本发明属于农林产品加工技术领域，特别是涉及一种以白果淀粉为原料，采用纳米乳化-交联法制备负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球的方法。
背景技术：
白果是中国特有古老树种银杏的果实，我国的白果资源丰富，产量占全世界的70％。白果具有极高的营养和医疗价值，其作为食疗、滋补、保健食品已有1000多年的历史。近年来由于银杏的快速发展，出现了严重的市场供需问题。行家预测，依我国各地银杏产区的种植情况，10年后全国白果产量将达到30万吨，而届时国际市场需求量只是10万吨左右。目前白果价格，最高每公斤8元/公斤，最低降至4元/公斤，个别地方出现了种银杏果不如种花生果、毁树种田的现象。目前对白果的加工利用，大多是采用传统方式将白果加工成菜肴、罐头、饮料、蜜饯等，白果产品的加工还是处于初级加工水平，而产品的深层次研究和深加工几乎没有，从而导致白果产品的附加值极低，严重阻碍了银杏产业健康持续发展，成为地方政府解决林农经济的当务之急。
白果中淀粉含量极高，约含有60-70％的淀粉。但是目前有关白果淀粉的加工利用和产品开发方面的研究还十分有限。淀粉微球是天然淀粉一种人造衍生物，系为淀粉在引发剂作用下，淀粉上羟基与交联剂进行适度交联而制得一种微球。与其它人工合成的高分子材料相比，淀粉微球因具有生物相容性好、可生物降解性、无毒性、无免疫原性、贮存稳定、原料来源广泛、价格低廉等显著优点，目前已作为靶向制剂的药物载体在鼻腔给药系统、动脉栓塞技术、放射性治疗、免疫分析等领域得到很好应用。对于很多无法直接使用，或直接使用疗效不理想的药物，可将其包埋在微球内部或吸附在微球表面，并通过合理设计微球的尺寸、表面性质、缓释性能来达到在所需时间、所需地点、以所需速度释放药物的目的。因此淀粉微球在医学工程中尤其受到关注，常被用作药物载体，应用前景十分广阔。但是有关如何制备白果淀粉微球及其加工工艺的研究，目前国内外尚没有任何报道。
漆酚是一种天然的烷基酚类化合物，研究表明其具有很好的抗肿瘤生物活性，其对人体9种器官29种肿瘤细胞均有抑制作用，漆酚对多种肿瘤细胞均具有细胞毒作用，可通过抑制肿瘤细胞增殖或转移，抑制肿瘤细胞血管再生，从而诱发细胞凋亡或分化，漆酚对白血病、肝癌、肺癌、食道癌、骨髓癌、乳腺癌、结肠癌和前列腺癌等癌症均具有显著的治疗效果，因此漆酚非常有希望用于癌症的治疗。但是漆酚结构不稳定，容易氧化聚合，限制了其在肿瘤药物中的应用，研究表明将药物活性成分负载在生物医药载体上，不仅可明显提高药物的稳定性，而且可提高药物在体内的生物利用度及靶向释药性能等。但是目前国内外还没有将漆酚负载在生物医药载体应用的相关研究报道。
针对以上不足，本发明提出采用纳米乳化-交联技术，制备负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球。该方法以白果淀粉为原料，通过添加fe3o4磁流体，经过纳米乳化-交联反应，使白果淀粉形成表面和内部多孔的可靶向作用的纳米淀粉微球，并通过负载具有抗肿瘤活性的漆酚，制备负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球产品；该产品平均粒径达到150nm以下，且大小均一，分散均匀，比表面积大，其包封率＞85％，载药量＞30％，磁含量＞15mg/g，磁强度＞1emu/g，具有很好的载药及靶向缓释性能，产品负载了天然活性物漆酚，具有很好的抗肿瘤活性，可应用于临床靶向抗肿瘤药物中，附加值极高；另外该产品加工工艺路线简单，反应条件温和，生产成本低，对环境污染小，可以成为工业上生产白果淀粉高附加值产品的一种新技术。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种采用纳米乳化-交联技术制备负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球的方法，该方法绿色安全，操作简单，生产成本低，制备得到的负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球，平均粒径达到150nm以下，且大小均一，分散均匀，比表面积大，不仅具有很好的载药及靶向缓释性能，且具有很好的抗肿瘤活性，可应用于临床靶向抗肿瘤药物中，附加值极高，适合工业化生产。
