本发明涉及抗肿瘤药物制备技术领域，具体涉及化合物stemphol在制备抗肿瘤药物中的新用途。
背景技术：
海洋环境的多样性造就了海洋微生物的多样性，海洋微生物的多样性又使其具有多种多样的代谢作用，且海洋共生真菌是长期与宿主共同生活的一大类群的特殊微生物，因此，海洋共生真菌能提供多种多样结构类型的生物活性产物。
目前，癌症是引起人类死亡的主要原因之一。据世界卫生组织统计，2020年癌症患病例将增至3000万，且新增癌症患者主要集中在发展中国家。
在癌症的各种治疗手段中，药物治疗占重要地位。因此，抗癌药物仍是多数药企及科研机构的研究热点。海洋环境的特殊性及海洋微生物的多样性，使得海洋微生物具有更大的潜力帮助人类发现新型的抗肿瘤活性天然药物先导化合物。
文献[shingomarumo,hiroyukihattori,masatokatayama.stempholfrompleosporaherbarumasaself-inhibitor.agric.bioi.chem.,1985,49(5),1521-1522]公开了从枯叶格孢腔菌中制备化合物stemphol的方法以及其自我抑制功能。
公开号为cn102372630a公开了从矮茎紫金牛的根茎中分离得到了具有抗肿瘤活性的间苯二酚衍生物，结构式为通式i所示，其中r为碳原子数目从十到十五之间的饱和或不饱和长链取代基。体外抗肿瘤实验表明，所述间苯二酚衍生物对人前列腺癌pc-3、人肺癌a549、人胃癌sgc7901、人乳腺癌mcf-7、人胰腺癌panc-1、人肝癌smmc-7721、人神经胶质瘤u251等多种肿瘤细胞株有明显的抑制作用，可制备成抗肿瘤药物。
虽然公开号为cn1954805a间苯二酚类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用也公开了间苯二酚类化合物具有抗肿瘤活性，但是该申请并没有任何试验方法和数据证明二烷基间苯二酚类化合物stemphol具有抗肿瘤活性，且由于化学结构，极性等因素影响，并不是任意取代基团均具有相同的药理活性。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供化合物stemphol(2-丁基,5-戊基间苯二酚)的新用途，将其应用于制备抗肿瘤药物。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
本发明从海洋节肢动物共生真菌po4中分离提取到活性化合物stemphol，结构式如下：
所述化合物stemphol除了从上述途径获得，还可以通过化学合成或按照背景技术中提到的从枯叶格孢腔菌中制备得到。
体外试验表明，化合物stemphol在微克浓度(μg/ml)水平对人肺腺癌细胞株a549、人乳腺癌细胞株mcf-7具有强烈的细胞毒作用，有效抑制肿瘤细胞的增殖。化合物stemphol具有作为抗肿瘤药物的潜在用途。
本发明提供了化合物stemphol在制备抗肿瘤药物中的应用。所述肿瘤为肺腺癌或乳腺癌。
本发明在机理研究中发现，化合物stemphol在单独作用时或与配体9-cis联用时均能抑制维甲酸x受体(rxra)的转录活性，表明化合物stemphol可能是与rxra相互作用的小分子。
本发明提供了化合物stemphol在制备维甲酸x受体抑制剂中的应用。
本发明还提供了一种抗肿瘤药物组合物，包含作为有效成分的化合物stemphol。
所述抗肿瘤药物组合物，以有效剂量的化合物stemphol作为活性成分，添加药学上可接受的辅料。
