一种用于对虾的复方中草药免疫增强剂的利记博彩app
【技术领域】
[0001]本发明设及一种水产动物养殖用的免疫增强剂,具体设及一种用于对邮的复方中 草药免疫增强剂,属于水产养殖领域。
【背景技术】
[0002 ]近年来对邮养殖业快速发展,根据FAO报道,2012年对邮养殖产量约占世界渔业养 殖产量的12.8%,在水产养殖业中占据举足轻重的地位。但是由于种质资源退化和养殖环境 恶化,对邮养殖病害爆发频繁,严重制约着对邮养殖业的进一步发展。传统防治对邮病害的 方法是使用抗生素,然而抗生素的滥用会导致严重的药物残留、耐药性菌株的产生W及环 境污染等问题。因此寻找抗生素的替代品已成为各国研究的热点。
[0003] 中草药作为绿色天然药物,具有毒副作用小、多功效、不易诱发病原菌耐药性、低 污染、价格低廉、资源丰富等优势,在水产无公害养殖病害防治中具有广阔的应用前景。目 前有关中草药免疫增强剂的研究多为单一中草药,效果不理想,且易使单味中草药用量过 大,产生不利影响。中国专利CN 1215777C,一种对邮用复方中草药免疫增强剂,采用黄巧、 党参、当归、白术、巧等和甘草进行配伍研究,制得了免疫效果不错的复方中草药制剂;专利 号CN 103766620 A,一种凡纳滨对邮复方中草药免疫增强剂由杜仲、黄巧、金银花、柴胡、虎 杖、黄柏、甘草、淫羊蕾、五味子、党参组成,提高了对邮生长速度和邮体耐低氧能力,并降低 了溶藻弧菌攻毒后的邮体死亡率。可见,中草药复方制剂能够带来良好的免疫效果,但上述 的复方制剂中草药种类过于繁多,过犹不及,导致了药物添加量大、有效成分含量使用不 明、作用机理不清等的问题。
【发明内容】
[0004] 针对上述问题,本发明的目的在于提供一种适用于对邮的复方中草药免疫增强 剂,该制剂针对性的选用=种中草药,提取有效成分,添加到饲料中,增强对邮自身免疫力, 提高对邮疾病抵抗力,W弥补现有技术的不足。
[0005] 为达到上述目的,本发明采取的具体技术方案为: 一种用于对邮的复方中草药免疫增强剂,其特征在于,W质量分数计,它包括黄巧多糖 20%-50%、绿原酸20%-50% 和小築碱 20%-50%。
[0006] 优选的,所述的复方中草药免疫增强剂中,黄巧多糖:绿原酸:小築碱的质量比为 2:2:1。
[0007] 优选的,所述的复方中草药免疫增强剂中,黄巧多糖:绿原酸:小築碱的质量比为 1:1:1。
[000引所述的黄巧多糖提取自黄巧,所述的绿原酸提取自杜仲,所述的小築碱提取自黄 连;提取方法(W黄巧为例)为:将黄巧均匀粉碎后,过80目筛,与无水乙醇按照质量体积比 为1:10混匀,70°C回流萃取1.化,重复萃取两次,合并滤液,旋转蒸发除去乙醇制备即得黄 巧多糖;绿原酸和小築碱制备同黄巧多糖制备方法。
[0009] 所述的复方中草药免疫增强剂能够在对邮养殖领域中进行应用,替代传统的抗生 素防治对邮病害,显著提高对邮免疫力,应用于对邮养殖病害防治。
[0010] 本发明的优点和有益效果: (1)提高了对邮血细胞数量。血细胞数量的高低直接反应出非特异性免疫的强弱。在投 喂中草药免疫增强剂的6天内,试验组对邮血细胞数量均显著高于对照组(P<0.05),而投喂 6天内对照组无显著差异。
[0011] (2)提高了对邮血细胞吞隧活性。血细胞吞隧活性是评价对邮细胞免疫的重要指 标,其吞隧能力的高低可直接反映出对邮非特异性免疫能力的大小。在投喂中草药免疫增 强剂的6天内,试验组对邮血细胞吞隧活性均显著高于对照组(P<0.05),而投喂6天内对照 组无显著差异。
[0012] (3)提高了对邮抗菌及溶菌活性。抗菌及溶菌活性是评价对邮体液免疫的重要指 标。在投喂中草药免疫增强剂的6天内,试验组对邮抗菌及溶菌活性均显著高于对照组(P< 0.05),而投喂6天内对照组无显著差异。