本发明是通过以下技术方案实现的。
1.一种负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球的制备方法，具体步骤如下：
(1)白果淀粉的分离
将新鲜白果脱壳，粉碎，用浓度为0.3～0.5％的稀碱液浸泡2～3h，匀浆，过筛，静置后倾去上清液，再加浓度为0.3～0.5％的稀碱液低速磁力搅拌过夜，离心，除去上层及底部残渣，水洗淀粉3～4次，再用无水甲醇脱脂24h，45℃干燥48～72h，得到白果淀粉。
(2)靶向纳米白果淀粉微球的制备
称取一定量白果淀粉，加入适量的蒸馏水调匀，淀粉乳的浓度为8～12％，然后用2mol/l的koh溶液调ph值为8～10，置于80℃水浴锅中搅拌至透明，待溶液冷却后再加入白果淀粉质量3～5％的fe3o4磁流体，超声搅拌均匀后作为水相a；量取一定体积的液体石蜡倒入三口烧瓶中，加入液体石蜡质量10～14％的乳化剂，在55℃搅拌10～30min至充分混匀，作为油相b；将制备好的水相a逐滴加入上述油相b中，保持均匀搅拌速度乳化反应30～60min后，加入白果淀粉质量20～30％的n，n′-亚甲基双丙烯酰胺交联剂搅拌2～5min，再加入白果淀粉质量15～25％的引发剂，于60℃条件下交联反应2～4h，反应结束后，离心除去上层油相，下层沉淀依次用乙酸乙酯、无水乙醇、丙酮各洗涤3次，真空冷冻干燥后，即得靶向纳米白果淀粉微球。
(3)负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球的制备
配制质量体积百分比为10～20％的漆酚溶液，然后在其中加入一定量制备好的靶向纳米白果淀粉微球，震荡并超声1～2h，抽滤，并用无水乙醇洗涤，冷风吹干，最终得到负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球。
所述的乳化剂为司盘80或司盘60与吐温80或吐温60组成的混合乳化剂，二者的质量比为2∶1。
所述的水相a和油相b的体积比为1∶6～1∶10。
所述的引发剂为过硫酸钾和亚硫酸氢钠组成的混合引发剂，二者的质量比为2∶1。
所述的漆酚溶液，其溶剂为无水乙醇或丙酮。
所述的靶向纳米白果淀粉微球与漆酚溶液的质量体积百分比为3～6％。
本发明采用稀碱液分离白果淀粉，新鲜白果经过脱壳，粉碎后，用浓度为0.3～0.5％的稀碱液浸泡2～3h，匀浆，过筛，静置后倾去上清液，再加浓度为0.3～0.5％的稀碱液低速磁力搅拌过夜，离心，除去上层及底部残渣，水洗淀粉3～4次，再用无水甲醇脱脂24h，45℃干燥48～72h，得到白果淀粉。
白果中化学成分主要包括蛋白质和淀粉，碱液可使白果中与白果蛋白质结合的白果淀粉的紧密结构变得疏松，同时碱液可破坏蛋白质分子中氢键作用，使某些极性基团发生解离致使蛋白质分子表面具有相同的电荷，从而使蛋白质溶解于碱液中，促进淀粉和蛋白的分离。
本发明对稀碱液浓度进行了考察，分别取脱壳粉碎好的白果种仁100g，用浓度分别为0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％的稀碱液浸泡2h，然后再匀浆，过筛，静置后倾去上清液，再加上述浓度的稀碱液低速磁力搅拌过夜，离心，除去上层及底部残渣，水洗淀粉3次，再用无水甲醇脱脂24h，45℃干燥72h，得到白果淀粉，测定白果淀粉得率和纯度，结果表明，随着碱液浓度的增加，白果淀粉的得率和纯度呈上升趋势，当碱液浓度为0.3％时，白果淀粉得率和纯度达到最大，分别为60.95％和99.86％，再增加碱液浓度，白果淀粉得率和纯度变化不大。因此优选碱液浓度为0.3～0.5％。
