一种桑椹生物碱的选择性提取方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及一种生物碱的提取方法，具体设及一种桑權生物碱的选择性提取方 法，属于生物化工领域。
【背景技术】
[0002] 生物碱是存在于自然界(主要为植物，但有的也存在于动物）中的一类含氮的碱性 有机化合物，有似碱的性质，所W过去又称为歴碱。大多数有复杂的环状结构，氮素多包含 在环内，有显著的生物活性，是中草药中重要的有效成分之一。具有光学活性。有些不含碱 性而来源于植物的含氮有机化合物，有明显的生物活性，故仍包括在生物碱的范围内。按照 生物碱的基本结构，已可分为60类左右。下面介绍一些主要类型:有机胺类(麻黄碱、益母草 碱、秋水仙碱）、化咯烧类(古豆碱、千里光碱、野百合碱）、化晚类(藤碱、横柳碱、半边莲碱）、 异哇嘟类(小築碱、吗啡、粉防己碱）、吗I噪类(利血平、长春新碱、麦角新碱）、赏窘烧类(阿托 品、东赏窘碱）、咪挫类(毛果芸香碱）、哇挫酬类(常山碱）、嚷岭类（咖啡碱、茶碱）、酱体类 (茄碱、浙贝母碱、澳洲茄碱）、二祗类(乌头碱、飞燕草碱）、其它类(力烂他敏、雷公藤碱）。
[0003] 桑树在我国的栽培历史悠久，桑树种类、品种和种植面积位居世界首位。桑權是桑 树的成熟果实，桑權又叫桑果、桑泡儿，农人喜欢其成熟的鲜果食用，味甜汁多，是人们常食 的水果之一。桑權中的氮糖类化合物呈现弱碱性，运些生物碱类均具有良好的降血糖、降血 压等活性作用。1-脱氧野尻霉素(DNJ)是一种典型的桑生物碱，化学名称为3,4,5-S径基-2 径甲基四氨化晚，是桑叶中特有的天然活性成分，具有高效的药理活性，可用于治疗糖尿 病、肥胖症、病毒感染等功能。
[0004] 中国专利"从桑權中分离制备花色巧单体的方法，授权号CN100439384C"公开了采 用酸化乙醇浸提桑權中的花色巧。由于使用酸和乙醇作为提取剂，引入了杂质酸，虽然能实 现提取生物碱的功能，但是不能选择性提取，也不能在提取过程中进行纯化，反而引入了酸 为杂质。中国专利"一种桑權抗氧化多糖及其制备方法，申请号2014104733656"采用水提和 碱提相结合的方式进行提取，即先采用水提，得到部分多糖提取液，再对滤渣进行碱提，对 于生物碱的提取效率较低，不能选择性提取，也不能在提取过程中进行纯化，反而引入了碱 为杂质。因此，目前已有的提取方法不能实现选择性提取和纯化功能。
【发明内容】
[000引解决的技术问题:针对现有技术不能选择性高效提取桑權生物碱、提取过程中引 入杂质的不足，本发明提供了一种桑權生物碱的选择性提取方法，结合纤维素基盐和双水 相，建立了双相提取纯化的方法，提取的同时使生物碱得到纯化。
[0006]技术方案:本发明提供的一种桑權生物碱的选择性提取方法，包括如下步骤： (1) 将桑權洗净，阴干或者冷冻干燥控制水分含量^ 8%，粉碎得到桑權粉； (2) 浸提剂的制备:取纤维素粉，过100~200目筛子放入相蜗，置于管式炉中，氮气保护 400~500°C加热处理1~化，获得黑灰色固体，然后加入黑灰色固体质量1.5-2倍的发烟硫 酸，80°C加热处理化W上，用蒸馈水洗涂除去杂质，采用滤纸过滤除去固体，根据所需浸提 的桑甚质量，按照乙醇水溶液体积:桑甚质量=2-10ml: lg(v/w)的比例加入乙醇水溶液，得 到浸提剂； (3) 浸提：向步骤(1)所得的桑權粉中加入步骤(2)制得的浸提剂，所述桑權粉与浸提剂 的比例为lg:2-10ml(w/v)，50~80°C磁力揽拌1-化得到混合液，然后对混合液进行两次过 滤，第一次过滤采用孔径为0.5cm的筛网，第二次过滤采用滤纸或者孔径为0.45WI1的滤膜， 获得滤液； (4) 双相浸提:在步骤(3)所得滤液中加入硫酸锭，所述硫酸锭与滤液的比例为16-30g: 100mL(w/v)，磁力揽拌1-地，静置待分层，取颜色较深的生物碱层，透析除去杂质，得到生物 碱样品； 巧)调节生物碱样品的抑为8-9，用0.2WI1滤膜过滤，滤液加入到旋转蒸发器中，60-80°C 减压蒸馈，将提取液蒸发回收，蒸发器中产品在真空条件下-20~-40°C干燥，得到桑權生物 碱。
[0007] 步骤(2)所述纤维素为微晶纤维素;所述发烟硫酸中=氧化硫的质量分数为15~ 20〇/〇。
[0008] 步骤(2 )中所述乙醇水溶液中乙醇的体积分数为50~80%;步骤(2 )和(3 )所述滤纸 均为中速双圈定性滤纸。
【附图说明】
[0009] 图1为本发明工艺流程图； 图2为实施例1、2中获得的乙醇/硫酸锭双水相相图； 图3为实施例2中获得的双相提取系统图，其中A-上层水相、B-活性物质相。
【具体实施方式】
[0010] 下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但本发明的保护范围并不因此局限于 下述实施例，而是由本发明的说明书和权利要求书限定。
[00川实施例1 (1) 取微晶纤维素，过100目筛子； (2) 取100g微晶纤维素，加入5g氯化锋； (3) 获得的样品放入相蜗里，置于管式炉中，氮气保护500°C加热处理化，500ml蒸馈水 洗涂3次； (4) 取步骤(3)获得的样品，加入20%立氧化硫的发烟硫酸，80°C加热揽拌处理化，过滤 除去酸(硫酸可W重复使用），加入砂忍漏斗，蒸馈水洗涂直至检测不到硫酸根，过滤，加入 80%的乙醇50ml。
[0012]双相提取相图的考察 根据浊度法绘制乙醇/硫酸锭相图，硫酸锭浓度范围为16%-30%。，然后将乙醇滴加到反 应器中，每滴一滴均混合5分钟，当添加一滴乙醇使得混合物变浑浊时，表明第二相的存在， 再滴加一滴乙醇，发现浑浊变澄清。则开始浑浊的时候的点即为浊点，记录浊点时的水总 量，硫酸锭W及乙醇的含量，并按W下方程计算和绘制相图曲线。 (公式I)
(公式2) Wi和W2代表乙醇和硫酸锭的质量分数。虹、m2和m3分别代表乙醇，硫酸锭和水的添加量。 [0014] (5 )将20g桑權洗净，渐干水分，粉碎得至隱權粉； (6 )向步骤巧)桑權粉中加入100mL的浸提剂，50°C磁力揽拌化； (7)采用两次过滤，第一次过滤采用0.5cm筛