Dpp4抑制剂在防治辐射诱导骨髓抑制药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及DPP4抑制剂在药学领域中的应用。更具体的说是DPP4抑制剂在制备 防治辐射诱导骨髓抑制药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 机体暴露于外界物理化学及体内代谢产生的各种有害因素，如暴露于辐射或某些 化学毒物，以及临床接受放疗、化疗的患者。造血系统由少量骨髓造血干细胞及不同发育时 期不同系列的造血细胞组成，对各种有害因素非常敏感，受到损伤后会出现不同程度的抑 制，表现为外周血白细胞降低、骨髓增殖功能下降甚至发生再生障碍性贫血，对患者的生存 质量造成严重的危害甚至危及生命。
[0003] 目前临床上对出现骨髓抑制多是采用加强营养或给与各种生长因子增加造血细 胞的增殖。另外一些具有抗氧化损伤作用的化合物或中药制剂。药物种类很多，多是联合 应用，单独评价时疗效不很确定，还会有各种副作用的产生，如生长因子类，使用造价也比 较昂贵。
[0004] DPP-4于1966年由Hopsu-Havu和Glenner在鼠肝脏组织匀楽过程中发现，分子 量为liokd，是丝氨酸蛋白酶家族中的一种，分布于细胞表面，含有766个氨基酸，其三维晶 体结构在2003年由Rasmussen等确认。DPP-4分为两种形式，一种是在二型细胞表面表达 (CD26)，另一种为可溶性分子，缺少细胞内和转膜结构域。细胞表面和可溶性的DPP-4均具 有酶活性，DPP-4的活性部分是Asp - His - Ser节段。DPP-4的活性体为二聚体，每个亚单 位包含两个结构域，凡是结构的N端为Xaa-Pro-或者Xaa-Ala-的多肽都是DPP-4发挥活 性的主要底物。
[0005] DPP4发现在血清/血浆、脑脊髓液、关节液和精液中存在，而具有跨膜结构的DPP4 则在多种组织的内皮和表皮细胞中表达，包括骨髓细胞，血管静脉端、胃肠道、肝脏、胰腺、 肺、肾脏、前列腺等。此外，DPP4还在胚胎干细胞，造血干细胞，造血祖细胞以及其他多种成 熟血细t胞中表达。
[0006] 迄今，世界范围内已上市7个DPP-4抑制剂：西格列汀（sitagliptin)、维格 列汀嘲（vildagliptin)、沙格列汀（saxagliptin)、阿格列汀（alogliptin)、利格列汀 (linagliptin)、吉格列汀州（gemigliptin)和替格列汀（teneligliptin。其中，西格列 汀、维格列汀和沙格列汀已在我国上市，阿格列汀和利格列汀已在我国提出临床申请，吉格 列汀在我国则由LG Life Sciences授权双鹤制药开发。这些DPP-4抑制剂主要作为治疗 2型糖尿病的口服降糖药物，通过抑制活性GLP-I的降解失活，提高其浓度，增强其生理作 用，促进β细胞胰岛素的分泌、抑制仪细胞的胰高血糖素分泌，改善胰岛功能的紊乱，同时 没有增加体重和低血糖的风险，不良反应少见。
[0007] 尽管多种DPP4抑制剂已经作为临床二型糖尿病的治疗药物，但是其在临床造血 疾病应用还鲜有报道。近期，DPP4在造血系统的功能引起了巨大的关注。通过diprotin A(ILE-PRO-ILE)或者VAL-PYR等小多肽分子抑制HSPC上DPP4的活性，进而通过提高细胞 对趋化因子CXCL12的趋化性，提高HSPC的归巢和植入能力。DPP4剪切后的CXCL12虽然 缺失了趋化功能，但是却能够抑制全长CXCL12发挥作用。Broxmeyer等人的研究发现接受 DPP4剪切后的细胞因子无论是在体内还是体外，其促进造血细胞的增殖能力都大幅下降， 并会降低其相应全长因子的活性。Christopherson等人证实DPP4在G-CSF动员小鼠造血 祖细胞中起介导作用，而随后进一步证实DPP4在小鼠造血干细胞归巢和植入中起调节作 用。
[0008] 本发明人在实验中首次发现：DPP4抑制剂在防治骨髓抑制中具有明显的治疗作 用，特别是防治辐射诱导骨髓抑制更加明显，基于上述的发现经过进一步试验从而完成了 本发明。
【发明内容】
[0009] 本发明要解决的技术问题是寻找能够保护辐射诱导骨髓细胞和功能的损伤得到 防治与治疗的药物。