本发明采用纳米乳化-交联法制备靶向纳米白果淀粉微球，取一定量的白果淀粉，加入适量的蒸馏水调匀，淀粉乳的浓度控制为8～12％，然后用2mol/l的koh溶液调ph值为8～10，置于80℃水浴锅中搅拌至透明，待溶液冷却后再加入白果淀粉质量3～5％的fe3o4磁流体，超声搅拌均匀后作为水相a；量取一定体积的液体石蜡倒入三口烧瓶中，加入液体石蜡质量10～14％的乳化剂，在55℃条件下搅拌10～30min至充分混匀，作为油相b；将制备好的水相a逐滴加入上述油相b中，控制水相a和油相b的体积比为1∶6～1∶10，保持均匀搅拌速度乳化反应30～60min后，加入白果淀粉质量20～30％的n，n′-亚甲基双丙烯酰胺交联剂搅拌2～5min，再加入白果淀粉质量15～25％的引发剂，于60℃条件下交联反应2～4h，反应结束后，离心除去上层油相，下层沉淀依次用乙酸乙酯、无水乙醇、丙酮各洗涤3次，真空冷冻干燥后，即得靶向纳米白果淀粉微球。所述的乳化剂为司盘80或司盘60与吐温80或吐温60组成的混合乳化剂，二者的质量比为2∶1；所述的引发剂为过硫酸钾和亚硫酸氢钠组成的混合引发剂，二者的质量比为2∶1。
本发明考察了靶向纳米白果淀粉微球制备工艺中淀粉乳质量浓度、油水体积比、交联剂用量、乳化剂质量浓度以及引发剂用量等因素对微球吸附性能的影响，结果表明当淀粉乳质量浓度为8～12％，油水体积比为6∶1～10∶1，交联剂用量为20～30％，乳化剂质量浓度为10～14％，引发剂用量为15～25％，白果淀粉微球的吸附量都可达到60mg/g以上；因此优选靶向纳米白果淀粉微球的制备工艺条件为淀粉乳质量浓度为8～12％，油水体积比为6∶1～10∶1，交联剂用量为20～30％，乳化剂质量浓度为10～14％，引发剂用量为15～25％，fe3o4磁流体加入量为3～5％，交联反应时间为2～4h。
本发明通过将天然抗肿瘤活性成分漆酚吸附在微球中制备负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球，以无水乙醇或丙酮为溶剂配制质量体积百分比为10～20％的漆酚溶液，然后在其中加入一定量制备好的靶向纳米白果淀粉微球，控制靶向纳米白果淀粉微球与漆酚溶液的质量体积百分比为3～6％，然后震荡并超声1～2h，抽滤，并用无水乙醇洗涤，冷风吹干，即得到负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球；该产品是一种具有靶向抗肿瘤作用的给药制剂，其可有效提高药物的稳定性和组织选择性，延缓药物释放，增强疗效，降低毒副作用，该产品的制备可实现白果淀粉及漆酚在靶向抗肿瘤药物中的应用。
本发明对负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球的粒径、载药释药性及磁响应性分别进行测定；采用粒度分布测定仪测定微球的平均粒径和粒度分布，结果表明负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球的粒径分布范围为100～150nm，平均粒径为120nm，且大小均一，分散性很好；测定了淀粉微球的载药量及包封率，表明制备的负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球产品具有很好的载药性能，其包封率为85～90％，载药量为20～30％；采用体外静态透析法研究药物的缓释，结果表明，制备的负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球产品具有很好的缓释效果，其在24小时内累积释药量90～95％；采用体外磁场模拟方法评价负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球被磁场吸附定位的效果，结果表明其具有很好磁靶向性，饱和磁强度为0.8～1.5emu/g。
本发明的有益效果：
