一种冬虫夏草口服液的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属于植物活性成分提取技术领域，特别涉及一种冬虫夏草口服液的制备方法。
【背景技术】
[0002]冬虫夏草又名虫草，冬虫草，夏草冬虫等，是我国独有的珍贵特产。根据分类系统，冬虫夏草属真菌门(Eumycota)、子囊菌亚门(Ascomycotina)、核菌纲(Pyrenomycrees)、麦角菌科(Clavicipitaceae)、虫草属(Cordyceps)，为一种寄生于鳞翅目昆虫蝙蝠蛾幼虫中所形成的虫生真菌，也是一种名贵的药用真菌。
[0003]冬虫夏草作为药用资源，在我国由来已久。对于虫草的认识，我国可追溯到公元前11世纪西周至秦朝。从出土的文物中就发现有以虫草作图案的玉雕饰品。1578年成书的《本草纲目》中记载有雪蚕，根据其生活史、性味功效、形态、环境及产地判断，应当是冬虫夏草的古名。在1694年清朝汪昂的《本草备要》中也有关于冬虫夏草的论述，该书记载:“冬虫夏草，甘平，保肺益肾，止血化痰，止劳咳。四川嘉定府所产者佳。冬在土中形如老蚕，有毛能动，至夏则毛出土上，连身倶化成草”，这是冬虫夏草的最早文字记载。吴仪洛(1757)在《本草从新》中第一次详尽地记载了冬虫夏草及其药用。赵学敏(1765)著的《本草纲目拾遗》把它的药用归之为“能治诸虚百损”。在中华医药百味中，虫草正是以“治诸虚百损”、“阴阳平衡”、“保肺益肾、补精益气、专补命门”的神奇功效被认为是一种不可多得的中药之宝而蜚声华夏，饮誉海外，与人参、鹿茸齐名，共称为中国的三大补品。冬虫夏草为我国传统的滋补强壮药。现代药理研究表明，冬虫夏草对免疫及血液系统的调节，肾脏、肝脏、心脏损伤的保护和防治，以及抗衰老，抗应激作用等均有很好的活性。临床上用于治疗心血管疾病、呼吸系统疾病、性功能障碍、肾功能衰竭、肝脏疾病、肿瘤等系统疾病，均取得了较好的疗效。
[0004]目前，工业化生产中国被毛孢，主要选取的是菌丝体，而发酵液均被废弃，这样一方面要进行废液处理，另外也造成了虫草宝贵资源的流失。因而开掘这类资源，不仅可以提高企业和产品的附加值，降低成本，同时也可变废为宝，化害为利，是生物资源可持续利用之路，将会取得更大的经济效益和社会效益。而且实验室前期试验发现，中国被毛孢发酵液具有一定的镇静催眠作用，这就为发酵液的进一步研究开发提供了理论基础。当前也见到有关发明专利研究冬虫夏草发酵液浓缩后开发成口服液，但由于成分单一，药理活性不够，应用范围受到限制。
[0005]随着社会竞争的日益激烈，人们生活节奏不断加快，由于饮食习惯、工作压力、睡眠质量下降等因素引起的亚健康人群也由老年人进一步扩展到中年人，甚至是青少年人群。因此，国民身体健康问题势在必行。
【发明内容】
[0006]本发明的目的在于克服上述现有技术中存在的缺点与不足，提供一种冬虫夏草口服液的制备方法。本发明将冬虫夏草发酵液和药材成分混合加工成的一种冬虫夏草口服液产品；旨在解决虫草类的产品形式单调，缺乏具有滋肝益肾、提高免疫等多重保健功能的虫草类口服液的问题。
[0007]本发明的目的通过下述技术方案实现:一种冬虫夏草口服液的制备方法，包括以下步骤:
[0008](I)中国被毛孢固体菌种的制备；
[0009](2)液体种子制备；
[0010](3)发酵罐发酵；
[0011](4)铁皮石斛、西洋参、枸杞子、甘草和大枣药材超微粉碎；
[0012](5)冬虫夏草发酵醪液和药材粉混合、均质、酶解；
[0013](6)酶解液经过陶瓷膜过滤，反渗透膜浓缩、无菌灌装即可得到红棕色冬虫夏草口服液。
