虎杖苷在制备抗心律失常产品中的用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及中药材的活性成份在临床中的应用，主要涉及一种中药提取物即虎杖 苷（piceid, polydatin)在制备抗心律失常产品、特别是在制备抗心肌梗死所致心律失常 产品中的用途。
【背景技术】
[0002] 1、心律失常
[0003] 心律失常是由于窦房结激动异常或激动产生于窦房结以外，激动的传导缓慢、阻 滞或经异常通道传导，即心脏活动的起源和（或）传导障碍导致心脏搏动的频率和（或）节 律异常。心律失常是心血管疾病中重要的一组疾病。它可单独发病亦可与心血管病伴发。 可突然发作而致猝死，亦可持续累及心脏而衰竭。
[0004] 心肌梗死是一种常见的心血管疾病，其可并发不同类型的心律失常。心肌梗死 (又名心肌梗塞）是冠状动脉闭塞，会引起血流中断，使部分心肌因严重的持久性缺血而发 生局部坏死。心肌梗死导致死亡的主要原因之一，就是致死性心律失常。在心肌梗死病程 演变及各种治疗手段应用过程中，均可并发不同类型的心律失常。其中，由缺血引起的瞬时 外向钾电流（It 0)功能异常和室壁异质性增加是导致室性心律失常的重要原因，而由此引 起的获得性长Q-T间期综合症，更是引起心源性猝死的一个独立危险因素。
[0005] 心肌梗死后出现的心律失常主要是由于心脏电生理重构引起的。目前观点一致认 为，心肌缺血引起心室肌复极化离子通道ItO的亚基（Kv4. 2、Kv4. 3)表达下调，使Ito电流 密度降低，通过延长心肌细胞动作电位，引起长QT间期综合症，从而导致室性心律失常的 发生。
[0006] ItO去极化早期被激活，其表达和功能出现异常。其特点主要是：1)再灌注区功 能上可恢复的心肌细胞越多，心率失常发生率越高。2)缺血心肌数量多，缺血程度重、再灌 注速度快，心率失常的发生率就高。3)心率失常以室性心率失常居多。
[0007] 目前临床上使用和开发的抗心律失常药物根据对心肌电生理的影响和作用机制 分类，可分为四大类：I类是钠通道阻滞剂，然而可产生严重的窦性心动过缓、房室传导阻 滞、QRS波增宽诱发新的尖端扭转性室性心律失常等副作用。II类是β受体阻滞剂，其副 作用为严重低血压，并且也有延长Q-T间期的作用。III类是选择性延长心肌细胞动作电位 时程（APD)和有效不应期（ERP)的药物，选择性阻滞心肌钾离子通道的药物，具有和I类药 物相似的副作用。IV类是钙通道阻滞剂。I、II、IV类药物均有降低传导速度甚至引起传导 阻滞的作用，这些作用可增加折返激动的可能性，而诱发心律失常。III类药物对自律性无明 显影响。
[0008] 2、虎杖
[0009] 虎杖，产于东亚地区，分布在日本北海道西部以南的地区、朝鲜半岛、台湾及中国 的江苏、江西、山东、四川等地。味微苦，性微寒，含虎杖苷，黄酮等。本发明中所使用之虎 杖苷可以以常规方法提取，例如公开号为CN1546503A(公开日2004年11月17日）的专 利中所披露的提取方法。本发明中所使用的虎杖苷水溶液以常规方法配制，例如公开号为 CN1709269A(公开日2005年12月21日）的专利中披露的方法。配制的浓度为6-150mg/ ml，优选浓度为20-100mg/ml，最优选浓度为40mg/ml。
[0010] 近年来人们发现虎杖具有良好的临床应用前景，已逐渐成为新的研宄热点。在祖 国的传统医药治疗中，中药由于取自于天然植物，毒副作用少，往往具有多个作用靶点，而 且在机体自稳调控中具有"高者抑之，下者举之；有馀者损之，不足者补之"之奥妙。
[0011] 虎杖苷是虎杖中提取的一种单体，它是白藜芦醇与葡萄糖结合的产物，它们均属 于虎杖成分中的芪类化合物，即羟基二苯乙烯类化合物。虎杖苷心血管方面的药理研宄进 展包括：
[0012] 1)虎杖苷心肌细胞保护作用。虎杖苷被发现可明显减轻小鼠心肌组织病毒感染损 害（宋军华，滨州医学院学报2008, 31:95-98)。国内学者报道虎杖苷具有抗氧化、抗炎等 类似白藜芦醇的功能，以及改善失血性休克引起的心功能和微循环障碍的作用（河北医药 2010, 32:1492-1493 ;ClinHemorheolMicrocirc. 2003, 29:211-217)。目前，虎杖苷注射液在 国内目前处于IIb期临床人体研宄阶段，IIb期临床人体研宄进展顺利。国内现在通行的 常用剂量为50-40mg/kg。
