本发明涉及一种甘草三萜酸的制备方法，更具体地说，本发明涉及一种甘草三萜酸的层析纯化制备方法，属于甘草三萜酸纯化制备技术领域。
背景技术：
甘草为豆科(Leguminosae)甘草属(Glycyrrhiza)植物干燥的根和根茎，是我国重要的大宗药材之一。甘草中的主要活性成分为甘草酸(glycyrrhizic acid)，被广泛用于医药、食品、化工等领域，具有广泛的市场前景和应用价值。甘草中已鉴定得到以甘草酸、甘草次酸及其衍生物为主的60多种三萜酸，甘草的许多药理作用都与三萜酸有直接关系。大孔树脂层析技术是一种常用于包括中成药有效成分在内的天然产物的分离纯化技术。近三十年来该技术已获得广泛的应用。根据甘草三萜的物理化学性质以及其化学结构中存在疏水部位，因此可以采用疏水型大孔吸附树脂对其吸附分离和纯化。
现有技术中的纯化制备方法制得的产品纯度较低。
技术实现要素：
本发明旨在解决现有技术中的纯化制备方法的问题，提供一种甘草三萜酸的层析纯化制备方法，该方法能够纯化制得纯度较高的甘草三萜酸产品。
为了实现上述发明目的，其具体的技术方案如下：
一种甘草三萜酸的层析纯化制备方法，其特征在于：包括以下工艺步骤：
A、准确量取D140大孔吸附树脂，转移至层析柱内用酒精洗至流出液于水中不产生白色浑浊，用去离子水洗净层析柱内大孔树脂内的酒精；
B、准确称取甘草三萜提取物，溶解于去离子水中，备用；
C、以20ml/h的流速使配制好的甘草三萜提取物溶液通过层析柱；用去离子水洗去层析柱内残留的皂苷溶液；用的酒精洗脱树脂吸附的甘草三萜提取物，上述洗脱液再以10ml/h的流速通过脱色树脂层析柱；
D、收集流出液；浓缩即得产品。
本发明在步骤A中，所述D140大孔吸附树脂为20ml。
本发明在步骤B中，所述甘草三萜酸提取物为20g，去离子水为200ml。
本发明在步骤C中，所述酒精味80-85%的酒精。
本发明带来的有益技术效果：
本发明采用大孔吸附树脂层析法吸附有效成分甘草三萜，使甘草三萜提取物得到纯化，再采用脱色树脂去除色素等杂质，使甘草三萜提取物获得进一步的纯化。根据目前甘草三萜产品纯度品位不高的不足，选用国产商品化的大孔吸附树脂D140对甘草总三萜酸的提取物进行吸附纯化，获得了纯度较佳的甘草三萜酸。
具体实施方式
实施例1
一种甘草三萜酸的层析纯化制备方法，包括以下工艺步骤：
A、准确量取D140大孔吸附树脂，转移至层析柱内用酒精洗至流出液于水中不产生白色浑浊，用去离子水洗净层析柱内大孔树脂内的酒精；
B、准确称取甘草三萜提取物，溶解于去离子水中，备用；
C、以20ml/h的流速使配制好的甘草三萜提取物溶液通过层析柱；用去离子水洗去层析柱内残留的皂苷溶液；用的酒精洗脱树脂吸附的甘草三萜提取物，上述洗脱液再以10ml/h的流速通过脱色树脂层析柱；
D、收集流出液；浓缩即得产品。
实施例2
本发明在步骤A中，所述D140大孔吸附树脂为20ml。
本发明在步骤B中，所述甘草三萜酸提取物为20g，去离子水为200ml。
本发明在步骤C中，所述酒精味80%的酒精。
实施例3
本发明在步骤A中，所述D140大孔吸附树脂为20ml。
本发明在步骤B中，所述甘草三萜酸提取物为20g，去离子水为200ml。
本发明在步骤C中，所述酒精味82%的酒精。
实施例4
本发明在步骤A中，所述D140大孔吸附树脂为20ml。
本发明在步骤B中，所述甘草三萜酸提取物为20g，去离子水为200ml。
本发明在步骤C中，所述酒精味85%的酒精。