包含阴离子性高分子的抗癌药吸附能力得到提高的生物降解性微珠及其的制备方法
【专利说明】包含阴离子性高分子的抗癌药吸附能力得到提高的生物降 解性微珠及其的制备方法 【技术领域】
[0001] 本发明涉及抗癌药吸附能力得到提高的生物降解性微珠及其制备方法以及利用 其的癌症的治疗方法。 【【背景技术】】
[0002] 最近，随着影像技术发展，可查找隐藏于体内的癌症发生的准确的位置，并利用放 射线照射、内窥镜手术等多种方法来去除癌。但是，即使准确地发现癌症发生的位置，也因 癌扩散到整个器官，或与其他器官贴在一起的情况等多种理由而具有不能以手术方式去除 癌症的情况。在肝癌、胰腺癌等的情况下，即使被发现，大部分也不能以手术方式根治。
[0003] 当前，作为在肝肿瘤的治疗中施行最多的手术的化疗栓塞（TACE，Transaterial Chemoembolization)是查找向肝肿瘤供给营养的动脉，并将抗癌药给药之后，堵塞血管的 治疗法。肝组织可通过绕出小肠及大肠等的门静脉（portal vein)和从大动脉直接出来的 肝动脉接收氧和营养，而正常的肝组织主要从门静脉接收血液，肿瘤组织主要从肝动脉接 收血液。因此，若将抗癌药给药到向肿瘤供给营养的肝动脉，并堵塞血管，则可在防止正常 的肝组织受损的情况下，选择性地仅使肿瘤坏死。这种治疗法没有根据癌症的进展程度的 限制，从而适用范围广，且治疗对象的限制少等优点多，因而该治疗法是当前对肝癌治疗率 的提高做出最大的贡献的方法。在化疗栓塞中，先向位于腹股沟的大腿动脉插入导管来接 近于肝动脉之后，注射血管造影剂来得到肿瘤的位置、大小及血液供给方面等治疗所需的 信息，若制定治疗方针，则向导管插入粗度约为1mm左右的管，来查找作为靶的动脉，从而 进行手术。
[0004] 当前，代表性地，在临床上最普遍使用利用碘油（Lipiodol)的肝栓塞法，利用上 述肝栓塞法的专利技术相关报告也相当多。因碘油作为组成成分含有大量的碘，从而具有 可实现电子计算机断层扫描（CT)影像的优点，进而提供手术的便利性。但是，存在如下缺 点：为了装载阿霉素（Doxorubicin)，需要在手术之前以振荡的方式混合溶解有药物的注 射液和油相的阿霉素。并且，据临床报告，在手术之后溶解于水相的阿霉素无法累积于肝癌 部位，并迅速逃脱到全身的血液中，从而不仅无法得到充分的抗癌效果，而且患者的副作用 也相当。
[0005] 在美国专利7442385号中记述如下方法：在对聚乙稀醇（PVA，poly vinyl alcohol)进行交联来制备微小的颗粒后，借助电引力来使作为抗癌药的阿霉素吸附于珠 的表面，从而传递到肝癌部位，进而同时实现持续的抗癌药的放出和栓塞效果。为此，在聚 乙烯醇的交联过程中，可使作为阴离子性单体的2-丙烯酰胺基-2-甲基-1-丙烷-磺酸 (AMPS，2-acrylamid〇-2-methyl-1-propane_sulfonic acid)与交联末端以共价键方式形 成来改性聚合物，从而吸附阿霉素之类的阳离子性药物。但是，利用聚乙烯醇的肝栓塞存在 如下问题：由于交联的聚乙烯醇未在体内分解，因而在肝肿瘤坏死后，聚乙烯醇珠有可能在 体内以不特定的方式扩散从而引起炎症，或更担忧的是，沿着血管向其他器官扩散从而引 起脑血栓等。因此，需要能够同时实现作为可改善这种问题的抗癌载体的功能和血管栓塞 功能的药物载体。
[0006] 本说明书全文中，参照了多篇论文及专利文献，并表示了其引用。所引用的论文及 专利文献的公开内容全部插入于本说明书作为参照，从而更加明确说明本发明所属的技术 领域的水平及本发明的内容。 【
【发明内容】
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[0007] 【要解决的问题】
[0008] 本发明人为了开发如下微珠的制备方法而研宄努力，解决以往的癌局部治疗用微 珠所具有的、未在生物体内分解的问题，可将更多的量的抗癌药吸附于微珠，且制备工序简 单，从而具有经济性。并且，本发明人为了更坚固地制备包含阴离子性高分子的微珠而研宄 努力。最终，制备由白蛋白和具有硫酸盐基的生物相容性阴离子性高分子酰胺结合而成的 结合物，并对将其乳化而制备的微小的气泡进行交联来制备交联结合有白蛋白的微珠，从 而完成了本发明。
[0009] 因此，本发明的目的在于，提供抗癌药吸附能力得到提高的生物降解性微珠。
[0010] 本发明的再一目的在于，提供抗癌药吸附能力得到提高的生物降解性微珠的制备 方法。