(1)首次采用纳米乳化-交联技术制备靶向纳米白果淀粉微球，与传统的淀粉微球相比，该靶向纳米白果淀粉微球具有更小的粒径，产品平均粒径达到150nm以下，且大小均一，分散均匀，比表面积大，具有很好的载药、释药性能，包封率＞85％，载药量＞20％，因此制备的靶向纳米白果淀粉微球作为生物医药载体具有很好的应用前景。
(2)本发明制备的靶向纳米白果淀粉微球里添加了fe3o4磁流体，是一种具有磁性的淀粉微球，该磁性纳米白果淀粉微球磁含量＞15mg/g，磁强度＞1emu/g，其在外磁场的作用下可靶向定位到病变部位，从而实现药物缓慢定位释放，提高药物的组织选择性，延缓药物释放，增强疗效，降低毒副作用，达到缓释、长效和靶向治疗的目的。
(3)本发明制备的靶向纳米白果淀粉微球负载了天然抗肿瘤活性成分漆酚，活性成分结构稳定，靶向缓释效果好，释药t1/2比原药延长了约6倍，具有很好的抗肿瘤活性，可应用于临床靶向抗肿瘤药物中。
(4)该发明首次以白果淀粉为原料制备负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球，该产品可应用于靶向药物载体及抗肿瘤药物中，产品附加值极高，该产品的开发对提高白果资源的利用率及经济价值具有重要意义；另外产品加工技术工艺路线简单、反应条件温和，生产成本低，对环境污染小，非常适合工业化生产。
具体实施方式
以下实施例对本发明作进一步详细的描述，本发明不受此限制。
实施例1
白果淀粉的分离
将新鲜白果脱壳，粉碎，用浓度为0.3～0.5％的稀碱液浸泡2～3h，匀浆，过筛，静置后倾去上清液，再加浓度为0.3～0.5％的稀碱液低速磁力搅拌过夜，离心，除去上层及底部残渣，水洗淀粉3～4次，再用无水甲醇脱脂24h，45℃干燥48～72h，得到白果淀粉。
白果中化学成分主要包括蛋白质和淀粉，碱液可使白果中与白果蛋白质结合的白果淀粉的紧密结构变得疏松，同时碱液可破坏蛋白质分子中氢键作用，使某些极性基团发生解离致使蛋白质分子表面具有相同的电荷，从而使蛋白质溶解于碱液中，促进淀粉和蛋白的分离。
本发明研究了碱液浓度对白果淀粉得率和纯度的影响，分别取脱壳粉碎好的白果种仁100g，用浓度分别为0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％的稀碱液浸泡2h，然后再匀浆，过筛，静置后倾去上清液，再加上述浓度的稀碱液低速磁力搅拌过夜，离心，除去上层及底部残渣，水洗淀粉3次，再用无水甲醇脱脂24h，45℃干燥72h，得到白果淀粉，测定白果淀粉纯度，试验结果见表1。
表1不同浓度碱液对白果淀粉得率和纯度的影响
由表1可以看出，随着碱液浓度的增加，白果淀粉的得率和纯度呈上升趋势，当碱液浓度为0.3％时，白果淀粉得率和纯度达到最大，分别为60.95％和99.76％，再增加碱液浓度，白果淀粉得率和纯度变化不大。因此优选碱液浓度为0.3～0.5％。
实施例2
靶向纳米白果淀粉微球的制备
称取一定量的白果淀粉，加入适量的蒸馏水调匀，淀粉乳的浓度控制为8～12％，然后用2mol/l的koh溶液调ph值为8～10，置于80℃水浴锅中搅拌至透明，待溶液冷却后再加入白果淀粉质量3～5％的fe3o4磁流体，超声搅拌均匀后作为水相a；量取一定体积的液体石蜡倒入三口烧瓶中，加入液体石蜡质量10～14％的乳化剂，在55℃条件下搅拌10～30min至充分混匀，作为油相b；将制备好的水相a逐滴加入上述油相b中，控制水相a和油相b的体积比为1∶6～1∶10，保持均匀搅拌速度乳化反应30～60min后，加入白果淀粉质量20～30％的n，n′-亚甲基双丙烯酰胺交联剂搅拌2～5min，再加入白果淀粉质量15～25％的引发剂，于60℃条件下交联反应2～4h，反应结束后，离心除去上层油相，下层沉淀依次用乙酸乙酯、无水乙醇、丙酮各洗涤3次，真空冷冻干燥后，即得靶向纳米白果淀粉微球。
所述的乳化剂为司盘80或司盘60与吐温80或吐温60组成的混合乳化剂，二者的质量比为2∶1。
所述的引发剂为过硫酸钾和亚硫酸氢钠组成的混合引发剂，二者的质量比为2∶1。