[0013] 2)虎杖苷抗动脉粥样硬化。实验表明，虎杖苷可以显著降低家兔动脉粥样 硬化模型的血脂，并且可以缓解主动脉和冠状动脉粥样硬化病程。（中国中医急症， 2005, 14:564-567)虎杖苷亦能降低颈动脉不稳定板块的软斑数量，可能有抗动脉硬化的作 用（北京中医药，2009, 28172-175)。
[0014] 3)虎杖苷抗血栓形成。虎杖苷在体内外都有抑制花生四烯酸、二磷酸腺苷和肾上 腺素诱导的兔血小板聚集作用，且抑制强度随着虎杖苷浓度的降低而减弱（单春文，中国 药理学报，1990, 11(6) :527)。
【发明内容】
[0015] 目前来说，所有抗心律失常药物均有致心律失常作用，其发生率为6%~36%，其 机制与心电冲动形成或传导障碍有关。除心肌梗死损伤后易出现长Q-T间期综合症，在各 种致长Q-T间期综合症的药物中，抗心律失常药物却最常出现该副作用。本发明的目的，是 应用虎杖苷治疗心律失常，可显著降低延长的Q-T间期，减少心律失常的发生。
[0016] 本发明包括：
[0017] 虎杖苷在制备抗心律失常产品中的用途。所述心律失常是由心肌梗死引起。
[0018] 虎杖苷在制备抑制长Q-T间期综合症产品中的用途。所述长Q-T间期由心肌梗死 引起。
[0019] 虎杖苷在制备用于增加 Ito通道蛋白表达产品中的用途。所述Ito通道蛋白为 Kv4. 2、Kv4. 3和Kchip中的一种或多种。
[0020] 虎杖苷在低剂量（20mg/kg)条件下具有抑制心肌梗死引起心律失常作用。
[0021] 上述产品包括药物、试剂或食品中的一种，其使用方式包括单独使用或与其它化 学物质联合使用。
[0022] 本发明的技术效果如下：
[0023] 1、在众多治疗心律失常药物中选取一种高效、价格低廉、并且安全的中药，该中药 (虎杖苷）可以上调瞬时外向钾电流，通过缩短动作电位时程（APD)，来发挥抗心律失常的 作用。虎杖苷能特别地用于治疗心肌梗死引起的心律失常。
[0024] 2、提供一种抑制长Q-T间期综合症的高效、价格低廉、并且安全的中药，该中药 (虎杖苷）通过对心肌细胞膜钾离子通道的调节，调节心肌细胞AP的复极过程，缩短APD， 抑制长QT间期综合症的发生。
[0025] 3、提供一种显著增加 Ito通道的蛋白表达的高效、价格低廉、并且安全的中药，该 中药（虎杖苷）对心肌细胞膜瞬间外向钾电流（Ito)电流有抑制作用，显著增加 Ito通道 的蛋白表达。
[0026] 4、提供了一种新的低剂量浓度，20mg/kg，具有抗心律失常作用。
【附图说明】
[0027] 图1为表示Ito亚基Kv4. 2和Kchip的蛋白表达的电泳图。
【具体实施方式】
[0028] 1.材料和方法
[0029] I. 1 材料
[0030] 1)试剂本发明中所使用之虎杖苷由深圳市海王药业公司提供，
[0031] 具体提取方法如下：
[0032] 虎杖根茎100g,适当粉碎，以800ml乙醇渗滤提取，过滤，减压浓缩 (50°C，0. 07-0.1 Mpa)至终体积50ml，加入100mL水，并以200ml乙酸乙醇萃取3次，萃取 液减压浓缩（50°C，0. 07-0.1 Mpa)至150ml，聚酰胺粉搅拌，减压挥干溶剂，作为上样样品备 用。
[0033] 上样样品采用干法上样于备用聚酰胺柱上（柱体约600ml)，依次以1000 ml水、 3000ml30%乙醇水为流动相进行层析洗脱，流速600ml/hr，收集30%乙醇水洗脱流出液， 并将其中含虎杖苷流份合并，减压浓缩至100mL (60°C ,0.07-0.1 Mpa)，抽滤，得出产物2g， 其中虎杖苷含量为84%。
[0034] 初产物以95-100 %乙醇溶解，过滤，滤液加水至含醇终浓度30%，加入1% (ml/ ml)药用活性炭粉煮沸3分钟，趁热过滤，滤液减压浓缩至50ml，4°C下静置0. 5小时析晶， 过滤，所得晶体真空干燥4小时（100°C，0. 08-0.1 Mpa，五氧化二磷干燥剂），得终产物虎杖 苷I. 5g，经HPLC检测含虎杖苷99. 82 %