一种治疗肝癌的含银杏酚药物组合物的利记博彩app
【技术领域】
[0001] 本发明设及医药组合物技术领域，具体设及抗肝癌的药物组合物，尤其设及用顺 销和银杏酪联合作用来治疗肝癌和得到一系列抗肝癌的组合药物。
【背景技术】
[0002] 肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一，在恶性肿瘤死亡排序中占第2位。目前，肝癌的 治疗方法主要包括手术治疗、放射化疗、化学治疗和免疫治疗等。其中，手术治疗仍是各种 疗法中疗效最好的手段。但是，由于临床所见肝癌患者就诊时已进展至中晚期，能进行手术 切除的肝癌尚不足25% ;因此放疗和化疗仍是临床上治疗肝瘤的主要手段。顺销是临床上 常用的化疗药物，虽然疗效确切，但其在杀灭肿瘤细胞的同时对机体正常细胞也造成损伤， 引起机体免疫等多种功能的严重下降，剂量依赖的毒性很大，另外在治疗过程中也给患者 造成很大的痛苦，使顺销的使用受到一定的限制。如何减轻顺销的毒副作用、提高化疗效 果，减轻化疗给患者带来的痛苦，提高患者生存质量、延长生存周期，是肝癌综合治疗应该 解决的问题。因此，研究新一代低毒、高选择性、耐药性低的抗肝癌药物W及改进治疗方法 成为肝癌治疗的当务之急。
[0003] 中医自古W来对疾病的认识就是将人作为一个整体看待而进行施治，顾及疾病的 转变，"治此脏而顾他脏"，中医有"乙癸同源，肝肾同治"理论，而肝肾阴虚是原发性肝癌的 发病基础，并贯穿疾病发展全程，因此治疗上是共同进行、相互兼顾。中西医结合治疗肿瘤 的优势:可加入辅助治疗全程参与肿瘤治疗，减毒增效，防止复发和转移，扶正固本、提高免 疫力，从而达到提高疗效、减少不良反应的目的。因此，对化疗药物具有减毒增效、扶正固本 作用的中药逐渐成为中西医结合临床治疗肿瘤研究的热点。
[0004] 银杏(Ginkgo biloba L.)又称白果、公孙树，是我国特有的古老植物资源。其叶、 果均可入药，据《本草》记载，银杏作为药用已有六百多年的历史。银杏酪(ginkgols)也称白 果酪，是从中药银杏中分离得到的一种有效成分，其结构式I为：
[0006]在实验中，我们发现银杏酪在体外表现出良好的抑制肿瘤细胞增殖和迁移的作 用;连续作用十代，未使肿瘤细胞产生耐药性。采用腹腔注射给药形式，W不同剂量的银杏 酪治疗荷H22肝癌小鼠均可抑制实体瘤的生长(王云飞，杨小明，等.银杏酪对SMMC-7721肝 癌细胞和荷H22肝癌小鼠的抗癌作用.江苏大学学报医学版.2013，23(5): 233-237 . Xiao-Ming Yang,Yun-Fei Wang,Yue-Ying Li,Hai-Le Ma.Thermal stability of ginkgolic acids from Ginkgol biloba and the effects of ginkgol Cl?: Ion the apoptosis and migration of SMMC7721cells.Fitoterapia.2014,98,66-76.)D前期预实验发现，银 杏酪具有一定的增强免疫功能的作用;体外抗肿瘤实验结果也显示，银杏酪与顺销联合使 用可显著提高顺销对肿瘤细胞杀伤能力。如果在使用顺销的同时加入银杏酪，在确保同样 疗效的情况下减少顺销使用剂量，就有可能大大减缓顺销剂量依赖的毒副作用，达到减毒 增效的作用；同时银杏酪可W提高受药者的免疫功能，运无疑将大大促进中西医结合在肝 癌治疗上的进展。
[0007] 因此本发明考虑将银杏酪与顺销联合使用，应用于肝癌的治疗。到目前为止，尚未 见有银杏酪减轻顺销所致免疫抑制的文献报道。
【发明内容】
：
[0008] 本发明的目的是提供一种通过联合用药降低毒性、增强疗效的治疗肝癌的方法。
[0009] 本发明的另一个目的是提供一种具有抗肝癌活性并且毒性低的抑制肝癌的药物 组合物。
[0010] 本发明所提出的抗肝癌药物组合物，是由从中药银杏中得到的具有抗肝癌活性的 银杏酪与顺销组成。
[0011] 上述抗肝癌药物组合物中活性成分由银杏酪和顺销组成，银杏酪与顺销的质量比 为2~11:1。
