一种富含超氧化物歧化酶的青稞麦绿素的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种富含超氧化物歧化酶的青稞麦绿素的制备方法，为健康食品加工
技术领域。
【背景技术】
[0002] 麦绿素是麦苗经一定的生产工艺加工制成产品的统称，富含黄酮类、维生素、矿物 质、活性酶等多种功能性成分。研究表明麦绿素能够增强人体免疫力，具有很强的抗氧化、 抗衰老功能，可起到润肠通便、降血糖、降血脂、促肠胃吸收等作用。
[0003] 青稞（Highlandbarley)，俗称裸大麦，属禾本科，大麦属，是青藏高原的独有物种 和最具高原特色的农作物。新鲜的青稞苗具有高纤维、高维生素、低脂肪、低糖的特点，富含 超氧化物歧化酶（以下简称S0D)，显著优于普通大麦苗，是最具开发潜力的功能食品原材 料之一。
[0004] 现有技术中对青稞麦绿素中的SOD提取率较低，如文献《青稞麦绿素提取工艺 研究》（范燕青等，《食品工业科技》2011年32卷08期）采用常规方法，得到的SOD酶 活性为53. 86u/g ;而想要得到高SOD活性的麦绿素，需要较高的提取操作条件，中国专利 CN101810271A公开了一种青稞麦绿素的制备方法，预处理后采用酶解破壁技术，酶解中纤 维素酶与青稞苗浆的重量比是1 : 1000~10000,温度30~60°C、PH值为3. 5~6,搅拌 酶解时间为〇. 5~4小时；再以榨汁机榨汁，残渣加水浸润0. 5~1. 5小时后，再次榨汁，干 燥得成品。上述酶解技术操作繁琐、要求较高，酶保存不易，其中只提及SOD活性提高40% 并无具体数值。中国专利CN101919512A公开了一种青稞麦绿素的生产工艺，主要采用超声 波破壁提取、过滤后再以超滤-反渗透联合浓缩等步骤制得青稞麦绿素，并加入抗氧化剂 茶多酚避免产品氧化褪色。但其采用的超滤-反渗透联合浓缩技术对操作要求和操作设备 要求较高，生产成本高不易推广，也未提及SOD的具体数值。
[0005] 现有其它产品中对SOD酶含量的描述也常用"高"、"很高"、"丰富"等模糊字眼，另 外，市场上部分麦绿素类产品草腥味较重、冲服分层明显，严重影响食用。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的是提供一种富含超氧化物歧化酶的青稞麦绿素的制备方法，该方法 操作简便，所得麦绿素中SOD活性较高。
[0007] 本发明的技术方案如下：
[0008] -种富含超氧化物歧化酶的青稞麦绿素的制备方法，包括以下步骤：
[0009] 1)预处理：采收青稞幼苗，加水超声处理1-3次，每次加水量为青稞幼苗质量的 15-20倍体积，超声处理20-40min，弃去水；
[0010] 2)灭菌：将步骤1)预处理后的青稞幼苗以饱和蒸汽灭菌，灭菌时间8-12s ;
[0011] 3)干燥和粉碎：将步骤2)灭菌后的麦苗减压干燥，干燥温度60°C -80°c，粉碎，得 青稞幼苗粉；
[0012] 4) SOD提取和分离：将步骤3)制得的青稞幼苗粉加入其质量百分比0. 16-0. 30% 的葡萄糖酸铜，并加入其质量8~12倍体积、pH值为6. 0-7. 5的磷酸盐缓冲溶液中，在 60°C~80°C、80-120r/min搅拌条件下温浸提取IOmin~20min ;滤过得滤渔，收集滤液备 用；
[0013] 5)二次提取：将步骤4)的滤渣加入体积比为50 %~90 %的乙醇溶液进行二次提 取，加入量为步骤3)中青稞幼苗粉质量的8~12倍体积，60°C~80°C、80-120r/min搅拌 条件下温浸I. 〇小时~2. 0小时，过滤，得二次提取液；
[0014] 6)浓缩干燥：合并步骤4)的滤液和步骤5)的二次提取液，加入步骤3)青稞幼苗 粉质量1. 5% -2. 0%的乳酸钙，混合均匀，并于60°C~80°C条件下减压浓缩并干燥，使其水 分含量在3-5 %，得干霄粉；
[0015] 7)粉碎：将步骤6)制得的干膏粉进行粉碎，即得。
[0016] 本发明优选的，
[0017] 步骤1)中采收的青稞幼苗为长20cm~40cm，除去枯萎的、变色的麦苗及其他杂 草。
[0018] 步骤4)中葡萄糖酸铜的加入量为步骤3)青稞幼苗粉质量的0. 16%。
[0019] 步骤4)中磷酸盐缓冲溶液的pH值为6. 5。
[0020] 步骤4)中的提取温度为70°C。
[0021] 步骤4)和步骤5)中搅拌的速度为100r/min。
[0022] 步骤6)中乳酸钙的加入量为步骤3)青稞幼苗粉质量的1. 5%。
[0023] 步骤6)中的干燥方式为6W/g、_80KPa的真空微波干燥。
[0024] 步骤7)中的粉碎为超微粉碎，粒度为350~400目。
[0025] 本发明进一步优选的，
[0026] -种富含超氧化物歧化酶的青稞麦绿素的制备方法，步骤如下：