本发明研究了靶向纳米白果淀粉微球制备工艺中淀粉乳质量浓度(6、8、10、12、14％)、油水体积比(4∶1、6∶1、8∶1、10∶1、12∶1)、交联剂用量(10、15、20、25、30％)、乳化剂质量浓度(6、8、10、12、14％)以及引发剂用量(10、15、20、25、30％)等因素对靶向纳米白果淀粉微球吸附性能的影响，试验结果见表2。
表2不同工艺条件对靶向纳米白果淀粉微球吸附性能的影响
由表2可以看出，当淀粉乳质量浓度为8～12％，油水体积比为6∶1～10∶1，交联剂用量为20～30％，乳化剂质量浓度为10～14％，引发剂用量为15～25％，白果淀粉微球的吸附量都可达到60mg/g以上。因此优选靶向纳米白果淀粉微球的制备工艺条件为淀粉乳质量浓度为8～12％，油水体积比为6∶1～10∶1，交联剂用量为20～30％，乳化剂质量浓度为10～14％，引发剂用量为15～25％，fe3o4磁流体加入量为3～5％，交联反应时间为2～4h。
实施例3：
负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球的制备
以无水乙醇或丙酮为溶剂配制质量体积百分比为10～20％的漆酚溶液，然后在其中加入一定量制备好的靶向纳米白果淀粉微球，控制靶向纳米白果淀粉微球与漆酚溶液的质量体积百分比为3～6％，然后震荡并超声1～2h，抽滤，并用无水乙醇洗涤，冷风吹干，得到负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球。
漆酚是一种天然的抗肿瘤活性成分，但是漆酚结构不稳定，其单独作为药物使用时，在体内生物利用度差，且缺乏组织选择性，毒副作用大。本发明以白果淀粉为原料制备纳米白果淀粉微球，并将漆酚吸附在该淀粉微球中，制备得到负载漆酚的纳米白果淀粉微球，该产品是一种具有靶向抗肿瘤作用的给药制剂，其可有效提高药物的稳定性和组织选择性，延缓药物释放，增强疗效，降低毒副作用，该产品的制备可实现白果淀粉及漆酚在靶向抗肿瘤药物中的应用。
实施例4：
负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球的粒径、载药释药性、磁响应性的测定
粒径测定：采用粒度分布测定仪测定微球的平均粒径和粒度分布，首先在样品池中加入适量无水乙醇并进行背景测试，直至达到测量要求，然后往样品池中加入适量经超声波分散2min的淀粉微球悬浮液，达到要求的浓度范围后进行测定；结果表明负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球的粒径分布范围为100～150nm，平均粒径为120nm，且大小均一，分散性很好。
载药性能测定：配置0.1mg/ml的漆酚溶液，称取0.2g干燥的靶向纳米白果淀粉微球于烧杯中，加入漆酚溶液50ml，超声10min后，离心取上清液，测定上清液中漆酚的含量，从而分别计算出淀粉微球的载药量及包封率；载药量/％＝微球中药物量/微球质量×100；包封率/％＝微球中药物量/投药量×100。经测定，制备的负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球产品具有很好的载药性能，其包封率为85～90％，载药量为20～30％。
释药性能测定：采用体外静态透析法研究药物的缓释；精确称取0.2g负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球置入透析袋中，并加入3ml释放介质，将透析袋的两端扎紧，平放在含有30ml释放介质的100ml小烧杯中。然后将烧杯置于37℃的恒温水浴锅中，静态透析，每隔一定时间后测定外部介质中药物的累积释放量。结果表明，制备的负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球产品具有很好的缓释效果，其在24小时内累积释药量90～95％。