所述药学上可接受的辅料包括淀粉、蔗糖、微晶纤维素等填充剂，淀粉浆、羟丙纤维素、明胶、聚乙二醇等粘合剂，硬脂酸镁、微粉硅胶、聚乙二醇类等湿润剂，聚山梨脂、卵磷脂等吸收促进剂，伯洛沙姆、脂肪酸山梨坦、聚山梨脂等表面活性剂，还可以加入香味剂、甜味剂等其它辅剂。
药物的剂型可以是片剂、丸剂、粉剂、分散片、小药囊剂、酏剂、混悬剂、乳剂、溶液剂、糖浆剂、气雾剂、胶囊、注射液、搽剂、栓剂等。上述各种剂型可采用常规方法进行制备。
给药途径为肠内给药或非肠内给药，包括口服、肌肉注射、皮下注射、静脉注射等。
本发明具备的有益效果：
本发明提供了化合物stemphol(2-丁基,5-戊基间苯二酚)在抑制肿瘤细胞增殖方面以及抑制维甲酸x受体转录活性方面的新用途，为研究开发新型抗肿瘤药物提供了一种先导化合物。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明进行详细描述，但本发明的实施不仅限于此。
实施例所用材料：海洋节肢动物共生真菌po4。
人肺腺癌细胞株a549、人乳腺癌细胞株mcf-7。
实施例1
1、菌种的采集、分离及鉴定
2013年5月从浙江省舟山市朱家尖镇东沙海域(e122°22'54”,n29°56'28”)采集活的海蟑螂(ligiaoceanic)，将其活体用无菌海水浸泡后解剖，将肠道截面接种于1/2pda培养基平板，待真菌生长后，挑取各真菌群落平板划线，置于28℃培养5～7天，根据菌落大小、形状、颜色等培养形态差异进行初步筛选并纯化。将多次纯化后的菌株接种于营养琼脂斜面，接到20％甘油中，-80℃保存在浙江大学海洋学院海洋生物研究所。选取真菌po4作为研究对象，经26srdna鉴定为格孢腔菌属(pleosporasp.)。
2、海洋节肢动物共生真菌po4的发酵培养
使用pdb培养基进行发酵，每500ml锥形瓶中装200ml的培养液，从28℃培养的pda培养基上取适量菌体，接种于2瓶pdb液体培养基中，于28℃静置培养7天后作为种子液，适当摇匀取4ml菌液接种于50瓶pdb培养液中，28℃静置培养30天。
3、活性化合物的分离提取
将完成发酵培养过程的菌体和菌液混合物使用八层医用脱棉纱布过滤，得到菌液和菌体，分别用乙酸乙酯萃取其菌液部分，用甲醇提取其菌体部分，提取物经tlc和hplc分析显示组分大致相同，合并得到7.8g的粗提物。将粗提物用10g柱层析硅胶拌样，干法上样至550g硅胶柱，采用梯度洗脱，洗脱顺序为环己烷/乙酸乙酯100:1-1:1，然后二氯甲烷/甲醇90:10-1:1，每个比例用4l溶剂洗脱，利用tlc分析合并后，最终得到14个组分。从组分3分离得到目标化合物stemphol(7.09mg)。
利用波谱、核磁等方法对目标化合物结构进行分析，经查阅文献，确定该化合物为stemphol，结构为：
实施例2化合物stemphol的抗肿瘤活性测定
采用mtt法进行体外抗肿瘤活性测定。
细胞株：肺腺癌细胞株a549和乳腺癌细胞株mcf-7。
化合物stemphol对肺腺癌细胞株a549和乳腺癌细胞株mcf-7的抑制作用见表1。
表1：合物stemphol对肺腺癌细胞株a549和乳腺癌细胞株mcf-7的抑制作用
由表1可知，化合物stemphol对mcf-7和a549肿瘤细胞的ic50值分别为5.46和15.8μg/ml，由此可得，化合物stemphol对mcf-7和a549肿瘤细胞的增殖均有良好的抑制作用。
实施例3化合物stemphol抑制rxra转录活性的测定
化合物stemphol对rxra转录活性的抑制作用见表2。
表2：化合物stemphol对rxra转录活性的抑制作用
由表2可知，化合物stemphol在单独作用和联合9-cis时均能抑制rxra的转录活性，是潜在的可能与rxra相互作用的小分子。