一种肠胃外注射用肽药物的稳定制剂及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及肽药物技术领域，尤其涉及一种肠胃外注射用肽药物的稳定制剂及其制备方法。
【背景技术】
[0002]糖尿病是现代社会中的严重健康问题。胰岛素对于I型和II型糖尿病都是关键的治疗剂。过去二十年的研究证实通过使用胰岛素对葡萄糖的严格代谢控制不仅降低了发生率，而且延迟患有I型和II型糖尿病的人的并发症的发展。不幸地，实现严格葡萄糖控制所需要的密集的胰岛素治疗带来低血糖症或“低血糖”风险的显著增加。
[0003]低血糖症的症状在患者之间有很大不同，但是一般包括震颤、心悸、易激动、焦虑、神经质、饥饿、心动过速、头痛和苍白。一旦血糖恢复到正常水平，症状一般就会消退。如果低血糖症没有逆转，血糖的进一步降低会导致中枢神经系统中与神经低糖症状，例如难以集中精神、口齿不清、视力模糊、体温降低、行为改变以及如果未治疗导致的失去知觉、癫痫甚至死亡。
[0004]通常，低血糖症有以下类型:较轻的至中等的低血糖症:患者可以自我治疗，不管症状的严重程度，其中血糖水平低于70mg/dL(3.9毫摩尔/升)或任何无症状的血糖浓度。严重的低血糖症:患者不能自我治疗而需要外部帮助。一般地，神经低糖症状和认知损伤在血糖水平大约为50mg/dL(2.8毫摩尔/升)时开始。较轻至中等的低血糖症的大部分发作可以通过摄取快速作用的糖类例如葡萄糖片或食物(果汁、软饮料或甜的零食)相对容易地自我治疗。按照定义，严重的低血糖症不能自我治疗，从而需要外部介入。如果患者可以吞咽并且是合作的，那么适合使用凝胶剂或产品例如蜂蜜或果冻放置到面颊内部。如果患者不能吞咽，那么使用皮下或肌内注射的胰高血糖素来治疗严重的低血糖症。
[0005]胰高血糖素是天然存在的29个氨基酸长并由胰腺的a细胞分泌的肽激素。胰高血糖素的主要功能是通过糖原分解和糖原异生两者维持葡萄糖产生，主要由肝介导。胰高血糖素是主要的胰岛素反调节激素，并用作糖尿病的患者的严重低血糖症的一线治疗剂。
[0006]已经进行了许多尝试以开发用于治疗紧急情况下的严重低血糖症的胰高血糖素救护药物。当前，目前可用的有两种胰高血糖素试剂盒，由Eli Lilly (Glucagon EmergencyKit)和Novo Nordisk(GlucaGen HypoKit)制造。两种产品都将冷冻干燥的胰高血糖素的小瓶与预装满水稀释液的注射器组合。冷冻干燥的胰高血糖素必须采用复杂步骤来重构，因此在紧急情况下难以使用。这些产品还提供大体积注射，这是因为胰高血糖素难溶于水。最近，已经有尝试改进胰高血糖素在水溶液中的稳定性，以开发更稳定的胰高血糖素类似物和/或改进经粉末注射的胰高血糖素的递送。
[0007]尽管已经取得了一些进展，但是仍然需要用于治疗紧急情况下的严重低血糖症的胰高血糖素救护药物，实现用户友好操作。这种胰高血糖素救护药物会需要由糖尿病患者和/或其照顾者连续携带，从而会需要在非冷冻温度(25_30°C )下是长时间(>2年)稳定性。理想地，其还会需要对于普通人群易于施用，并且在施用于低血糖症患者之前不需要过多的处理或重构。胰高血糖素救护药物还会需要在一定温度范围内，包括从0°c至30°C的温度范围内可以使用。
[0008]W02012/122535公开了一种肠胃外注射用肽药物的稳定制剂，包含:(a)肽或其盐，其中所述肽已经被干燥在非挥发性缓冲剂中，并且其中干燥的肽具有约等于所述肽在所述非挥发性缓冲剂中的PH的pH记忆；和(b)非质子极性溶剂；其中所述制剂的水分含量小于5%，并且其中当在所述非质子极性溶剂中重构所述干燥的肽时，所述干燥的肽保持约等于所述肽在所述非挥发性缓冲剂中的PH的所述pH记忆。所述肠胃外注射用肽药物的稳定制剂适合紧急情况下严重的低血糖症的应用，但是其肠胃外注射用肽药物的稳定制剂虽然能够迅速提升胰高血糖素的血液浓度，但是其在血液中的浓度迅速降低，一般半小时内胰高血糖素的浓度就降低到注射前的水平，不能较长时间的持续较高浓度。