磁响应性能测定：采用体外磁场模拟方法评价负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球被磁场吸附定位的效果，结果表明其具有很好磁靶向性，饱和磁强度为0.8～1.5emu/g。
实施例5：
负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球的制备
(1)白果淀粉的分离
取新鲜白果1kg脱壳，粉碎，用浓度为0.3％的稀碱液浸泡3h，匀浆，过筛，静置后倾去上清液，再加浓度为0.3％的稀碱液低速磁力搅拌过夜，离心，除去上层及底部残渣，水洗淀粉4次，再用无水甲醇脱脂24h，45℃干燥72h，得到白果淀粉610.2g，纯度为99.85％。
(2)负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球的制备
取白果淀粉100g，加入1250ml的蒸馏水调匀，淀粉乳的浓度为8％，然后用2mol/l的koh溶液调ph值为8，置于80℃水浴锅中搅拌至透明，待溶液冷却后再加入3g的fe3o4磁流体，超声搅拌均匀后作为水相a；量取1000ml的液体石蜡倒入三口烧瓶中，加入100g的乳化剂(司盘80∶吐温80＝2∶1)，在55℃搅拌30min至充分混匀，作为油相b；取制备好的水相a130ml逐滴加入上述油相b中，保持均匀搅拌速度乳化反应60min后，加入25g的n，n′-亚甲基双丙烯酰胺交联剂搅拌4min，再加入20g的引发剂(过硫酸钾∶亚硫酸氢钠＝2∶1)，于60℃条件下交联反应3h，反应结束后，离心除去上层油相，下层沉淀依次用乙酸乙酯、无水乙醇、丙酮各洗涤3次，真空冷冻干燥后，即得靶向纳米白果淀粉微球。
以无水乙醇为溶剂配制质量体积百分比为15％的漆酚溶液500ml，然后在其中加入20g制备好的靶向纳米白果淀粉微球，震荡并超声1h，抽滤，并用无水乙醇洗涤，冷风吹干，最终得到负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球。经测定，其平均粒径为125nm，包封率为88.5％，载药量为24.6％，24小时内累积释药量93.5％，饱和磁强度为1.1emu/g。
实施例6：
负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球的制备
(1)白果淀粉的分离
取新鲜白果1kg脱壳，粉碎，用浓度为0.4％的稀碱液浸泡3h，匀浆，过筛，静置后倾去上清液，再加浓度为0.4％的稀碱液低速磁力搅拌过夜，离心，除去上层及底部残渣，水洗淀粉3次，再用无水甲醇脱脂24h，45℃干燥60h，得到白果淀粉620.5g，纯度为99.39％。
(2)负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球的制备
取白果淀粉100g，加入1000ml的蒸馏水调匀，淀粉乳的浓度为10％，然后用2mol/l的koh溶液调ph值为9，置于80℃水浴锅中搅拌至透明，待溶液冷却后再加入4g的fe3o4磁流体，超声搅拌均匀后作为水相a；量取1000ml的液体石蜡倒入三口烧瓶中，加入120g的乳化剂(司盘80∶吐温60＝2∶1)，在55℃搅拌20min至充分混匀，作为油相b；取制备好的水相a160ml逐滴加入上述油相b中，保持均匀搅拌速度乳化反应40min后，加入22g的n，n′-亚甲基双丙烯酰胺交联剂搅拌5min，再加入18g的引发剂(过硫酸钾∶亚硫酸氢钠＝2∶1)，于60℃条件下交联反应4h，反应结束后，离心除去上层油相，下层沉淀依次用乙酸乙酯、无水乙醇、丙酮各洗涤3次，真空冷冻干燥后，即得靶向纳米白果淀粉微球。
以无水乙醇为溶剂配制质量体积百分比为12％的漆酚溶液500ml，然后在其中加入25g制备好的靶向纳米白果淀粉微球，震荡并超声1.5h，抽滤，并用无水乙醇洗涤，冷风吹干，最终得到负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球。经测定，其平均粒径为120nm，包封率为89.2％，载药量为21.5％，24小时内累积释药量92.8％，饱和磁强度为1.2emu/g。
