免疫调节缀合物的利记博彩app
【专利说明】免疫调节缀合物 发明领域
[0001] 本发明涉及包含与至少一种免疫调节剂缀合的甘露糖的碳水化合物聚合物、其制 备以及在免疫调节组合物和疫苗组合物中的用途。
[0002] 发明背景
[0003] 近年来主要致力于发现通过刺激免疫系统的某些关键方面以及通过抑制某些其 它方面起作用的新的药物化合物。本文被称为免疫调节剂的这些化合物可以适用于治疗多 种多样的疾病和病状。例如，某些免疫调节剂可以适用于治疗病毒性疾病（例如，人乳头瘤 病毒、肝炎、疱瘆）、瘤形成（例如，基底细胞癌、鳞状细胞癌、光化性角化症、黑色素瘤）、以 及Th2-介导的疾病（例如，哮喘、过敏性鼻炎、特应性皮炎、多发性硬化症），并且还适用作 疫苗佐剂。
[0004] 甘露糖的一些多糖（碳水化合物聚合物）（例如，甘露聚糖）、β (1，3)葡萄糖（例 如，葡聚糖）、β (1，4)乙酰化甘露糖（乙酰吗喃）、β (1，4) N-乙酰基-葡糖胺（壳聚糖） 以及杂多糖如鼠李糖聚半乳糖醛酸聚糖（rhamnogalacturonan)(果胶）已经显示出刺激免 疫系统。
[0005] 多糖与C-型凝集素受体的结合诱导免疫刺激，如通过吞噬作用、增殖应答、细胞 因子的释放以及免疫系统的其它活性的增加所显示的。由于这种免疫刺激活性，这些多糖 已经被建议用于疫苗组合物中。特别感兴趣的是甘露聚糖。
[0006] 甘露聚糖是由C-型凝集素受体如甘露糖受体（CD206)和DC-SIGN(CD209)识别的 聚甘露糖。由于它们在抗原呈递细胞上的存在，已经针对这些受体摄取含有甘露糖、岩藻糖 或葡萄糖的化合物对它们进行了表征。甘露聚糖与甘露糖受体的结合例如诱导内吞作用， 接着是其递送至胞内体（endosomal)途径中。关于甘露糖化抗原的早期研宄指示抗原上甘 露糖残基的存在大大增强了树突细胞（DC)的抗原摄取和主要组织相容性复合体（MHC)II 类限制性抗原呈递。甘露聚糖与至少一种抗原的缀合也增强它的摄取和呈递。
[0007] 需要用于疾病的治疗或预防的其它免疫调节组合物和疫苗组合物以及用于其制 备的可靠方法。此外，鉴于免疫调节剂的较大治疗潜力，并且尽管已经进行的工作，仍然存 在相当大的持续的需要来扩展它们的用途和治疗益处。
[0008] 发明概述
[0009] 本发明人已经开发了用于刺激免疫应答的新化合物。
[0010] 第一方面，本发明提供一种包含碳水化合物聚合物的免疫调节化合物，所述碳水 化合物聚合物包含甘露糖，其中所述碳水化合物聚合物与至少一种免疫调节剂缀合。
[0011] 在一个实施方案中，存在多于一种免疫调节剂，并且每种免疫调节剂是相同的或 不同的。例如，碳水化合物聚合物包含可以与免疫调节剂直接缀合或经由接头缀合的多于 一个官能团。可替代地或另外地，碳水化合物聚合物经由分支接头与多于一种免疫调节剂 缀合。
[0012] 在一个实施方案中，碳水化合物聚合物大于约lOOOkDa。
[0013] 在一个实施方案中，碳水化合物聚合物是氧化的。氧化的碳水化合物聚合物在与 免疫调节剂缀合之前可以具有至少150个醛基。
[0014] 在一个实施方案中，氧化的碳水化合物聚合物进一步与至少一种抗原或编码所述 至少一种抗原的核酸缀合。抗原可以来自任何来源，如病毒的、细菌的、原生动物的、真菌 的、肿瘤抗原、自身抗原或过敏原。抗原可以是例如整个生物体、蛋白质或抗原肽。抗原可以 与氧化的甘露聚糖任选地经由接头直接地缀合；或任选地经由接头通过与免疫调节剂缀合 来与氧化的甘露聚糖间接地缀合。类似地，核酸可以与氧化的甘露聚糖（经由，例如，IRM) 直接地或间接地缀合。
[0015] 在一个实施方案中，氧化的碳水化合物聚合物与至少一种抗原共价地缀合。
[0016] 在一个实施方案中，氧化的碳水化合物聚合物经由聚阳离子与至少一种核酸缀 合。
[0017] 在一个实施方案中，碳水化合物聚合物是甘露聚糖。甘露聚糖可以来自任何来源， 如真菌，更优选地酵母。
[0018] 在一个实施方案中，在与免疫调节剂和/或抗原或编码所述抗原的核酸缀合之前 并且在用氨基萘-1，3, 6-三磺酸（ANTS)标记之后，甘露聚糖的大小分布基于蛋白质标准是 在约150至约250kDa之间和/或基于碳水化合物标准是在约800至约3000kDa之间。
[0019] 在一个实施方案中，免疫调节剂是Toll-样受体（TLR)激动剂，例如像鸟苷类 似物、脱氮-腺苷类似物、咪唑并喹啉或其衍生物。在优选实施方案中，TLR激动剂是 洛索立宾（Loxoribine)、艾沙托立宾（Isatoribine)、咪喹莫特（Imiquimod)、瑞喹莫德 (Resiquimod)或其衍生物。
[0020] 在一个实施方案中，每种免疫调节剂经由接头与碳水化合物聚合物缀合，并且在 缀合之前每个接头包含能够与所述免疫调节剂或所述碳水化合物聚合物缀合的一个或多 个官能团，并且所述官能团可以任选地包含适合的离去基团或保护基团。