[0027] 1)预处理：采收长至20cm青稞幼苗，除去枯萎的、变色的麦苗及其他杂草，加水超 声处理2次，每次加水量为青稞幼苗质量的20倍体积，超声处理30min，弃去水；
[0028] 2)灭菌：将步骤1)预处理后的青稞幼苗饱和蒸汽灭菌，灭菌时间8s ;
[0029] 3)干燥和粉碎：将步骤2)灭菌后的麦苗减压干燥，干燥温度75°C，粉碎，得青稞幼 苗粉；
[0030] 4) SOD提取和分离：在恒温加热搅拌罐中加入步骤3)制得的青稞幼苗粉，其质量 0. 16 %的葡萄糖酸铜和其质量10倍体积、pH值为6. 5的磷酸盐缓冲溶液，在70°C、IOOr/ min条件下温浸提取15min ;滤过得滤渣，收集滤液备用；
[0031] 5)二次提取：步骤4)的滤渣加入体积比为70%的乙醇溶液进行二次提取，加入量 为步骤3)中青稞幼苗粉质量的10倍体积，在lOOr/min，70°C条件下温浸I. 0小时，过滤，得 二次提取液；
[0032] 6)浓缩干燥：合并步骤4)的滤液和步骤5)的二次提取液，加入步骤3)青稞幼苗 粉质量1. 5%的乳酸钙，混合均匀，并于70°C条件下减压浓缩并干燥，使其水分含量在4%， 得干膏粉；
[0033] 7)粉碎：将步骤6)制得的干膏粉进行粉碎至400目，即得。
[0034] 本发明中的磷酸盐缓冲溶液是磷酸氢二钠、磷酸二氢钠或磷酸氢二钾、磷酸二氢 钾调配成的；本发明中质量份和体积份的关系为g/ml或kg/1，本发明所述的减压的工艺参 数为-0. 07~-0. 09Mpa，其它未特别说明的均为药学生产上惯用的参数或方法。
[0035] 本发明的有益效果
[0036] 1.本发明的青稞麦绿素富含SOD酶，最优条件下的活性高达251. 6u/g，且具有口 感清新无草腥味、性状佳、营养丰富和服用方便的优点。
[0037] 2.本发明的青稞麦绿素加入饮用水后，溶解迅速，不易沉降，溶液澄清透亮，色泽 均匀饱满，是一款天然、健康的新产品。
[0038] 3.本发明操作简单，采用磷酸盐缓冲溶液和葡萄糖酸铜、乳酸钙结合的形式提取 和浓缩，能最大程度的提取和保留易敏性物质S0D，具有良好的可操作性。
【附图说明】
[0039] 图1为提取过程中葡萄糖酸铜对青稞麦绿素 SOD活性的稳定性影响图，其中，纵坐 标为SOD活性残留百分比（活性残留1)，单位：％，横坐标为时间，单位：h。
[0040] 图2为浓缩干燥过程中乳酸钙加入量对青稞麦绿素 SOD活性的影响图，其中，纵坐 标为SOD活性保留百分比（活性残留2)，单位：％，横坐标为乳酸钙加入量，单位：g。
【具体实施方式】
[0041] 以下实验例和实施例用于对本发明做出进一步的说明，但不限于此。
[0042] 试验例1.青稞麦绿素工艺研究
[0043] 1.提取温度、pH和提取时间对青稞麦绿素中SOD活性的影响
[0044] I. 1试剂和仪器：
[0045] 5个？!1(?!1 = 5.5、6.0、6.5、7.0、7.5)的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液、 Tris-HCl缓冲液（0. lmol/L)、邻笨三酚盐酸溶液（4. 5mmol/L)、10mmol/L盐酸溶液；
[0046] 恒温加热搅拌罐、紫外-可见分管光度计、精密酸度计（0.0 lpH)。
[0047] 1. 2原料：按照本发明实施例1制备的青稞麦苗粉600g。
[0048] L 3方法：配置5个pH (pH = 5. 5、6. 0、6. 5、7. 0、7. 5)的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠 缓冲液。然后进行12份平行操作，如下：称取50g青稞苗粉和SOmg葡萄糖酸铜，分别置于 恒温加热搅拌罐中并加入500mL不同pH的磷酸盐缓冲溶液（其中实验5号pH为5. 5,实验 6号pH为6. 0,实验7号pH为6. 5,实验8号pH为7. 0,实验9号pH为7. 5)，在lOOr/min 条件下，温浸提取并过滤，收集滤液备用。12份平行实验分别以提取温度（实验1、2、3、4)、 pH (实验5、6、7、8、9)、提取时间（实验10、11、12)三者为变量，考察滤液中SOD的活性及口 感（口感打分见表2)。
[0049] 1. 4参考文献：① SOD活性的检测采用邻笨三酚自氧化法，具体操作参见《保健食 品中超氧化物歧化酶（SOD)活性的测定》。②统计学P值的计算采用SPSS17.0数据统计软 件自动分析得出，方法参考单因素的方差分析，每组水平数为10。
[0050] 1. 5结果与分析：
[0051] 结果见表1。
[0052] 表1提取温度、pH和提取时间对青稞麦绿素中SOD活性的影响
[0053]
[0055] 注：上表中，P11 (I. 2)表示试验1和试验