实施例7：
负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球的制备
(1)白果淀粉的分离
取新鲜白果1kg脱壳，粉碎，用浓度为0.3％的稀碱液浸泡3h，匀浆，过筛，静置后倾去上清液，再加浓度为0.3％的稀碱液低速磁力搅拌过夜，离心，除去上层及底部残渣，水洗淀粉3次，再用无水甲醇脱脂24h，45℃干燥48h，得到白果淀粉615.6g，纯度为99.28％。
(2)负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球的制备
取白果淀粉100g，加入900ml的蒸馏水调匀，淀粉乳的浓度为11％，然后用2mol/l的koh溶液调ph值为10，置于80℃水浴锅中搅拌至透明，待溶液冷却后再加入5g的fe3o4磁流体，超声搅拌均匀后作为水相a；量取1000ml的液体石蜡倒入三口烧瓶中，加入110g的乳化剂(司盘60∶吐温80＝2∶1)，在55℃搅拌30min至充分混匀，作为油相b；取制备好的水相a170ml逐滴加入上述油相b中，保持均匀搅拌速度乳化反应50min后，加入28g的n，n′-亚甲基双丙烯酰胺交联剂搅拌3min，再加入24g的引发剂(过硫酸钾∶亚硫酸氢钠＝2∶1)，于60℃条件下交联反应2.5h，反应结束后，离心除去上层油相，下层沉淀依次用乙酸乙酯、无水乙醇、丙酮各洗涤3次，真空冷冻干燥后，即得靶向纳米白果淀粉微球。
以无水乙醇为溶剂配制质量体积百分比为16％的漆酚溶液500ml，然后在其中加入15g制备好的靶向纳米白果淀粉微球，震荡并超声2h，抽滤，并用无水乙醇洗涤，冷风吹干，最终得到负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球。经测定，其平均粒径为118nm，包封率为86.4％，载药量为26.0％，24小时内累积释药量94.1％，饱和磁强度为1.4emu/g。
实施例8：
负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球的制备
(1)白果淀粉的分离
取新鲜白果1kg脱壳，粉碎，用浓度为0.4％的稀碱液浸泡2h，匀浆，过筛，静置后倾去上清液，再加浓度为0.4％的稀碱液低速磁力搅拌过夜，离心，除去上层及底部残渣，水洗淀粉3次，再用无水甲醇脱脂24h，45℃干燥72h，得到白果淀粉622.3g，纯度为99.75％。
(2)负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球的制备
取白果淀粉100g，加入850ml的蒸馏水调匀，淀粉乳的浓度为11.8％，然后用2mol/l的koh溶液调ph值为9，置于80℃水浴锅中搅拌至透明，待溶液冷却后再加入4g的fe3o4磁流体，超声搅拌均匀后作为水相a；量取1000ml的液体石蜡倒入三口烧瓶中，加入130g的乳化剂(司盘60∶吐温60＝2∶1)，在55℃搅拌25min至充分混匀，作为油相b；取制备好的水相a140ml逐滴加入上述油相b中，保持均匀搅拌速度乳化反应60min后，加入23g的n，n′-亚甲基双丙烯酰胺交联剂搅拌4min，再加入16g的引发剂(过硫酸钾∶亚硫酸氢钠＝2∶1)，于60℃条件下交联反应3h，反应结束后，离心除去上层油相，下层沉淀依次用乙酸乙酯、无水乙醇、丙酮各洗涤3次，真空冷冻干燥后，即得靶向纳米白果淀粉微球。
以无水乙醇为溶剂配制质量体积百分比为18％的漆酚溶液500ml，然后在其中加入18g制备好的靶向纳米白果淀粉微球，震荡并超声1h，抽滤，并用无水乙醇洗涤，冷风吹干，最终得到负载漆酚的靶向纳米白果淀粉微球。经测定，其平均粒径为120nm，包封率为89.1％，载药量为28.3％，24小时内累积释药量92.6％，饱和磁强度为1.0emu/g。