银线草醇d在制备治疗肝癌药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于化工领域及医药领域，涉及银线草醇D在制备抗肝癌药物中的应用。【背景技术】
[0002] 原发性肝脏恶性肿瘤起源于肝脏的上皮或间叶组织，前者称为原发性肝癌，是我 国高发的，危害极大的恶性肿瘤。继发性或称转移性肝癌系指全身多个器官起源的恶性肿 瘤侵犯至肝脏。一般多见于胃、胆道、膜腺、结直肠、卵巢、子宫、肺、乳腺等器官恶性肿瘤的 肝转移。
[0003] 肝脏是人体最大的实质性器官，承担人体的各类重要代谢功能，因此，肝脏一旦出 现恶性肿瘤将导致未及生命的严重后果。又由于肝脏具有丰富的血流供应，与人体的重要 结构如下腔静脉、n静脉、胆道系统等关系密切；肝脏恶性肿瘤发病隐匿，侵袭性生长快速， 其治疗甚为困难。
[0004] 目前，治疗方法包括手术、肝动脉结扎、肝动脉化疗栓塞、射频、冷冻、激光、微波W 及化疗和放射治疗等方法。生物治疗，中医中药治疗肝癌也多有应用。目前肝癌的治疗W 手术为首，送是因为放疗和化疗的副作用。许多化疗药物对正常细胞也有杀伤作用，导致患 者自身免疫系统在治疗过程中收到较大损伤。副作用较少的药物凤毛麟角，因此寻找新的 候选化合物是肝癌预防和治疗的重要课题。
[0005] 银线草为金粟兰科植物银线草烟iloranthusJaponi州SSieb)的全草或根及根 茎。倍半聰类化合物是金粟兰科植物中比较重要的一类化合物，在整个金粟兰科植物中均 有分布，具有消炎解疫、抑制微生物等生物活性。银线草中得到半聰类化合物结构复杂其骨 架可分为按叶焼型、环按焼型、吉马焼型、富蒲焼型等数种类型，同时它们具有内醋、丽、醇、 多聚体等多种形式。
[0006] 银线草全株供药用，具有巧湿散寒、活血止痛、散癒解毒之功效。民间验方有许多 有关银线草的记载，如银线草外敷可治疗疮巧、妍癖、无名肿毒、蛇咬伤、乳腺炎等疾病。
[0007]Kaw油ata等1990年首次从银线草中分离出了 1个由2个环按型倍半聰内醋聚合 而成的二聚体化合物，命名为银线草醇A(shizukaolA)，在1992年从银线草中分离得到了 3个由2个环按型倍半聰内醋聚合而成的二聚体化合物，命名为银线草醇B-D(shizukaol B-D)。
[0008] 申请号为200910095051. 6、申请日为20091013、名称为"乌药焼型二聚倍半聰类 化合物，其制备方法及其在制药中的应用"的中国发明专利申请中详细阐述了银线草醇D 的制备方法，并且表明银线草醇D能够明显增加L6细胞葡萄糖的消耗量，提示其能够促进 膜岛素的作用，促进糖的摄取和转运。
[0009] 银线草醇D，英文名为aiiz址aolD，CASNo. ;142279-42-3。银线草醇D是天然产 物，生物利用度较高、性质较稳定，具有临床使用价值。随着人们对此类化合物的化学和生 物学研究的深入，其分子作用机制将逐步明确，送将进一步推动此类化合物的化学结构修 饰和构效关系研究，并有助于提高此类化合物的药用价值。
【发明内容】
[0010] 本发明的目的是提供银线草醇D的药物用途。
[0011] 本发明提供了银线草醇D在制备抗肝癌药物中的应用，所述的银线草醇D抑制或 者延缓肝癌细胞迁移。
[0012] 本发明所述的肝癌物药物制成针剂或者片剂。
[0013] 本发明所述的肿瘤来源于smmc-7721、SK-h巧1、HepG2、QGY、H巧3B或者FOCUS细 胞。
[0014] 本发明中，所述的抗肝癌药物可W是银线草醇D和其他治疗肝癌药物的组合物。 例如，所述的其他治疗肝癌药物是索拉菲尼。
[0015]另一方面，本发明提供将银线草醇D加入体外培养的肿瘤细胞的培养液中，抑制 该肿瘤细胞的迁移和生长的方法；
