用鞘内丹曲洛林治疗痉挛的利记博彩app

本专利申请要求2013年12月5日提交的美国临时专利申请号61/912,120的优先权和权益，该临时专利申请的公开内容在此以引用的方式整体并入。

发明领域

本发明涉及一种用鞘内施加的丹曲洛林治疗痉挛患者的方法。

发明背景

痉挛是在许多神经病症如中风、大脑性麻痹、脊髓损伤和多发性硬化之后的常见继发性致残病状。其特征在于增加的肌张力(张力过高)、增加的非随意躯体反射(反射亢进)、阵挛以及痛苦的肌肉痉挛和增加的响应于拉伸的抗性[Kheder&Nair，2012]。用于痉挛的药物疗法是针对症状的，其目的是增加功能能力和缓解不适。

丹曲洛林是用于治疗痉挛的FDA批准的口服药物[Kita&Goodkin，2000]。全身性施用的丹曲洛林(尤其是在高剂量下)有效降低肌肉僵硬和疼痛，并且改善许多患者的生命质量[Pinder等人，1977；Ketel&Kolb，1984]，但不幸的是一些严重副作用如胎儿肝毒性[Chan，1990；Strommen，2013]和全身肌肉无力[Verrotti等人，2006]的风险也随着剂量增加而显著增加，特别是在高于400mg/天的剂量下[丹曲洛林FDA批准的标签]，这常常限制丹曲洛林的临床效用[Strommen，2013]。

在过去十年中，新的慢性痉挛动物模型的可用性[Bennett等人， 2004；Marsala等人，2005]显著促进对痉挛的潜在病理生理学和抗痉挛药物的作用机制的理解[Murray等人，2010]，以及测试新疗法和新颖药物候选物的功效[Kakinohana等人，2012]。

虽然丹曲洛林在痉挛中的治疗功效通常被认为是通过其对骨骼肌的收缩机制的直接作用以减少收缩力来产生[Pinder等人，1977；Kheder&Nair，2012；另参见丹曲洛林FDA批准的标签中的“临床药理学”部分]，但丹曲洛林的另外作用位点尚未深入探索和在适当的动物模型中进行测试。与全身性(如口服或静脉内)药物施用相比，在作用部位处的局部药物递送(如鞘内，如在用于治疗痉挛的巴氯芬的情况下[Kita&Goodkin，2000；Kheder&Nair，2012])常常可提高功效，并且显著减少所需药物的量，这通常会显著减少全身性副作用。

EP2548594提及鞘内巴氯芬药物剂型和相关递送系统。

US20120040970提及一种用于通过经由鼻途径施用将单独或与其它化合物组合的丹曲洛林或其衍生物快速且可靠地递送至全身循环以在恶性高热(MH)、痉挛和迷幻药中毒的治疗或预防中产生有益作用的快速发作的方法。

US20070065463提及用治疗有效量的麦角生物碱、骨骼肌松弛剂(例如，丹曲洛林)、血清素激动剂及其组合治疗偏头痛和/或丛集性头痛、肌肉扭伤、肌肉痉挛、痉挛、紧张性头痛、紧张相关偏头痛以及伴有肌肉紧张和疼痛的相关病状的局部制剂和方法。

参考文献

Chan CH.(1990)Dantrolene sodium and hepatic injury.Neurology，40：1423-7.

Bennett DJ，Sanelli L，Cooke CL，Harvey PJ，Gorassini MA.(2004)Spastic long-lasting reflexes in the awake rat after sacral spinal cord injury.J Neurophysiol，91：2247-2258.

丹曲洛林FDA批准的标签：http：//dailymed.nlm.nih.gov/dailyme d/lookup.cfm？setid＝c3c45b27-f786-456e-95d6-2e38ef36190a

Ketel WB，Kolb ME.(1984)Long-term treatment with dantrolenesodium of stroke patients with spasticity limiting the return of function.Curr Med Res Opin，9：16116-9.

Kheder A，Nair KP.(2012)Spasticity：pathophysiology，evaluation and management.Pract Neurol.2012年10月；12(5)：289-98.

