一种用于治疗卵巢癌的秋蒿提取物及其制备方法与其应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药领域，具体设及一种用于防治卵巢癌的秋葛提取物及其制备方法 和其应用。
【背景技术】
[0002] 卵巢肿瘤为发生于女性卵巢上的肿瘤，且为妇科恶性肿瘤中死亡率最高的肿瘤。 近年来，卵巢恶性肿瘤的基础研究和临床诊治方面取得了很大的进展，但其5年生存率仍 不明显，徘徊在30%。
[0003] 卵巢癌的治疗方法包括西医治疗和中医治疗。其中，西医治疗包括手术、放疗、化 疗、生物治疗、免疫治疗等，但西药副作用强烈且药物成癒性非常之大；中医治疗则包括口 服给药（方剂、中成药、中药现代化提取物）、局部用药（贴、敷、灸）、食疗等，并作为肿瘤综 合治疗的一部分，具有独到之处，既可单独使用，而且非常适合一些年老体弱不适宜手术与 放化疗的卵巢癌患者，可与西医的手术、放化疗联合使用，既可W增强手术、放疗、化疗的效 果，又可W减轻其毒副作用，提高患者的机体免疫力。
[0004] 秋葛为菊科植物黄花葛的全草，异名：黄葛、臭葛、桐臭葛子、草葛（日华子本草）、 香丝草、酒饼草（广州植物志）、马尿葛、苦葛（贵州民间方药集）、黄香葛、野筒葛（江苏植 药志）、鸡風草（江西草药）、香苦草、野苦草。
[0005] 秋葛的拉下名为autumnus Artemisia,英文名为autumn artemisia，茎圆柱形，表 面浅栋色或灰栋色，有纵向棱线，质硬，折断面粗糖，中央有白色的髓，嫩枝具多数叶片，质 脆，易碎裂，花期8-10月，果期10-11月；秋葛的分布：生于荒野、山坡、路边及河岸边，分布 遍及全国（东半部省区分布在海拔1500米W下地区，西北及西南省区分布在2000-3000米 地区，西藏分布在3650米地区）；广布于欧洲、亚洲的溫带、寒溫带及亚热带地区，在欧洲的 中部、东部、南部及亚洲北部、中部、东部最多，向南延伸分布到地中海及非洲北部，亚洲南 部、西南部各国；另外还从亚洲北部迁入北美洲、并广布于加拿大及美国。模式标本采自苏 联西伯利亚地区。
[0006] 秋葛的采集：秋季割取，晒干或切段晒干；秋葛的药物部位：干燥全草，长约 60-100厘米，其果实（黄花葛子）亦可药用。
[0007] 吴静等（黄花葛的抑菌活性及有效成分的初步分离研究，西南大学硕±学位论 文，2008年）利用一系列溶剂对采自4月份黄花富植株的根、茎、叶部分（置于6(TC烘箱烘 干，小型粉碎机粉碎，过80目筛）分别进行常规室溫浸提、恒溫浸提、室溫揽拌提取和微波 辅助萃取，获得多种提取物，W比较不同提取方法对黄花富提取率的影响；选择合适、经济 的提取方法，并对7月份黄花富植株的根、茎、叶不同部位（置于60°C烘箱烘干，小型粉碎机 粉碎，过80目筛）分别用石油酸30-60°C (石油酸I)、石油酸60-90°C (石油酸II)、乙醇、 丙酬和水进行平行和顺序提取，比较不同植株部位和不同溶剂提取率的差异。但其并未明 确公开提取物中含有生物碱及其含量。
[0008] 周宇杰等（黄花葛杀蛾活性及有效成分的初步分离研究，西南大学硕±学位论 文，2006年）利用一系列平行和顺序溶剂石油酸、苯、乙酸、丙酬和水对黄花富叶、茎（置于 干燥箱内60°C烘干，家用粉碎机粉碎，过80目筛）进行室溫浸提、恒溫浸提、揽拌提取和索 氏提取，获得多种提取物，W比较不同提取方法对获取黄花富提取量的影响。但其并未明确 公开提取物中含有生物碱及其含量。
[0009] 王丽芳等（添加菊科植物黄花葛提取物对奶山羊乳中CLA含量影响及机理研究， 内蒙古农业大学博±学位论文，2010年）探讨了菊科植物黄花葛提取工艺条件及活性成分 的，55%乙醇、95°C和回流提取化为最佳提取工艺条件，测定的成分主要包括倍半祗类、芳 香族类、脂肪酸类、酱体类、=祗类、脂肪族类、生物碱类（2, 3, 5-=甲基-6-(2-甲基下基） 化嗦酷胺）等。但未公开生物碱的含量。
[0010] 王鸿博等（黄花葛的化学成分研究进展，现代药物与临床，2011年11月）研究了 黄花葛的化学成分中包含生物碱，生物碱主要为玉米素。刘海峰等（毛细管电泳间接激光 诱导巧光法测定苦葛和青葛中酸性成分，四川大学学报（工程科学版），2011年07月）研 究了苦葛的化学成分主要有生物碱。但其未公开生物碱的含量和提取工艺。许旭东等（抗 肿瘤药用植物有效成分研究概况，中国中药杂志，2008年09月）研究了生物碱类抗肿瘤成 分主要对卵巢癌、淋己癌和消化道系统癌如肝癌、结肠癌等有较显著的疗效。张新等（细胞 调亡与生物碱，黑龙江医学，2006年06月）研究了细胞调亡与卵巢癌等肿瘤疾病相关，细胞 调亡异常是肿瘤发生的一个重要环节，而许多生物碱可W诱导肿瘤细胞调亡。但其均未进 一步公开生物碱的种类。而已知生物碱的种类约在10000种，结构不同，性质各异。
