尖头塘鳢与云斑尖塘鳢杂交育种方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种鱼类远缘杂交育种方法，尤其涉及尖头塘鳢与云斑尖塘鳢不同属间鱼类的杂交育种方法，属于水产动物杂交育种技术领域。
【背景技术】
[0002]尖头塘體(Eleotrisoxycephala)隶属于解形目(Perciformes)、鰕虎鱼亚目(Gob1idei )、塘體科(Eleotridae)、塘體属(Eleotris)的鱼类，俗名黑舆壳、什抛、竹壳、黑淋哥，是一种较为名贵的淡水小型经济鱼类。在我国大陆，其主要分布于上海、江苏、浙江、福建、广东、广西、海南等，属于暖水性鱼类。尖头塘鳢个体较小，I龄体重一般15-50克/尾，体重250克以上极为少见，但肉质好，市场价格高，规格150g/尾以上达140元/kg，深受消费者的青睐。但由于生长速度慢，产量低，人工养殖性能差，难以开展规模化养殖生产。因此，如何通过基因改良，提高其生长速度及养殖性能是其产业化、规模化发展的关键所在。
[0003]云斑尖塘體(OxyeleotrismarmoratusBleeker),俗名泰国舆壳鱼(Marblegoby)，属塘體科(Eleotridae)、尖塘體属(Oxyeleotris)，我国自上1986年从东南亚引种以来，现已成为我国珠三角地区的重要淡水养殖对象。其体型大、生长速度快，适宜条件下I龄体重可达500g/尾，是热带、亚热带地区的优质暖水性鱼类。目前未见有关于尖头塘鳢与云斑尖塘鳢杂交育种的方法。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是提供尖头塘鳢与云斑尖塘鳢杂交育种方法。
[0005]为达到上述目的，本发明采用以下技术方案:
尖头塘鳢与云斑尖塘鳢杂交育种方法，包括以下步骤:
O亲鱼的选择
选择I龄以上、体重50~150g、并处于性腺发育成熟期的尖头塘鳢和2~3龄、体重500g以上、并处于性腺发育成熟期的云斑尖塘鳢作为杂交繁育亲本；
2)亲鱼的强化培育
尖头塘鳢与云斑尖塘鳢亲鱼分池培育，每万尾亲鱼一次性投放活饲料鱼3000?4000kg，之后每15d每万尾亲鱼补充1500?2000kg活饲料鱼；或者投喂冰鲜鱼浆和人工饲料，同时添加维生素与矿物质，每日投喂两次，日投饲量为亲鱼重量的8?12%，投喂量上午占1/3，下午占2/3 ；
3)亲鱼的雌雄鉴别与性比
进入繁殖季节，鉴别亲鱼的性别，雌鱼腹部膨大，卵巢轮廓明显，生殖突末端圆钝呈扇形、淡红色，生殖孔两侧隆起、无黑色素点；雄鱼体色深，腹部膨大不明显，生殖突末端尖细呈三角形、白色，泄殖孔周边有黑色素点，挤压腹部有乳白色精液流出；挑选尖头塘鳢为母本，云斑尖塘鳢为父本，两者雌雄配对为2~3:1 ; 4)人工催产与受精
人工催产采用一针注射法，尖头塘鳢雌鱼注射促黄体素释放激素类似物2号和马来酸地欧酮，云斑尖塘鳢雄鱼注射人绒毛膜促性腺性激素，在水温28?30°C时48?54h达效应时间；
人工催产达到效应时间后，挤压卵巢，取出批量卵子，放于盛有生理盐水的鱼碟上，然后通过挤压精巢，加入精液，并用鸡毛搅拌或抖动鱼碟，使受精均匀，之后均匀倒于盛有淡水的20cm*30cm的40目网片上，每张网片10000~15000粒受精卵，受精过程5min内完成；
5)受精卵的孵化
受精卵附着网片后，用孵化用水清洗2~3遍，将网片浸泡于高锰酸钾溶液中消毒2~3min,消毒后将其悬挂在孵化池中，孵化过程保持充气，孵化池水温25~30°C，溶解氧大于5mg/L，pH值7.5-8.5 ;经过35~40h孵化出膜，再经45~50h卵黄囊消失，开始平游，进入鱼苗培育期；
6)1.2cm鱼苗培育