【发明内容】
[0009]针对现有技术的缺陷，本发明人在W02012/122535的基础上，经过深入研究发现以二甲基亚砜和乙酸乙酯的混合物作为非质子极性溶剂能够取得较好的效果。
[0010]本发明提供以下方案:
[0011]本发明提供一种肠胃外注射用肽药物的稳定制剂，包括:在非挥发性缓冲剂中干燥并保持在所述非挥发性缓冲剂中的PH记忆的肽或其盐；和二甲基亚砜和乙酸乙酯的混合物；其中所述制剂的水分含量小于5%，并且其中当在所述混合物中重构所述干燥的肽时，所述干燥的肽保持在所述非挥发性缓冲剂中的PH记忆。
[0012]优选地，所述二甲基亚砜和乙酸乙酯的混合物中，二甲基亚砜和乙酸乙酯的体积比为(1-3): (1-3)，优选 1:1。
[0013]优选地，所述肽具有的pH记忆为2-8，优选3-7，更优选4_6。
[0014]优选地，所述肽在所述制剂中存在的浓度为0.5mg/mL至100mg/mL,优选2mg/mL至50mg/mLo
[0015]优选地，所述非挥发性缓冲剂选自甘氨酸缓冲剂、柠檬酸盐缓冲剂、磷酸盐缓冲剂及它们的混合物。
[0016]优选地，所述肽或其盐选自胰高血糖素、普兰林肽、胰岛素、亮丙瑞林、LHRH激动剂、甲状旁腺素、糊精、肉毒杆菌毒素、淀粉样肽、缩胆囊素、芋螺毒素、胃抑制肽、胰岛素样生长因子、生长激素释放因子、抗微生物因子、格拉默、胰高血糖素样肽-1、胰高血糖素样肽-1激动剂、艾塞那肽或它们的混合物，优选胰高血糖素。
[0017]优选地，所述制剂还包含共溶剂，其中所述共溶剂选自乙醇、丙二醇、甘油及它们的混合物。其中，所述共溶剂在所述制剂中的存在量为10% (w/v)-50% (w/v。
[0018]优选地，所述制剂还包含稳定化赋形剂，其中所述稳定化赋形剂选自糖、淀粉或它们的混合物；其中，所述稳定化赋形剂在所述制剂中的存在量为1% (w/v)-40% (w/v) 0
[0019]本发明还提供一种上述方案所述的稳定制剂的制备方法，包括:
[0020](I)将肽或其盐溶于非挥发性缓冲剂中，然后干燥成干燥的肽粉，其中所述干燥的肽粉具有所述肽在所述非挥发性缓冲剂中的PH记忆；和
[0021](2)在二甲基亚砜和乙酸乙酯的混合物中重构所述干燥的肽粉；
[0022]其中所述制剂的水分含量小于5%，并且其中当在所述混合物中重构所述干燥的肽时，所述干燥的肽保持在所述非挥发性缓冲剂中的PH记忆。
[0023]优选地，所述二甲基亚砜和乙酸乙酯的混合物中，二甲基亚砜和乙酸乙酯的体积比为(1-3): (1-3)，优选 1:1。
[0024]优选地，所述肽具有的pH记忆为2-8，优选3-7，更优选4_6。
[0025]优选地，所述肽在所述制剂中存在的浓度为0.5mg/mL至100mg/mL,优选2mg/mL至50mg/mLo
[0026]作为本发明的优选实施方案，所述方法包括:
[0027](I)将肽或其盐溶于非挥发性缓冲剂中，然后干燥成干燥的肽粉，其中所述干燥的肽粉具有所述肽在所述非挥发性缓冲剂中的PH记忆；
[0028](2)在二甲基亚砜和乙酸乙酯的混合物中重构所述干燥的肽粉；
[0029]其中所述制剂的水分含量小于5%，并且其中当在所述混合物中重构所述干燥的肽时，所述干燥的肽保持在所述非挥发性缓冲剂中的PH记忆；和
[0030](3)加入选自乙醇、丙二醇、甘油及它们的混合物的共溶剂和选自糖、淀粉或它们的混合物的稳定化赋形剂。
[0031]本发明的有益效果为:
[0032]在本发明的制剂中胰高血糖素是稳定化的，使得能够长期存储和/或长时间递送。同样地，本发明的胰高血糖素制剂在非冷冻温度下长时间稳定，易于施用而不需要重构，以及在一定温度范围内，包括从0°C至30°C的温度范围内可以使用。更重要的是，本发明的制剂通过肠胃外注射后能够维持较长时间的胰高血糖素的高浓度，通过肠胃外注射后胰高血糖素的浓度在5分钟内迅速升至峰值，30分钟时还能维持峰值浓度的一半以上，45分钟时还未完全降至注射前的水平，因此相比W02012/122535