[0011] 已有的提取方法（如煎煮法、超临界c〇2萃取法、回流法、浸溃法等）在保留有效成 分、去除无效成分方面存在着有效成分损失大、提取周期长、工序多、萃取率不高等缺点。并 且，选择对症药物为治疗卵巢癌的关键因素，而研制安全有效卵巢肿瘤治疗药物成为重要 的研究课题。
【发明内容】
[0012] 本发明的目的在于提供一种秋葛提取物的制备方法，其包括W下步骤：1)将秋葛 烘干后，将其粉碎至100~800目，制得秋葛粉；2)在4~25°C条件下，在秋葛粉中加入水， 浸泡1-1化后，超声提取10min-6h，其中，秋葛粉冰的质量体积比为1 :2-1 :15,制得秋葛 提取液；3)过滤，收集秋葛提取液，提取液经干燥，即得。
[0013] 本发明的优选技术方案中，所述秋葛烘干前经筛选、除杂处理。
[0014] 本发明的优选技术方案中，所述烘干溫度为30~80°C，优选为40-70°C，更优选为 55-65 °C。
[0015] 本发明的优选技术方案中，秋葛粉碎至150-700目，优选为250-650目，更优选为 450-600 目。
[0016] 本发明的优选技术方案中，所述超声提取溫度为10-24°C，优选为12-20°C。
[0017] 本发明的优选技术方案中，所述秋葛粉与水混合2-化，优选3-化，更优选4-化。 [001引本发明的优选技术方案中，秋葛粉与水的质量体积比为1:4-1:12,优选为 1:6-1:10,最优选为 1:7-1:8。
[0019] 本发明的优选技术方案中，所述水选自软水、蒸馈水、去离子水的任一种或其组 合。
[0020] 本发明的优选技术方案中，超声提取次数为1-6次，优选为2-5次，更优选为3-4 次。
[0021] 本发明的优选技术方案中，所述超声提取条件为，超声15-lOOmin，优选超声 25-80min，更优选超声35-60min，最优选超声40-50min。
[0022] 本发明的优选技术方案中，所述超声提取条件为，超声功率为200-1000W，优选为 300-900W，更优选为 400-750W，最优选为 500-650W。
[0023] 本发明的优选技术方案中，所述超声提取条件为，超声1-lOOs，间隙1-lOOs，优 选超声5-80S，间隙5-80S，更优选超声10-70S，间隙10-70S，最优选超声20-60S，间隙 20-60S。
[0024] 本发明的优选技术方案中，所述过滤依次为初滤、精滤、膜阻菌过滤，优选初 滤用100目筛网过滤，精滤使用生白布反复吸附过滤4-6次，膜阻菌过滤的孔径为 0. 22 ym-O. 45 jim〇
[00巧]本发明的优选技术方案中，所述干燥选自减压浓缩干燥、冷冻干燥或喷雾干燥的 任一种或其组合。
[0026] 本发明的优选技术方案中，所述提取物中有效成分包括12. 5%-25% (重量）生 物碱，优选所述有效成分包括15 %-20 % (重量）生物碱，更优选包括18 % (重量）生物 碱。
[0027] 本发明的另一目的在于提供一种本发明所述的制备方法获得的秋葛提取物。
[0028] 本发明的优选技术方案中，所述提取物为粉末，优选所述粉末为100 %全水溶性白 色结晶体。
[0029] 本发明的优选技术方案中，所述提取物中有效成分包括12. 5%-25% (重量）生 物碱，优选所述有效成分包括15 %-20 % (重量）生物碱，更优选包括18 % (重量）生物 碱。
[0030] 本发明的另一目的在于提供一种用于防治卵巢癌的药物组合物，所述药物组合物 由本发明所述的秋葛提取物和药学上可接受的载体组成。
[0031] 本发明的药物组合物采用本领域常规的制剂技术制备得到。
[0032] 本发明的优选技术方案中，所述的药物组合物选自口服制剂、外用制剂、肠溶口服 制剂的任一种。
[0033] 本发明的优选技术方案中，所述的口服制剂选自片剂、胶囊剂、颗粒剂、粉剂、口服 液、混悬液、丸剂、散剂、滴丸、糖浆剂、合剂、露剂、泡腾剂、糊剂、乳剂、茶剂的任一种或其肠 溶制剂。
[0034] 本发明的优选技术方案中，所述的肠溶口服制剂选自肠溶片剂、肠溶胶囊剂、肠溶 颗粒剂、肠溶粉剂、肠溶口服液、肠溶混悬液、肠溶丸剂、肠溶散剂、肠溶滴丸、肠溶糖浆剂、 肠溶合剂、肠溶露剂、肠溶泡腾剂、肠溶糊剂、肠溶乳剂、肠溶茶剂的任一种。
[0035] 本发明所述的药学上可接受的载体为本领域熟知用于制备上述制剂的常用赋形 剂或辅料。口服制剂或外用制剂常用的赋形剂或辅料包括但不仅限于填充剂（又称稀释 剂）、润