方。其可 食用部分是果荚，分绿色和红色两种，口感脆嫩多汁，滑润不腻，香味独特，种子可榨油。
[0003] 秋葵性味淡、寒，具有利咽、通淋、下乳、调经之功效。秋葵含有丰富的维生素和矿 物质，每100克秋葵的嫩果中，约含有4毫克的维生素 C、1.03毫克的维生素 E以及310微克的 胡萝卜素。秋葵中富含的锌和硒等微量元素，对增强人体防癌抗癌能力很有帮助。其次，秋葵 嫩果中有黏黏的液体物质，这种黏液含有果胶和黏多糖类等多糖。黏多糖具有增强机体抵 抗力，维护人体关节腔里关节膜和浆膜的光滑效果，削减脂类物质在动脉管壁上的堆积，避 免肝脏和肾脏中结缔组织萎缩等功效。再者，秋葵含水量高，脂肪很少，每100克秋葵嫩果只 含有0.1克脂肪，很适合想要减肥瘦身的女士，而且它富含的维生素 C和膳食纤维，还能使皮 肤嫩白。此外，黄秋葵的粘性物质，可促进胃肠蠕动，有益于助消化，益肠胃；秋葵的粘性物 质中含有50%的可溶性纤维素，有利通便、排毒、防癌，能有效降低血清胆固醇，预防心血管 病、可提高耐缺氧能力;黄秋葵中含有的果胶和多糖可有护肝功效，防治便秘；同时，黄秋葵 不仅含钙量与鲜奶相当，且钙的吸收率在50-60%，高于牛奶1倍，是理想的钙源;黄秋葵为 低能量食物，且黄酮含量为2.8 %，可延缓衰老、具有抗氧化、防衰老作用，防治糖尿病。
[0004] 黄秋葵果实中含有大量的黄酮类成分，已知黄酮类化合物是一类存在于植物界的 重要的生活活性物质，据研究报道，它不仅能作为防治心脑血管疾病的药物，而且有明显的 抗脂质过氧化、抗衰老、清除自由基，降血脂、降低胆固醇、降血糖，抗癌防癌、免疫调节等生 理活性，是一类在人类的营养、健康和防治疾病方面有着广泛应用前景的药物，也是应用广 泛的天然抗氧剂和防腐剂，可用于保健食品和化妆品，因此，具有很好的开发应用价值。而 目前对于秋葵中黄酮类化合物的提取及其活性性质研究才刚刚起步，中国专利 CN102040577A公开了一种黄秋葵黄酮的提纯方法，该方法采用乙醇以冷渗或回流提取法提 取，再用丙酮与甲醇的混合液浸提，将所得的两种提取液合并，减压浓缩得到黄酮粗提取。 上述方法虽然可以较好的将秋葵中含有的黄酮类化合物浸出并提纯，但是整个提取的步骤 较为复杂，需要多种溶剂提取，会造成黄酮营养成分的损失，无形中增大了后续提纯的难 度，工艺较为复杂。
【发明内容】
[0005] 为此，本发明所要解决的技术问题在于现有技术中提取秋葵黄酮类化合物工艺较 为复杂的问题，进而提供一种从秋葵中提取秋葵黄酮类化合物的方法。
[0006] 为解决上述技术问题，本发明所述的提取秋葵黄酮类化合物的方法，包括如下步 骤：
[0007] (I)取黄秋葵鲜果进行冷冻干燥处理，并将处理后的黄秋葵粉碎；
[0008] (2)向黄秋葵中加入聚乙二醇溶剂进行浸渍提取；
[0009] (3)将提取后的料液离心处理，并取上清液过滤，将滤液蒸发浓缩并冷冻干燥处 理，即得所需的黄酮类化合物。
[0010] 所述步骤(2)中，所述聚乙二醇溶剂为PEG600。
[0011] 所述步骤(2)中，所述聚乙二醇溶剂的质量浓度为20-80wt %。
[0012] 所述步骤(2)中，所述黄秋葵与所述聚乙二醇溶剂的料液质量比为1:10-40。
[0013] 所述步骤(2)中，所述浸渍提取步骤的温度为50-90°C。
[0014] 所述步骤(2)中，所述浸渍提取步骤的提取时间为0.5_3h。
[0015] 所述步骤（1)中，所述冷冻干燥步骤的程序具体为：在2-5Pa真空条件下，控制温 度-20°C冷冻干燥2-3h，随后快速降温至-50°C冷冻干燥2-3h;重复上述冷冻控温方式2-3个 循环。
[0016] 本发明还提供了根据上述方法提取得到的秋葵黄酮类化合物。
[0017] 并进一步公开了所述秋葵黄酮类化合物用于制备抗氧化活性药物中的应用。
[0018] 本发明所述从黄秋葵中提取秋葵黄酮类化合物的方法，仅以聚乙二醇为单一提取 试剂进行提取，辅助于优选程序的冷冻干燥处理，其秋葵黄酮类化合物的提取率及提取纯 度较高，与现有技术中采用多重溶剂提取效率相当，且具有操作简便、溶剂回收利用方便、 损失较少的优势。
【附图说明】
[0019] 为了使本发明的内容更容易被清楚的理解，下面根据本发明的具体实施例并结合 附图，对本发明作进一步详细的说明，其中，
[0020] 图1为秋葵黄酮类化合物测定方法中芦丁 (c，mg/mL)和吸光度(A)的标准曲线。
【具体实施方式】
[0021 ]本发明下述实施例涉及的材料及试剂包括：
