一种治疗肝纤维化的鳄鱼甲提取物及其应用
【技术领域】
:
[0001]本发明属于中药领域，涉及一种治疗肝纤维化的中药提取物及其应用。
【背景技术】
:
肝纤维化(Hepatic fibrosis，HF)是由多种慢性致病因素(炎症、酒精、寄生虫、中毒、代谢障碍、血液循环障碍、营养障碍等)作用于肝脏引起的肝内结缔组织异常增生，ECM(extea cellular matrix)细胞外基质过度沉积的共同病理过程，致病因子引起肝脏氧化应激反应和细胞因子的产生是肝纤维化发生的始动环节。肝纤维化是慢性肝病向肝硬化发展的早期和必经阶段，在一定情况下可以逆转，但若病因持续存在，肝纤维化逐渐加重，肝小叶及血管等逐渐被改建，肝脏正常结构遭到破坏，导致相应器官功能障碍与衰竭，将严重危害生命健康。因此，减缓、阻止和逆转肝纤维化是慢性肝病的重要治疗措施。
鳄鱼是脊索动物门爬行纲鳄目动物的通称，我国古代称鳄鱼为“鼍龙”，又名鉈鱼(《神农本草经》)、土龙(《续博物志》)。鳄鱼作为药用动物，早在南北朝时期的《本草经集注》就有对鳄鱼甲的记载:“味辛，微温。……主心腹症瘕、伏坚、积聚、寒热，女子崩中下血五色，小腹阴中相隐痛，疮疥死肌。”《名医别录》称其“有毒，……主五邪涕泣时惊，腰中重痛，小儿气癃，眦溃。”《本草拾遗》称鼍甲“主恶疮，腹内症瘕”，“炙烧浸酒，主瘰疬，杀虫，瘘疮，风顽疥瘙”。《本草纲目》“鳞部”第四十三卷详细的记载了“鼍龙”，称其甲味辛，性温，有破血逐瘀、消肿生肌之功效。《中华本草》曾经记载扬子鳄的甲片，有消积、化瘀杀虫的功能，主治心腹症瘕积聚，崩中带下，疮疥、恶疮，肠风痔疾。
现代医学研宄证明，鳄鱼全身都是宝，鳄鱼肉、骨、甲及内脏含有丰富的优良蛋白质和人体必需的氨基酸、不饱和脂肪酸、维他命及各种微量元素。然而，以鳄鱼甲为原料治疗肝纤维化的研宄成果，迄今为止，尚未见有相关报道。
【发明内容】
:
本发明的目的，是提供一种治疗肝纤维化的中药提取物及其应用，所述中药提取物是指鳄鱼甲经水煎煮提取、浓缩、干燥制备成的鳄鱼甲提取物。所述提取物含有大量的骨胶原、蛋白质、钙、磷等成分。
本发明提供所述鳄鱼甲提取物的制备方法。
本发明还提供所述鳄鱼甲提取物在治疗肝纤维化中的应用。
本发明还提供以所述鳄鱼甲提取物为有效成分与要学上可接受的载体组成的药物组合物。
本发明还提供所述药物组合物在治疗肝纤维化中的应用。
近年来，本发明人为了解和验证鳄鱼甲提取物对肝纤维化的治疗作用，曾用鳄鱼甲提取物对动物进行了药效学实验研宄，结果证明:鳄鱼甲提取物具有降低肝纤维化模型小鼠的血清转氨酶、减轻小鼠肝脏胶原纤维沉积程度、改善肝纤维化模型小鼠肝脏炎性及纤维化病理变化，具有预防和治疗肝纤维化病理变化，延缓慢性肝病向肝硬化发展进程的作用，可望将其用于开发制备防治肝纤维化的药物。
本发明所述治疗肝纤维化的中药提取物的制备方法包括如下步骤:取鳄鱼甲，加10倍量水浸泡I小时，煎煮I小时，过滤，滤液另器储存，药渣再加8倍量水，煎煮I小时，过滤，滤液与前次滤液合并，低温减压蒸馏滤液，浓缩至比重1.20的稠膏，冷冻干燥，得到鳄鱼甲提取物。
本发明所述中药提取物的剂型可以是多种制剂，优选为口服制剂。
本发明提供了所述中药提取物在制备防治肝纤维化药物中的应用。为此，选择应用广泛的四氯化碳(carbon tetrachloride，CC14)，腹腔注射，诱导构建小鼠肝纤维化模型，采用鳄鱼甲提取物低剂量组生药0.675g/kg(体质量)、中剂量组生药1.35g/kg(体质量)、高剂量组生药2.7g/kg(体质量)治疗用药，观察鳄鱼甲提取物对小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)等生化指标和肝组织羟脯氨酸(HYP)含量的影响，并通过肝组织病理切片观察肝脏病理变化。结果表明:鳄鱼甲提取物能显著降低小鼠血清中AST、ALT活性，降低TBIL、HYP含量，使肝组织变性明显减轻。所以说，鳄鱼甲提取物对四氯化碳致小鼠肝纤维化有显著的保护作用。
【附图说明】
:
图1-本发明的中药组合物对CCl4肝纤维化模型小鼠的血清谷草转氨酶活性的影响图2-本发明的中药组合物对CCl4肝纤维化模型小鼠的血清谷丙转氨酶活性的影响图3-为本发明的中药组合物对CCl4肝纤维化模型小鼠的肝组织羟脯氨酸含量的影响图4-本发明的中药组合物对CCl4肝纤维化模型小鼠的肝脏病理变化的影响图5-本发明的中药组合物对CCl4肝纤维化模型小鼠的肝脏胶原沉积的影响图中:N-表示正常组；M-表示模型组；低-表示鳄鱼甲提取物小鼠按生药0.675g/kg剂量；中-表示鳄鱼甲提取物小鼠按生药1.35g/kg剂量；高-表示鳄鱼甲提取物小鼠按生药
2.7g/kg剂量；P-表示阳性对照组，小鼠按100mg/kg剂量用水飞蓟素。
【具体实施方式】
:
为使本发明的技术方案便于理解，以下结合具体实施例对本发明作进一步的说明。这些实施例应理解为仅用于说明本发明而不是限制本发明的保护范围。在阅读了本发明的内容后，本领域技术人员可以对本发明作各种修订或改动，这些等效变化和修饰同样落入本发明权利要求书所限定的范围。
为完成实施例的必要条件:
1、实验材料 1.1、仪器
电热恒温振荡水槽(DKZ-450B，上海森信)；四联磁力搅拌机(HJ-4，江苏金坛)；pH 计(PB-10, sartorius)，电子天平(BS 224S, sartorius);焚光倒置显微镜(EclipseTE2000-U, Nikon);酶标仪(DNM-9602，北京普朗);高压灭菌锅(DSX-280B，上海申安)；软蜡(熔点52°C -54°C )、硬蜡(56°C -58°C )购自上海华永石蜡有限公司);石蜡切片机(Leica，德国)；
1.2、药物与试剂鳄鱼甲提取物(5g/ml，本发明制备)；水飞蓟素胶囊(140mg/粒，产品批号:B1101617，德国马博士大药厂)；苏木素伊红(HE)染色试剂盒购自碧云天生物技术研宄所；血清总胆红素TBIL、谷丙转氨酶ALT (赖氏法)、谷草转氨酶AST (赖氏法)检测试剂盒均购自南京建成生物工程研宄所；羟脯氨酸Hyp (消