Kita M，Goodkin DE.(2000)Drugs used to treat spasticity.Drugs，59：487-495.

Marsala M，Hefferan MP，Kakinohana O，Nakamura S，Marsala J，Tomori Z.(2005)Measurement of peripheral muscle resistance in rats with chronic ischemia-induced paraplegia or morphine-induced rigidity using a semi-automated computer-controlled muscle resistance meter.J Neurotrauma.22：1348-1361.

Kakinohana O等人，(2012)Combinational spinal GAD65gene delivery and systemic GABA-mimetic treatment for modulation of spasticity.PLoS One，7(1)：e30561.

Murray KC等人，(2010)Recovery of motoneuron and locomotor function after spinal cofd injury depends on constitutive activity in 5-HT2_C receptors.Nat Med，16：694-700.

Pinder RM，Brogden RN，Speight TM，Avery GS.(1977)Dantrolene sodium：a review of its pharmacological properties and therapeutic efficacy in spasticity.Drugs，13：3-23.

Strommen JA.(2013)Management of spasticity from spinal cofd dysfunction.Neurol Clin，31：269-286.

Verrotti A，Greco R，Spalice A，Chiarelli F，Iannetti P(2006)Pharmacotherapy of spasticity in children with cerebral palsy.Pediatr Neurol，34：1-6.

发明概述

本发明提供一种用鞘内施加的治疗有效量的丹曲洛林(呈不同形式、溶液、聚合物等的丹曲洛林)治疗痉挛患者的方法。

附图简述

图1示出丹曲洛林钠的结构。

图2描述大鼠痉挛模型。(A，B)当使用计算机控制的踝旋转装置以(40°/3秒)的速度旋转脚踝时来自清醒但受约束的正常和代表性痉挛大鼠的肌电图(EMG)反应(从腓肠肌记录的)。痉挛的存在是通过脉冲EMG活动的外观(活动性EMG)来鉴别。(C)为了计算在踝背屈期间测试剂对痉挛肌肉活动的抑制百分比，在实验结束时将动物用异氟烷麻醉，并且在异氟烷麻醉下测量的在踝背屈期间的活动性EMG的量值随后用作最大可能作用并在每个痉挛动物中加以限定。在处理之后产生的所有药物治疗数据随后使用在异氟烷麻醉下观察到的最大作用以％进行标准化。

图3示出丹曲洛林的全身性施用(腹膜内(IP)注射)以剂量依赖性方式减少清醒痉挛大鼠中的痉挛活动。在所测试的最高剂量(50mg/kg，单次注射)下，痉挛活动被减少至处理前水平的约30％(减少70％)持续至少2个小时。这些结果证实全身性丹曲洛林在这种痉挛大鼠模型中的功效，这也类似于在人痉挛患者中观察到的功效。

图4示出鞘内(IT)施用的丹曲洛林(单次250μg弹丸注射)具有有效的抗痉挛作用，这至少(如果不超过)与在清醒痉挛大鼠(n＝6)中在最高(50mg/kg)全身性施用的丹曲洛林情况下一样稳健。

图5示出来自那些大鼠中的3只的在IT丹曲洛林注射之后的不同时间记录的代表性肌电图(红色迹线)。在此大鼠模型中实际上消除所有痉挛活动的异氟烷麻醉在实验结束时用作0％(最大抗痉挛作用)的阳性对照。

发明详述

本发明的实施方案

本发明提供一种治疗人受试者的痉挛的方法，所述方法包括向需要此种治疗的所述受试者鞘内施用治疗有效量的丹曲洛林或其药学上可接受的盐。

如本文所用，术语“鞘内(IT)施用”、“鞘内注射”、“鞘内递送”或语法等效物是指注射至脊椎管中的任何地方(脊髓周围的鞘内空间)。在一些实施方案中，根据本发明的“鞘内施用”或“鞘内递送”是指经由脊髓的胸椎、腰椎和骶区段/区IT施用或递送。