[0016] 其中，体外培养的肿瘤细胞的培养液中，加入的银线草醇D的药物浓度大于0且 小于 50ymol/L。
[0017] 一般而言，加入银线草醇D的终浓度为1-100iiM。例如，1-5uM，1-10uM， 5-10yM，1-20yM，5-30yM，1-60yM，5-90yM，10-40yM，1-50yM，5-60yM，15-25yM, 5-50yM，15-60yM，25-40yM，5-40yM，等等。较好的，银线草醇D的药物浓度小于 20ymol/L。
[001引本发明的一个实施例中采用的肝癌细胞是SMMC-7721。
[0019] 本发明所述的小分子化合物可W采用各种常规的制备方法制备。例如，采用人工 化学合成的方法。
[0020] W本发明的银线草醇D为例，可W将其与合适的药学上可接受的载体联用。送类 药物组合物含有治疗有效量的化合物和药学上可接受的载体或赋形剂。送类载体包括（但 并不限于）：盐水、缓冲液、葡萄糖、水、甘油、己醇、及其组合。药物制剂应与给药方式相匹 配。本发明的银线草醇D可W被制成针剂形式，例如用生理盐水或含有葡萄糖和其他辅剂 的水溶液通过常规方法进行制备。诸如片剂和胶囊之类的药物组合物，可通过常规方法进 行制备。药物组合物如针剂、溶液、片剂和胶囊宜在无菌条件下制造。活性成分的给药量是 治疗有效量，例如每天约1微克/千克体重-约5毫克/千克体重。此外，本发明的银线草 醇D还可与其他治疗剂一起使用。
[0021] 当本发明的银线草醇D被用作药物时，可将治疗有效剂量的银线草醇D施用于哺 乳动物，其中该治疗有效剂量通常至少约10微克/千克体重，而且在大多数情况下不超过 约8毫克/千克体重，较佳地该剂量是约10微克/千克体重-约1毫克/千克体重。当然， 具体剂量还应考虑给药途径、病人健康状况等因素，送些都是熟练医师技能范围之内的。
[0022] 本发明提供了银线草醇D在制备抗肿瘤药物中的应用，尤其是银线草醇D在制备 能够明显抑制肝癌细胞的迁移抗肿瘤药物中的应用。肿瘤的发生是由于细胞增殖与分化的 异常；侵袭和转移是肿瘤的另一特征；肿瘤细胞较正常细胞有着更强的变形和运动能力。 本发明实验结果的生长曲线表明，银线草醇D能够抑制肿瘤细胞的增殖；用划痕试验检测 细胞的迁移能力，结果显示，划痕24h后，肿瘤细胞SMMC-7721和FOCUS细胞较未加入银线 草醇D的阴性对照组迁移速度减缓，说明银线草醇D能明显抑制细胞的迁移能力。银线草 醇D具有抑制细胞的增殖及迁移能力，可W作为治疗肝癌药物的先导化合物。
[0023] 本发明的小分子化合物银线草醇D是天然产物，绿色环保，副作用较小。可作为新 的抗肿瘤药物或者其辅助成分进行开发，为治疗和治愈肿瘤提供新的途径和手段。
【附图说明】
[0024] 图1是化CUS细胞划痕结果图，
[0025] 其中，加药与未加药组，划痕的宽度分别为562和546微米，经过24小时，划痕的 宽度变为分别是424和518微米；
[002引如图1所示，10微摩银线草醇D处理48小时后的化CUS细胞，与未加药的对照组 相比，细胞迁移速度明显减慢，细胞密度明显较低，因而划痕愈合也较慢。
[0027] 图2是SMMC-7721的划痕宽度统计柱状图，
[0028] 其中，纵坐标是划痕的宽度，单位为微米；
[0029] 与未加药的对照组相比，10微摩银线草醇D处理48小时后的SMMC-7721细胞，24 小时后划痕宽度减小较慢。
【具体实施方式】
[0030] 本发明实施例中，采用的实验方法：
[00引]1.细胞复苏
[0032] 1)从液氮罐中取出冻存管，直接投入37C温水中，并不时摇动令其尽快融化。
[003引。从371：水浴中