[0021] 在一个实施方案中，每个官能团选自由以下组成的组：醛、酮、甲酰基、肼、酰肼、 胺、酰胺、羧酸、炔、马来酰亚胺、巯基以及卤素。
[0022] 在一个实施方案中，胺的保护基团是BOC基团。
[0023] 在一个实施方案中，甲酰基的离去基团是对硝基苯氧基。
[0024] 在一个实施方案中，每种免疫调节剂经由接头与碳水化合物聚合物缀合，所述接 头包含：
[0025] i)与所述碳水化合物聚合物缀合的官能团（⑴型基团）；
[0026] ii)与所述免疫调节剂缀合的官能团（(ii)型基团）；以及
[0027] iii)间隔基；
[0028] 并且其中每个接头可以是彼此相同的或不同的。
[0029] 在一个实施方案中，（i)型基团是腙。
[0030] 在一个实施方案中，（ii)型基团是氨基甲酸酯基团。
[0031] 在一个实施方案中，间隔基包含一个或多个不同类型的连接单元。在一个实施方 案中，每个连接单元可以独立地选自由以下组成的组：乙二醇和/或丙二醇的聚合物；聚芳 基；氨基酸残基或其衍生物；烷基或烯基链；含有苯基的部分；以及糖类。
[0032] 在一个实施方案中，间隔基包含聚合物，所述聚合物包含1至100个乙二醇和/或 丙二醇单元。例如，间隔基可以包含聚合物，所述聚合物包含1至10个乙二醇和/或丙二 醇单元、1至5个氨基酸残基或其衍生物、以及含有苯基的部分。
[0033] 在一个实施方案中，接头在缀合之后是可裂解的。例如，接头包含选自由酯、氨基 甲酸酯、腙、酰胺以及缩醛组成的组的可裂解的基团。
[0034] 在优选的实施方案中，碳水化合物聚合物和免疫调节剂通过与式I的接头反应连 接：
[0035]
【主权项】
1. 一种包含碳水化合物聚合物的免疫调节化合物，所述碳水化合物聚合物包含甘露 糖，其中所述碳水化合物聚合物与至少一种免疫调节剂缀合。
2. 如权利要求1所述的化合物，其中当存在多于一种免疫调节剂时，每种免疫调节剂 可以是相同的或不同的。
3. 如权利要求1或权利要求2所述的化合物，其中所述碳水化合物聚合物大于约 1000 kDa0
4. 如权利要求1至3中任一项所述的化合物，其中所述碳水化合物聚合物是氧化的。
5. 如权利要求4所述的化合物，其中所述碳水化合物聚合物进一步与至少一种抗原或 编码所述抗原的核酸缀合。
6. 如权利要求4或权利要求5所述的化合物，其中所述氧化的碳水化合物聚合物在与 所述免疫调节剂和/或抗原或编码所述抗原的核酸缀合之前具有至少150个醛基。
7. 如权利要求5或权利要求6所述的化合物，其中所述抗原是病毒的、细菌的、原生动 物的、真菌的、或肿瘤抗原、自身抗原或过敏原。
8. 如权利要求5至7中任一项所述的化合物，其中所述氧化的碳水化合物聚合物与所 述至少一种抗原共价缀合。
9. 如权利要求5至7中任一项所述的化合物，其中所述氧化的碳水化合物聚合物经由 聚阳离子与所述至少一种核酸缀合。
10. 如权利要求1至9中任一项所述的化合物，其中所述碳水化合物聚合物是甘露聚 糖。
11. 如权利要求10所述的化合物，其中所述甘露聚糖来自酵母。
12. 如权利要求10或权利要求11所述的化合物，其中在与所述免疫调节剂和/或抗原 或编码所述抗原的核酸缀合之前并且在用氨基萘-1，3, 6-三磺酸（ANTS)标记之后，所述甘 露聚糖的大小分布基于蛋白质标准是在约150~250kDa之间且/或基于碳水化合物标准 是在约800~3000kDa之间。
13. 如权利要求1至12中任一项所述的化合物，其中所述至少一种免疫调节剂是 Toll-样受体（TLR)激动剂。
14. 如权利要求13所述的化合物，其中所述至少一种TLR激动剂选自：鸟苷类似物、脱 氮-腺苷类似物、咪唑并喹啉及其衍生物。
15. 如权利要求13或权利要求14所述的化合物，其中所述TLR激动剂选自：洛索立宾、 艾沙托立宾、咪喹莫特、瑞喹莫德及其衍生物。
16. 如权利要求1至15中任一项所述的化合物，其中每种免疫调节剂经由接头与所述 碳水化合物聚合物缀合，并且其中在缀合之前每个接头包含能够与所述免疫调节剂或所述 碳水化合物聚合物缀合的一个或多个官能团，并且其中所述官能团可以任选地包含适合的 离去基团或保护基团。
17. 如权利要求16所述的化合物，其中每个官能团选自：醛、酮、甲酰基、肼、酰肼、胺、 酰胺、羧酸、炔、马来酰亚胺、巯基以及卤素。
18. 如权利要求17所述的化合物，其中所述胺的适合的保护基团是BOC基团。
19. 如权利要求17所述的化合物，其中所述甲酰基的适合的离去基团是对硝基苯氧 基。
20. 如权利要求1至19中任一项所述的化合物，其中每种免疫调节剂经由接头与所述 碳水化合物聚合物缀合，所述接头包含： υ与所述碳水化合物聚合物缀合的官能团（α)型基团）； ii) 与所述免疫调节剂