丹曲洛林的盐包括药学上可接受的碱加成盐、药学上可接受的金属盐、铵以及烷基化铵盐。金属盐的实例包括锂、钠、钾、镁盐等。碱盐包括但不限于与药学上可接受的阳离子，如钠、钾、锂、钙、镁、铵和烷基铵形成的那些盐。铵和烷基化铵盐的实例包括铵、甲基铵、二甲基铵、三甲基铵、乙基铵、羟乙基铵、二乙基铵、丁基铵、四甲基铵盐等。

丹曲洛林的季铵盐的实例已公开于出版物“Synthesis and skeletal muscle relaxant activity of quaternary ammonium salts of dantrolene and clodanolene”，K.O.Ellis，R.L.Whatie Jr.，G.C.Wright，F.L.Wessels，J.Pharm Sci.，第69卷，第3期，第327-331页，1980年3月中。在一个实施方案中，药学上可接受的盐是钠盐，即，所述化合物具有如在图1中列出的式。

丹曲洛林的鞘内递送可通过弹丸注射或连续输注来进行。弹丸注 射被定义为一次以相对大量(称为大丸剂)注射一种药物(或多种药物)，其是与逐渐施用(例如，静脉内输注)相反的。连续输液被定义为在延长的时间段内施用药物或药物组合(长期施用)。

在一个实施方案中，丹曲洛林可长期施用，即通过连续鞘内输注施用。

在另一个实施方案中，通过连续鞘内输注施用是使用植入泵进行。

在另一个实施方案中，丹曲洛林的施用可潜在地减少或消除来自丹曲洛林的全身性施用的副作用，如肝毒性和全身肌无力。

在另一个实施方案中，丹曲洛林的施用可潜在地产生更佳功效(比较图3和图4中的结果)。

在另一个实施方案中，丹曲洛林是以约0.05mg/kg/天至约6mg/kg/天的剂量鞘内施用。在另一个实施方案中，所述剂量是用鞘内输液泵施用的。

在另一个实施方案中，丹曲洛林是作为单次弹丸剂量鞘内注射施用的。

测定

痉挛大鼠模型

动物：在该测定中使用雄性Sprague-Dawley大鼠(大约350克体重)。将所述大鼠在室温(65-82°F)和30％与70％之间范围内的相对湿度下圈养。房间将用荧光灯照明按每天12小时光照/黑暗循环进行照明。所有动物将自由获取干燥食物。将自由地获得城市用水。

痉挛发展和测量：通过主动脉球囊闭塞使大鼠暴露于瞬时脊髓缺血持续10-12分钟。将在缺血性损伤之后4-8周选择具有充分发展的 痉挛的动物，并且准备用于痉挛测量。痉挛的存在将通过在计算机控制的踝背屈期间测量的外周肌肉抵抗增加和在腓肠肌中测量的EMG(肌电图)活动的相关变化来定义(参见图2)。

由踝背屈诱导的EMG活动增加是痉挛的一致且可靠的量度。在施用丹曲洛林之前，进行基线EMG测量。然后将具有鉴别的痉挛的动物分配至通过腹膜内和鞘内途径用丹曲洛林或媒介物治疗的实验组。

腹膜内给药：腹膜内注射三种不同剂量(5、15、50mg/kg)的丹曲洛林和媒介物(6只大鼠/处理/剂量)。在丹曲洛林施用之后，记录在腹膜内注射之后15、30、60、90和120分钟时EMG的相关变化。然后分析基线EMG活动和踝旋转诱发的EMG活动的变化并且计算处理对痉挛的功效。

鞘内给药：将具有鉴别的痉挛的动物鞘内植入精密塑料(例如，PE-10)导管以用于弹丸药物递送。在鞘内导管植入后两至三天，测量基线痉挛反应，并且然后将动物鞘内注射丹曲洛林(250μg，6只大鼠)并且测量痉挛反应持续2小时。在对照动物(6只大鼠)中仅注射媒介物。

本文中公开的各个和每个参考文献(无论是专利公布/授权的专利还是科学出版物)均出于所有目的以引用的方式并入本文。

应理解，以上描述本发明的优选实施方案并且可在不背离如权利要求书中阐述的本发明的范围的情况下在其中做出修改。