本发明涉及生物提取技术领域，具体涉及一种核桃鞣质的制备方法。
背景技术：
核桃为胡桃科胡桃属植物，全世界均有分布。核桃青皮为核桃未成熟时外部的一层绿色果皮，随着核桃成熟，青果皮会逐渐变黑。长久以来都被视为废物而抛弃，不但污染环境，而且浪费资源。
核桃青皮辛苦涩，有毒，微寒，具有清热、解毒、明目和抗肿瘤的作用。现代研究发现，核桃青皮中主要含有黄酮、萘醌、多酚、脂肪酸及多糖等化合物。鞣质是一类结构复杂的水溶性酚类化合物，具有较好的抗氧化、抗菌、抗病毒、抗肿瘤等作用。现在较少有报道从青皮中提取鞣质的文献，仅少有报道采用甲醇提取，或酶解提取的方式，存在得率低，鞣质纯度低等缺点。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种鞣质纯度高的核桃鞣质的制备方法。
为实现上述发明目的，本发明所采用的技术方案是：
一种核桃鞣质的制备方法，包括以下步骤：取新鲜核桃青皮，置于-30℃～-25℃的条件下放置2～4小时，然后再置于1℃～3℃的条件下放置1～2小时，粗碎，加入石油醚浸泡1～2小时，去除浸泡液，得青皮中间体，加入纯净水提取，过滤，浓缩，干燥，得水提取物；将所述水提取物上样于hpd-300型大孔吸附树脂，用60％～70％的乙醇溶液进行洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥。
作为优选，所述石油醚的加入量为所述核桃青皮重量的2～3倍重量。
作为优选，每次所述提取时，纯净水的加入量为所述青皮中间体的4～10倍重量。
作为优选，所述提取的次数为1～5次，每次提取的时间为1～5小时。
作为优选，所述提取的温度为60℃～90℃。
本发明具有以下技术优势：
采用新鲜青皮经冷冻后，能将青皮中的细胞液冷冻形成冰晶，刺破细胞壁，再提高温度放置，利于提高得率，用石油醚去除极性小的杂质，利于纯化，再用水提取，上样于hpd-300型大孔吸附树脂，能将核桃青皮中的鞣质更好地提取出，产品得率高，为0.58g/100g以上，所得鞣质纯度高，经检测，含量高于76.4％。相比青皮原料中的鞣质含量为1.86％左右，取得了显著的进步。
具体实施方式
下面对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明的其中的几个实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
一种核桃鞣质的制备方法，包括以下步骤：取新鲜核桃青皮，置于-28℃的条件下放置3小时，然后再置于2℃的条件下放置2小时，粗碎，加入石油醚浸泡2小时，去除浸泡液，得青皮中间体，加入纯净水提取，过滤，浓缩，干燥，得水提取物；将所述水提取物上样于hpd-300型大孔吸附树脂，用65％的乙醇溶液进行洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥。
其中，石油醚的加入量为所述核桃青皮重量的3倍重量。
每次所述提取时，纯净水的加入量为所述青皮中间体的8倍重量。所述提取的次数为3次，每次提取的时间为3小时。所述提取的温度为80℃。
产品得率为0.68g/100g，鞣质含量79.1％，纯度高。
实施例2
一种核桃鞣质的制备方法，包括以下步骤：取新鲜核桃青皮，置于-25℃的条件下放置4小时，然后再置于3℃的条件下放置2小时，粗碎，加入石油醚浸泡2小时，去除浸泡液，得青皮中间体，加入纯净水提取，过滤，浓缩，干燥，得水提取物；将所述水提取物上样于hpd-300型大孔吸附树脂，用70％的乙醇溶液进行洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥。
其中，石油醚的加入量为所述核桃青皮重量的3倍重量。
每次所述提取时，纯净水的加入量为所述青皮中间体的10倍重量。所述提取的次数为5次，每次提取的时间为5小时。所述提取的温度为90℃。
产品得率为0.58g/100g，鞣质含量76.4％，纯度高。
实施例3
一种核桃鞣质的制备方法，包括以下步骤：取新鲜核桃青皮，置于-30℃的条件下放置2小时，然后再置于1℃的条件下放置1小时，粗碎，加入石油醚浸泡1小时，去除浸泡液，得青皮中间体，加入纯净水提取，过滤，浓缩，干燥，得水提取物；将所述水提取物上样于hpd-300型大孔吸附树脂，用60％的乙醇溶液进行洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥。
其中，石油醚的加入量为所述核桃青皮重量的2倍重量。
每次所述提取时，纯净水的加入量为所述青皮中间体的4倍重量。所述提取的次数为1次，提取的时间为1小时。所述提取的温度为60℃。
产品得率为0.61g/100g，鞣质含量78.6％，纯度高。
实施例4
一种核桃鞣质的制备方法，包括以下步骤：取新鲜核桃青皮，置于-30℃的条件下放置4小时，然后再置于3℃的条件下放置2小时，粗碎，加入石油醚浸泡1小时，去除浸泡液，得青皮中间体，加入纯净水提取，过滤，浓缩，干燥，得水提取物；将所述水提取物上样于hpd-300型大孔吸附树脂，用70％的乙醇溶液进行洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥。
其中，石油醚的加入量为所述核桃青皮重量的2倍重量。
每次所述提取时，纯净水的加入量为所述青皮中间体的6倍重量。所述提取的次数为2次，每次提取的时间为2小时。所述提取的温度为80℃。
产品得率为0.63g/100g，鞣质含量77.2％，纯度高。
对比例1
一种核桃鞣质的制备方法，包括以下步骤：取新鲜核桃青皮粗碎，加入石油醚浸泡2小时，去除浸泡液，得青皮中间体，加入纯净水提取，过滤，浓缩，干燥，得水提取物；将所述水提取物上样于hpd-300型大孔吸附树脂，用65％的乙醇溶液进行洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥。
其中，石油醚的加入量为所述核桃青皮重量的3倍重量。
每次所述提取时，纯净水的加入量为所述青皮中间体的8倍重量。所述提取的次数为3次，每次提取的时间为3小时。所述提取的温度为80℃。
产品得率为0.39g/100g，鞣质含量40.2％。
对比例2
一种核桃鞣质的制备方法，包括以下步骤：取新鲜核桃青皮，置于-28℃的条件下放置3小时，然后再置于2℃的条件下放置2小时，粗碎，加入纯净水提取，过滤，浓缩，干燥，得水提取物；将所述水提取物上样于hpd-300型大孔吸附树脂，用65％的乙醇溶液进行洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥。
其中，每次所述提取时，纯净水的加入量为所述青皮中间体的8倍重量。所述提取的次数为3次，每次提取的时间为3小时。所述提取的温度为80℃。
产品得率为0.52g/100g，鞣质含量47.9％。
对比例3
一种核桃鞣质的制备方法，包括以下步骤：取新鲜核桃青皮，置于-28℃的条件下放置3小时，然后再置于2℃的条件下放置2小时，粗碎，加入石油醚浸泡2小时，去除浸泡液，得青皮中间体，加入纯净水提取，过滤，浓缩，干燥，得水提取物；将所述水提取物上样于d-101型大孔吸附树脂，用65％的乙醇溶液进行洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥。
其中，石油醚的加入量为所述核桃青皮重量的3倍重量。
每次所述提取时，纯净水的加入量为所述青皮中间体的8倍重量。所述提取的次数为3次，每次提取的时间为3小时。所述提取的温度为80℃。
产品得率为0.55g/100g，鞣质含量53.7％。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。