[0014]作为本发明的一优化方案，步骤(I)中所述的中国被毛孢固体菌种的制备，具体步骤如下:固体培养基采用蝙蝠蛾幼虫I?3份，柞蚕蛹4?8份、桑蚕蛹I?3份，将原料按照质量比混合后采用组织破碎仪破碎、匀浆，得到的料液，所述料液和鲜牛奶、水按照体积比为1:1:1混合后的物料中加入质量分数2%的琼脂粉，置入大三角瓶中，于121°C灭菌15min?20min后，与超净工作台趁热采用高速分散器分散，分散后的液体分装入10ml广口三角瓶中，每瓶分装40ml液体，冷却至室温，接入中国被毛孢固体种子，每瓶接入2?3块0.2m2的中国被毛孢固体菌种块，18°C暗培养10?20d，获得中国被毛孢固体菌种。
[0015]步骤⑴中所述的趁热为温度80°C以上。
[0016]作为本发明的一优化方案，步骤(2)中所述的液体种子制备，具体步骤如下:液体种子培养基采用柞蚕蛹4?8份、桑蚕蛹I?3份，将原料混合后采用组织破碎仪破碎、匀浆，得到的料液，所得料液和鲜牛奶、水按照体积比为1:1:5?10的比例混合后，在每升混合液中加入5?1g复合氨基酸、5?20g麦芽粉，白砂糖10?30g，混勾后的液体分装入100ml广口三角瓶中，每瓶分装400ml液体，冷却至室温，接入中国被毛孢固体种子，每瓶接入2?3m2的中国被毛孢固体菌种块，无菌条件下捣碎后接入三角瓶，接入18°C暗培养7?10d，获得液体种子。
[0017]作为本发明的一优化方案，步骤(3)所述的发酵罐发酵，具体步骤如下:液体发酵培养基采用柞蚕蛹4?8份、桑蚕蛹I?3份，将原料混合后采用组织破碎仪破碎、匀浆，得到的料液，所得的料液和鲜牛奶、水按照体积比为1: 1:5?10的比例混合后，在每升混合液中加入5?1g复合氨基酸、5?20g麦芽粉，白砂糖10?30g，混勾后的液体分装入气升式发酵罐，以容积为1000L气升式发酵罐为例，发酵罐装液量为500?700L、罐压为0.03?0.08Mpa、通气量为体积比1:0.9(V/V)、温度18?22°C，避光发酵7d，可得到冬虫夏草发酵醪液。
[0018]作为本发明的一优化方案，步骤⑷中所述的铁皮石斛、西洋参、枸杞子、甘草和大枣药材超微粉碎，具体步骤如下:将铁皮石斛I?2份、西洋参I?2份、枸杞子I?2、甘草I?2、大枣2?5份，混合后粗粉碎后进一步超微粉碎；使物料直径< 1um ;获得药材粉。
[0019]作为本发明的一优化方案，步骤(5)中所述的冬虫夏草发酵醪液和药材粉混合、均质、酶解，具体步骤为:将步骤(3)中获得的冬虫夏草发酵醪液和步骤(4)中获得的药材粉按照20?50:1的质量比混匀，采用高剪切均质机均质后加入纤维素酶和淀粉酶，其中纤维素酶的加入量为60?100U/g、淀粉酶的加入量为100?300U/g，50°C的温度条件下对物料恒温振荡酶解I?2h，酶解后，物料升温到80°C保持lOmin。
[0020]作为本发明的一优化方案，步骤￠)中所述的酶解液经过陶瓷膜过滤，反渗透膜浓缩、无菌灌装，具体步骤为:将步骤(5)中保温后的料液采用0.45um的陶瓷膜过滤澄清处理后，经反渗透膜浓缩为原体积的1/2、无菌灌装，即得红棕色的冬虫夏草口服液。
[0021]综上所述，本发明的冬虫夏草口服液的制备方法，具体包括以下步骤:
[0022](I)中国被毛孢固体菌种的制备:固体培养基采用蝙蝠蛾幼虫I?3份，柞蚕蛹4?8份、桑蚕蛹I?3份，将原料按照质量比混合后采用组织破碎仪破碎、匀浆，得到的料液，所述料液和鲜牛奶、水按照体积比为1:1:1混合后的物料中加入质量分数2%的琼脂粉，置入大三角瓶中，于121°C灭菌15min?20min后，与超净工作台趁80°C以上高温