鱼苗培育阶段在孵化池或移到培育池中进行，培育池面积2m*4m，水深1.0-1.2m，每平方放入仔鱼20~30万尾；平游后仔鱼12~24h内开口摄食，每日早晚各投喂S型臂尾轮虫I次，投喂密度40~50个/mL ;开口后第5~7d，投喂L型臂尾轮虫、枝角类和桡足类幼体；每天排污和换水I次，每次换水1/5 ;苗种出膜后，经培育10~15d，仔鱼生长至1.0-1.5cm，分疏转入3.0cm鱼苗培育阶段；
7)3cm规格鱼苗培育
待鱼苗长至1.0-1.5cm时，选择室内16m2以上水泥池或室外土池进行培育，室内水泥池培育密度为1500~2000尾/m2，投喂水艇蚓或活饲料鱼，每天排污和换水I次，每次换水1/4 ;室外土池培育密度600~800尾/m2，投喂水蚯蚓或活饲料鱼，每日加、换水；经15~20d培育，鱼苗生长至2.5-3.5cm，分筛分规格转入鱼种培育阶段；
8)鱼种培育
将鱼苗收捕分规格转入36m2以上水泥池或室外土池中进行鱼种培育，室内水泥池培育密度为600~800尾/m2，室外土池培育密度为250~300尾/m2，投喂冰鲜鱼浆、水蚯蚓或活饲料鱼，每日加、换水，再经20~30d后培育成主体规格8cm以上鱼种，过筛分级转入成鱼养殖池。
[0006]进一步地，所述活饲料鱼是鲮鱼。
[0007]进一步地，所述冰鲜鱼浆是鱿鱼。
[0008]进一步地，所述人工催产与受精中，每千克尖头塘鳢雌鱼注射40~60 μ g促黄体素释放激素类似物2号和15~20mg马来酸地欧酮，每千克云斑尖塘鳢雄鱼注射400~600IU人绒毛膜促性腺性激素。
[0009]进一步地，所述受精卵的孵化中，网片在孵化池的间距为20cm，行距为30cm。
[0010]进一步地，所述受精卵的孵化中，高锰酸钾溶液的浓度是lppm。
[0011]进一步地，所述1.2cm鱼苗培育中，鱼苗移入培育池时，要求孵化池和培育池水体pH值相差0.3之内，温度相差2°C之内。
[0012]进一步地，该方法还包括步骤9)商品鱼养成:在土塘中养殖，饵料为小型鱼虾或冰鲜鱼浆，经过6~12个月的养殖，体重达150g以上，即达商品鱼规格。
[0013]本发明具有以下有益效果:
本发明采用人工调控手段，选择尖头塘鳢母本与云斑尖塘鳢父本进行远缘杂交，以利用杂交优势提高尖头塘鳢杂交种的生长速度和养殖性能，使杂交子代具备体色好、生长速度快、适温能力强的优点，培育出塘鳢科鱼类新品种，为其规模化、产业化发展提供有效途径与技术支持。
[0014]尖头塘鳢与云斑尖塘鳢为同科不同属鱼类，外表体形十分相似，两者的杂交繁育所得到的杂交种生长速度明显优于尖头塘鳢，I龄体重可达150克/尾以上，体色明显优于尖头塘鳢，而且抗寒寒能力比云斑尖塘鳢提高2~3°C，养殖性能等以明显提高。本发明为塘鳢科鱼类遗传、杂交选育研究提供了重要的途径和方法，为推动及实现本土化的塘鳢科鱼类人工繁殖、产业化发展提供了理论基础及实践经验，具有重大的意义。
【具体实施方式】
[0015]下面结合具体实施例对本发明做进一步的说明:
实施例1
按照以下步骤进行尖头塘鳢与云斑尖塘鳢杂交育种:
1)亲鱼的选择
选择I龄以上、体重50~150g、并处于性腺发育成熟期的尖头塘鳢和2~3龄、体重500g以上、并处于性腺发育成熟期的云斑尖塘鳢作为杂交繁育亲本；
2)亲鱼的强化培育
尖头塘鳢与云斑尖塘鳢亲鱼分池培育，每万尾亲鱼一次性投放活饲料鱼3000?4000kg，之后每15d每万尾亲鱼补充1500?2000kg ；
3)亲鱼的雌雄鉴别与性比
进入繁殖季节，鉴别亲鱼的性别，雌鱼腹部膨大，卵巢轮廓明显，生殖突末端圆钝呈扇形、淡红色，生殖孔两侧隆起、无黑色素点；雄鱼体色较深，腹部膨大不明显，生殖突末端尖细呈三角形、白色，泄殖孔周边有黑色素点，轻轻挤压腹部有乳白色精液流出；挑选尖头塘鳢为母本，云斑尖塘鳢为父本，两者雌雄配对为2~3:1 ;