[0010] 因此，本发明的一个目的在提供DPP4抑制剂在制备预防或治疗辐射诱导骨髓抑 制药物中的应用。
[0011] 本发明的另一个目的在于提供DPP4抑制剂与其他营养物质、促进骨髓细胞增殖 药物混合制成组合物，降低放疗所带来的毒副作用。
[0012] 为解决上述问题，本发明提供如下的技术方案：
[0013] -种DPP4抑制剂在制备预防辐射诱导骨髓抑制药物中的应用。实施方式是：DPP4 抑制剂在制备防治辐射诱导骨髓损伤药物中的应用。所述的辐射诱导骨髓损伤，包括：接受 放射治疗的肿瘤患者、辐射暴露的工作人员、意外辐射性同位素暴露的人员。
[0014] 本发明所述骨髓抑制（骨髓抑制性死亡），包括外周血白细胞下降、骨髓增生不良 或再生障碍性贫血。
[0015] 本发明进一步公开了含有DPP4抑制剂的药物组合物，它是将治疗有效量的DPP4 抑制剂与药学上可接受的药用辅料混合制成组合物。
[0016] 本发明更进一步公开了含有DPP4抑制剂与其它营养物质、促进骨髓细胞增殖药 物或抗肿瘤药物的组合物，其中包括临床各种剂型的治疗药物、预防药物及保健食品等等。 它是将DPP4抑制剂与其他营养物质、促进骨髓细胞增殖药物混合制成组合物。
[0017] 本发明所述的其他营养物质包括：其他的氨基酸营养液、维生素、葡萄糖、脂肪乳、 离子等。
[0018] 本发明所述促进骨髓细胞增殖的药物包括：各种中药制剂如多糖类（枸杞、银耳、 党参、黄芪、人参多糖等）、生物碱类（小檗碱、苦参总碱等）、皂甙类（人参皂甙、黄芪甙 等）及其他如六味地黄口服液等升白中药制剂；人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（rHuGM- CSF)、升白欣、肌苷、左旋咪唑、三株口服液、康力龙等。
[0019] 本发明所述的DPP4抑制剂与药学上可接受的药用辅料混合制成各种药物组合 物，包括：片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、滴丸剂、预乳剂、微乳剂、混悬剂、糖浆剂、各种肠溶制 剂或注射剂制剂等等。各制剂可以根据常规的工艺制备而成。在制备成药剂时可以加入 药学上可接受的辅料，所述的药学上可接受的辅料，包括制剂中常规的稀释剂、填充剂（如 甘露醇、乳糖、聚乙二醇），粘合剂（淀粉、微晶纤维素），崩解剂（如羧甲基纤维素、低取 代的羟丙基纤维素），润滑剂（如滑石粉、硬脂酸镁），湿润剂（如丙二醇、乙醇），稳定剂 (EDTA-2Na、硫代硫酸钠、焦亚硫酸钠、亚硫酸钠、乙醇胺、碳酸氢钠）等等。
[0020] 当DPP4抑制剂与药学上可接受的药用辅料混合组成药物组合物时，组合物中含 有的活性成份DPP4抑制剂的量可以根据患者的病情、医生诊断的情况特定的加以应用，所 用DPP4抑制剂的量或浓度在一个较宽的范围内调节，通常DPP4抑制剂的量范围为组合物 的0.5%~90% (重量）。另一优选的范围为0.5%-70%。再一优选的范围为3%-50%。
[0021] 本发明所述的DPP4抑制剂与其他营养物质、促进骨髓细胞增殖药物混合制成药 物组合物或DPP4抑制剂作为支持药物与抗肿瘤药物配合使用。一般使用常规的技术，与制 剂学上可接受的固体或液体载体结合，以及使之任意地与制剂学上可接受的辅助剂和赋形 剂结合制备成微粒或微球。固体剂型包括片剂、分散颗粒、胶囊、缓释片、缓释微丸等等。固 体载体可以是至少一种物质，其可以充当稀释剂、香味剂、增溶剂、润滑剂、悬浮剂、粘合剂、 崩解剂以及包裹剂。惰性固体载体包括磷酸镁、硬脂酸镁、滑粉糖、乳糖、果胶、丙二醇、聚山 梨酯80、糊精、淀粉、明胶、纤维素类物质例如甲基纤维素、微晶纤维素、低熔点石蜡、聚乙二 醇、甘露醇、可可脂等。液体剂型包括溶剂、悬浮液例如注射剂、粉针剂等等。
[0022] 本发明对辐射诱导骨髓抑制的试验内容主要包括以下几个方面：
[0023] I. DPP4抑制剂对体外照射的骨髓细胞损伤具有保护作用。
[0024] 2. DPP4抑制剂对接受全身照射的小鼠骨髓细胞功能损伤具有保护作用。
[0025] 3. DPP4抑制剂对机体没有损伤。
[0026] 下面通过药效学实验进一步说明DPP4抑制剂在预防或治疗辐射、化学毒物诱导 骨髓抑制作用的药理实验情况。
[0027] -、实验方法
[0028] 1、骨髓单个核细胞分离