[001^ 上述抗肝癌药物组合物中，活性成分银杏酪与顺销质量比为2:1、4:1时，为体外抗 肿瘤的最优药物组合，显示出协同抑制肝癌细胞生长作用。
[OOU]上述抗肝癌药物组合物中，活性成分银杏酪用量为10~40mg/kg体重，顺销用量为 3.75mg/kg体量。W蔽下接种肝癌细胞的昆明种小鼠为载体，给药的有效剂量在13.75~ 43.75mg/kg体重之间，用药方式为隔天腹腔注射，用药时间为10天。二者联合使用后不仅具 有协同抗肿瘤效果，而且降低了顺销在免疫方面的毒副作用。
[0014] 上述抗肝癌药物组合物可W直接在肝癌治疗中作为联合药物。
[0015] 本发明的抗肝癌药物组合物的组成成分可W同时、分开或顺序给药。
[0016] 本发明提供的抗肝癌药物制剂，W从中药银杏中得到的银杏酪为活性成分，并辅 W可接受的注射液如顺销组合而成。
【附图说明】
[0017] 图1显示了银杏酪的结构式。
[001引图2显示了不同浓度银杏酪对化pG2细胞生长的抑制作用。
[0019] 图3显示了顺销与不同浓度银杏酪联用对化pG2细胞生长的协同效应。
[0020] 图4显示了银杏酪和顺销治疗过程中对荷化PS小鼠移植瘤体积的影响。
[00川图5显示了银杏酪和顺销治疗对荷化PS小鼠血清中IFN-丫、IL-2、TNF-a因子水平 的影响。
【具体实施方式】
[0022] 通过如下实施例对本发明抗肝癌药物组合物的技术作进一步的描述：
[0023] 实施例1:
[0024] 该例阐述抗肝癌药物制剂中活性成分银杏酪的制备。
[0025] 实验材料:银杏外种皮采自江苏省镇江市，200-300目柱层析硅胶，及其它试剂均 购自上海化学试剂有限公司，分析纯，使用前未再进行处理。
[0026] 实验方法:称取干银杏外种皮100g粉碎，5倍量石油酸超声萃取S次，每次化，合并 提取液，挥去溶剂成石油酸浸膏。将浸膏W少量石油酸溶解后上样于硅胶柱（(63.2 X 40cm)，W石油酸：乙酸：甲酸= 89:11: l(v/v/v)洗脱，W薄层层析在254皿处出现巧光为检 ，收集银杏酸组分。
[0027] 取l.Og银杏酸和0.02g Ca(0H)2混于一个50ml的单颈烧瓶中，浸入135~140°C的 油浴中，揽拌反应2小时后，冷却至室溫，用3. Oml石油酸萃取；取W上得到的产物，溶于 4.5ml甲醇中，加25 %的氨水2.8ml，揽拌15min。溶液用己烧(4 X 2.8ml)萃取。有机层用5 % HCl (1.4ml)洗，再用1.4ml蒸馈水洗。滤液用无水化S〇4干燥，浓缩，得到银杏酪，于4°C保存 待使用。
[0028] 银杏酪可用少量DMSO溶解，W生理盐水稀释，顺销用生理盐水进行稀释，或按照适 当质量用量比（2~11:1)进行预混合。
[0029] 实施例2:
[0030] 该例验证银杏酪体外对化pG2细胞(人肝癌细胞株)生长的抑制作用
[0031] 实验材料:人肝癌细胞株化pG2购自中科院上海细胞库，由江苏大学医学院保存。 银杏酪同系物由本实验室自银杏外种皮中提取化PLC含量>95% ) ;DMEM细胞培养液、胎牛血 清购于Gibco公司；膜蛋白酶购自Invihogen公司；-20°C保存；嚷挫蓝(MTT)、Giemsa染料； 二甲基讽(简称DMSO)。
[0032] 实验方法:取对数生长期化pG2细胞，0.25 %膜蛋白酶消化，用DMEM完全培养液稀 释调整成5X IO4个/ml浓度的单细胞悬液，于96孔板中每孔加细胞悬液10化1，W无细胞的 完全培养液为空白组。置于37°C，5 % C02的细胞培养箱中，待细胞贴壁后，分别加入5、10、 20、40、8化g/ml的银杏酪培养2地，加入5mg/ml的MTT(用PBS稀释)溶液IOiil，继续避光培养 地，吸去培养液，每孔加入10化1 DMSO，水平摇床轻微震荡IOmin使结晶物充分溶解后，于酶 联免疫标记仪上测570nm处吸光度。每浓度设复孔6个，平行测定=次，W不用药物处理的细 胞为对照组，按照下式（1)计算抑制率，SPSS16.0软件计算ICso。
[0034] 数据处理方法:采用SPSS17.0软件系统进行数据分析，组间比较采用方差分析，数 据7 ± S表示，WP<〇. 05为有统计学意义。
[0035] 实验结果:见图2不同浓度银杏