[0022]黄秋葵:产自浙江嘉兴；
[0023] 芦丁标准品:上海金穗生物科技有限公司生产；
[0024] 无水乙醇:天津市富宇精细化工有限公司生产；
[0025] 亚硝酸钠:天津市大茂化学试剂厂生产；
[0026] 硝酸铝:天津市大茂化学试剂厂生产；
[0027] 氢氧化钠:天津市大茂化学试剂厂生产；
[0028]聚乙二醇200:天津市大茂化学试剂厂生产；
[0029] 聚乙二醇400:天津市大茂化学试剂厂生产；
[0030] 聚乙二醇600:天津市大茂化学试剂厂生产；
[0031 ] 聚乙二醇800:天津市光复精细化工研究所生产；
[0032] 聚乙二醇1000:天津市科密欧化学试剂有限公司生产；
[0033] 聚乙二醇2000:天津市科密欧化学试剂有限公司生产；
[0034]以上试剂均为分析纯。
[0035]本发明下述实施例中涉及的仪器与设备包括：
[0036] HH-6数显电子恒温水浴锅:常州国华电器有限公司生产；
[0037] V-5000可见分光光度计:上海元析仪器有限公司生产；
[0038] MP5002电子天平:上海舜宇恒平科学仪器有限公司生产；
[0039] FA4004B电子天平:上海舜宇恒平科学仪器有限公司生产；
[0040] FA2004B电子天平:上海精密科学仪器有限公司；
[00411 TG1850-WS台式高速离心:上海卢湘仪器离心机仪器有限公司生产；
[0042] KQ-C玻璃仪器气流烘干器:巩义市子华仪器有限责任公司生产；
[0043]高速多功能粉碎机:浙江省永康市松青五金厂；
[0044] GZX-9070MBE电热鼓风干燥箱:上海博讯实业有限公司医疗设备厂；
[0045] SCIENTZ-12ND冷冻干燥机:宁波新芝生物科技股份有限公司。
[0046] 实施例1-7
[0047] 本实施例所述的提取秋葵黄酮类化合物的方法，包括如下步骤：
[0048] (1)将新鲜的黄秋葵洗净，将黄秋葵切片后放入冷冻干燥机，控制2_5Pa真空条件 下，控制温度-20 °C冷冻干燥2h，随后快速降温至-50 °C冷冻干燥3h;重复上述冷冻控温方式 2个循环，将水分完全冻干;冻干后，将黄秋葵放入高速粉碎机中碾成细小粉末，过100目筛， 制成黄秋葵冻干粉末备用；
[0049] (2)向粉碎后的黄秋葵中加入质量浓度为75wt%的不同聚合度的聚乙二醇溶剂 (实施例1-7中聚乙二醇溶剂的聚合度分别为100、200、400、600、800、1000、2000)，所述黄秋 葵与所述聚乙二醇溶剂的料液质量比为1:35,在80°C的恒温水浴锅中进行浸渍提取30分 钟；
[0050] (3)将提取后的料液离心处理，并取上清液过滤，将滤液蒸发浓缩并冷冻干燥处 理，即得所需的黄酮类化合物。
[0051 ] 对比例1
[0052] 本对比例的实验方案与实施例1-7相同，其区别仅在于所述步骤(2)中，以质量浓 度75wt %的乙醇为提取溶剂。
[0053] 实施例8-11
[0054] 本实施例所述的提取秋葵黄酮类化合物的方法，包括如下步骤：
[0055] (1)将新鲜的黄秋葵洗净，将黄秋葵切片后放入冷冻干燥机中，控制2_5Pa真空条 件下，控制温度-20 °C冷冻干燥3h，随后快速降温至-50 °C冷冻干燥2h;重复上述冷冻控温方 式3个循环，将水分完全冻干;冻干后，将黄秋葵放入高速粉碎机中碾成细小粉末，过100目 筛，制成黄秋葵冻干粉末备用；
[0056] (2)向粉碎后的黄秋葵中加入质量浓度为75wt%的聚乙二醇600溶剂，在80 °C的恒 温水浴锅中进行浸渍提取30分钟；实施例8-11中，所述黄秋葵与所述聚乙二醇溶剂的料液 质量比分别为 1:10、1:20、1:30、1:40;
[0057] (3)将提取后的料液离心处理，并取上清液过滤，将滤液蒸发浓缩并冷冻干燥处 理，即得所需的黄酮类化合物。
[0058] 对比例2
[0059] 本实施例所述的提取秋葵黄酮类化合物的方法与实施例9相同，其区别仅在于所 述步骤（1)中的冷冻干燥步骤的程序不同，本对比例采用的冷冻干燥程序具体为:在冷冻干 燥机中，控制2-5Pa真空条件下，控制温度-20°C冷冻干燥15h。
[0060] 对比例3
[0061] 本实施例所述的提取秋葵黄酮类化合物的方法与实施例10相同，其区别仅在于所 述步骤（1)中的冷冻干燥步骤的程序不同，本对比例采用的冷冻干燥程序具体为:在冷冻干 燥机中，控制2-5Pa真空条件下，控制温度-50°C冷冻干燥15h。
[0062] 实施例 12-20