[0011] 本发明的另一目的在于，提供将上述生物降解性微珠进行给药来治疗癌症的方 法。
[0012] 本发明的其他目的及优点可通过以下发明的详细说明、发明要求保护范围及附图 会更加明确。
[0013] 【解决问题的手段】
[0014] 根据本发明的一实施方式，本发明提供抗癌药吸附能力得到提高的生物降解性微 珠，其特征在于，包含由白蛋白和阴离子性高分子酰胺结合而成的白蛋白-阴离子性高分 子结合物（conjugate)，上述阴离子性高分子具有生物相容性，并具有硫酸盐基、胺基或羧 基，上述白蛋白通过交联结合而形成。
[0015] 本发明人为了开发如下微珠的制备方法而研宄努力，解决以往的癌局部治疗用微 珠所具有的、未在生物体内分解的问题，可将更多的量的抗癌药吸附于微珠，且制备工序简 单，从而具有经济性。并且，本发明人为了更坚固地制备包含阴离子性高分子的微珠而研宄 努力。最终，制备由白蛋白和具有硫酸盐基的生物相容性阴离子性高分子酰胺结合而成的 结合物，并对将其乳化而制备的微小的气泡进行交联来制备交联结合有白蛋白的微珠。
[0016] 根据本发明的一实例，上述生物降解性微珠还包含借助与上述阴离子性高分子的 静电引力来吸附于生物降解性微珠的表面的抗癌药。
[0017] 在一特定例中，上述抗癌药为蒽环（Anthracycline)类抗癌药。上述蒽环 类抗癌药例如有阿霉素、柔红霉素（Daunorubicin)、表阿霉素（Epirubicin)、伊达 比星（Idarubicin)、吉西他滨（Gemcitabine)、米托蒽醌（Mitoxantrone)、吡柔比星 (Pirarubicin)及戊柔比星（Valrubicin)等。
[0018] 在另一特定例中，上述抗癌药为伊立替康（Irinotecan)。
[0019] 根据本发明的一实例，本发明的微珠为用于治疗实体癌的化疗栓塞用珠。
[0020] 在一特定例中，本发明的微珠为肝癌化疗栓塞（肝动脉栓塞）用珠。除了 肝癌治疗之外，作为可适用的实体癌，可列举通过直肠动脉治疗直肠细胞癌的方法 (K.Tsuchiya, Urology. Apr ；55 (4):495-500(2000))〇
[0021 ] 本发明的微珠作为组成成分包含白蛋白及与上述白蛋白酰胺结合的生物相容性 阴离子性高分子。上述白蛋白与阴离子性高分子的羧基或胺基进行酰胺结合，并交联结合 而呈微珠的形态，并起到维持的载体作用。上述阴离子性高分子与白蛋白的胺基或羧基进 行酰胺结合，并起到使抗癌药吸附于珠的表面的作用。上述白蛋白及阴离子性高分子均作 为生物相容性高分子物质，可在体内分解，因而可解决以往利用聚乙烯醇的珠所具有的、因 未在体内分解而产生的问题，例如，可解决因聚乙烯醇不特定地扩散从而引起炎症，或沿着 血管向其他器官扩散从而引起脑血栓等的问题。
[0022] 在本说明书中所使用的术语"生物降解性"是指当露出于生理溶液 (physiological solution)时可分解的性质，例如意味着在包括人类的哺乳动物的生物体 内可借助体液或微生物等来分解的性质。
[0023] 根据本发明的一实例，上述白蛋白作为广泛分布于生物细胞或体液中的蛋白质， 包含动物白蛋白及植物白蛋白。
[0024] 在一特定例中，上述动物白蛋白包含卵白蛋白、血清白蛋白、乳白蛋白及肌浆蛋 白，上述植物白蛋白包含麦清蛋白（大麦种子）、豆清蛋白（豌豆）及蓖麻蛋白（蓖麻种 子）。上述白蛋白还包含白蛋白的变异体。
[0025] 根据本发明的一实例，上述生物相容性阴离子性高分子包含糖胺聚糖 (glycosaminoglycan)类高分子。
[0026] 在一特定例中，上述糖胺类高分子选自由硫酸软骨素 （chondroitin sulfate)、硫 酸皮肤素 （dermatan sulfate)、硫酸乙酰肝素 （heparan sulfate)、肝素（heparin)、硫酸角 质素 （keratan sulfate)及透明质酸（hyaluronan)组成的组中。
[0027] 根据本发明的一实例，上述白蛋白的交联利用热交联来进行。
[0028] 根据本发明的另一实例，上述白蛋白的交联利用醛类交联剂来进行。在一特定例 中，上述醛类交联剂选自由戊二醛、甲醛（formaldehyde)、二醛淀粉（dialdehyde starch)、 丁二酸酸（succinic acid aldehyde)、丙稀酸（acrylaldehyde)、乙二酸（oxalaldehyde)、 2-甲基丙稀醛（2-methyl acrylaldehyde)及2-氧代丙醛（2-oxopropanal)组成的