[0013] (4)攻毒试验结果表明,试验1组2地免疫保护力为63.5%,4她免疫保护力为55.3%; 试验2组2地免疫保护力为77.6%,4她免疫保护力为72.9%。说明了添加本制剂能显著提高凡 纳滨对邮对哈维氏弧菌的免疫保护力,且随着添加量的增加,保护力增强。
[0014] 试验证明了本发明所提供的免疫增强剂能够明显增强对邮的免疫力,提高对邮疾 病抵抗力;该增强剂选用黄巧、杜仲、黄连=种中药科学配伍,提取出活性成分应用于饲料 中,避免了多种药物产生的不良效应;可W替代抗生素和化学药物的使用,避免了抗生素滥 用,为对邮的病害防治和免疫增强剂的开发开辟一条新途径;本发明制备简单,成本较低, 能够提高对邮养殖业的经济效益。
【附图说明】
[0015]图巧实施例帥对邮血细胞数量的结果图。
[0016] 图2为实施例2中对邮血细胞吞隧活性的结果图。
[0017] 图3为实施例2中对邮血清抗菌活性的结果图。
[0018] 图4为实施例2中对邮血清溶菌活性的结果图。
【具体实施方式】
[0019] W下是本发明设及的具体实施例,对本发明的技术方案做进一步描述,但是本发 明的保护范围并不限于运实施例。凡是不背离本发明构思的改变或等同替代均包括在本发 明的保护范围之内。
[0020] 实施例1: 复方中草药免疫增强剂及养殖饲料的制备 首先制备中草药活性成分,分别将黄巧、杜仲和黄连均匀粉碎后,与无水乙醇按照1:10 的质量体积比混匀,70°c回流萃取1.化,重复萃取两次,合并滤液,旋转蒸发除去乙醇制备 成有效成分提取物,即分别制得黄巧多糖、绿原酸和小築碱。将所得的中草药提取物溶于水 后均匀喷洒在基础饲料表面,再利用鱼油包裹饲料,惊干即得到添加有免疫增强剂的基础 饲料。
[0021] 按照上述的制备方法分别制备两种不同浓度的增强剂及相应的养殖饲料。W质量 分数计,一种免疫增强剂包括每千克饲料添加黄巧多糖Ig、绿原酸Ig和小築碱〇.5g;另一种 免疫增强剂包括每千克饲料添加黄巧多糖Ig、绿原酸Ig和小築碱Ig。
[0022] 上述中草药有效成分的含量可W按照现有文献所提供的方法进行测定。黄巧多糖 含量的测定方法参照:山东产黄巧中黄巧多糖和黄巧甲巧的含量测定,山东中医药大学学 报,2008年5月第32卷第3期;绿原酸含量的测定方法参照:高效液相色谱法测定杜仲中绿原 酸的含量,Qiinese Journal of Information on TCM, 2006,13(1);小築碱含量的测定方 法参照:英连己布膏中盐酸己马汀和小築碱的药动学研究,中国实验方剂学杂志,2011年3 月第17卷第5期。
[0023] 实施例2: 复方中草药免疫增强剂对凡纳滨对邮非特异性免疫力的影响 本试验中,发明人将实施例1制备的两种含有中草药免疫增强剂的饲料饲喂凡纳滨对 邮,通过分析凡纳滨对邮的非特异性免疫指标,研究本发明对提高凡纳滨对邮免疫力的效 果。
[0024] 1材料与方法 1.1材料 试验用凡纳滨对邮化itopenaeus vannamei)购于青岛市峨山区沙子口对邮养殖厂,体 重15.7 ± 2.3g,生物学体长10.8 ± 1.2cm,将凡纳滨对邮饲养于50cm X 60cm X 40cm的塑料水 箱内,每箱随机放养60尾邮。养殖条件为:水溫22.9±0.5°C,盐度为34,pH 8.0±0.3,日换 水2次,日换水量为1/2,连续充气。暂养期间投喂对邮基础饲料。
[0025] 试验用基础饲料的成分为:W质量分数计,鱼粉34%、豆巧20%、花生巧16.4%、小麦 粉22%、大豆憐脂5%、多种维生素0.6%、复合矿物质2%。经实验计算饲料中营养成分为:W质 量分数计,粗蛋白42.4%、粗脂肪7.2%、灰分8.4%。
[0026] 1.2 方法 1.2.1试验设计 将