具有测定器官或组织活力的葡萄糖传感器的转运装置的制造方法
【专利说明】具有测定器官或组织活力的葡萄糖传感器的转运装置
【背景技术】
[0001] 本发明相关技术领域包括器官或组织灌注装置，所述装置能够维持和/或恢复器 官或组织的活力并保存器官或组织供诊断、治疗、保存和/或转运之用。便宜起见，本申请 中，"器官"一词应理解为指器官和/或组织，除非另做说明。
[0002] 器官灌注装置的目的之一在于模拟人体条件，由此维持器官活力直至用于科研、 诊断、治疗或移植。很多时候器官需要保存和/或在不同机构间转运。在灌注中维持和恢 复器官活力的目的之一是减少局部缺血和再灌注损伤。延长正常或近正常运行状态保存时 间也有诸多益处，例如，允许更远的器官转运，允许对器官更长时间的试验、处理和评定。
[0003] 美国专利8, 323, 954记载了一种灌注装置，该装置结合了通过监测某些因素对器 官活力进行监测，所述因素包括器官阻抗（organ resistance)(压力/流量）和/或通过 该器官灌注以及回收的医学流体中的pH、p02、pC0 2、LDH、T/GST、T蛋白、乳酸盐/酯、糖碱剩 余和/或钙离子水平。
【发明内容】
[0004] 概沐
[0005]目前，每年捐献医用的器官成千上万。然而，其中仅少数最终主观评定为有活力并 且是诊断、治疗、保存和/或转运的良好候选器官。因此，需要这样的装置或方法，它们能够 确定可能被其它测评定而丢弃而实则可能有活力的器官，由此提高诊断、治疗、保存和/或 转运可用的器官数量。获得器官或组织时最好能迅速确定器官或组织是否是活的。本申请 记载了一种具有葡萄糖传感器的灌注装置，所述葡萄糖传感器能够检测目标物并根据对产 生的葡萄糖量的感测来定量检测目标物，所述目标物例如生物标记指示器官或组织活力。
【附图说明】
[0006] 图1是本发明器官灌注装置实施方式之一的示意图。
[0007] 图2A和图2B中的示意图举例说明葡萄糖传感器基于识别分子A、识别分子B与目 标物之间的相互作用来检测目标物（分析物）的机制。
【具体实施方式】
[0008] 根据例举的实施方式，本发明提供了一种感测灌流液中生物标记或目标物的装 置。该装置可具有用灌流液灌注器官或组织的灌注回路和与该灌注回路操作性连接的传感 器。所述传感器可具有接有用于检测目标物的识别分子的固相载体，当目标物存在时，所述 识别分子特异性结合所述目标物，基本不结合其它物质。所述传感器还可包括能酶促转化 为葡萄糖的物质和能将该物质催化转化为葡萄糖的酶，所述酶可与识别分子直接或间接相 连，存在目标物时，该酶能将所述物质转化为葡萄糖。所述传感器还可包括葡萄糖计，用于 检测由所述物质产生的葡萄糖。本发明装置可具有通过无线通讯向本发明装置的显示屏或 外部设备或这两者输送信息的处理器，所述信息是关于所述传感器测得的葡萄糖的量和/ 或算得量的信息，以及关于目标物的其它定量信息。优选的是，目标物是器官或组织活力的 指示物。当所述器官是肾脏，所述目标物可以是例如肾损伤分子-I(KIM-I)(亦即T细胞免 疫球蛋白粘蛋白分子CHM-1))，其为肾近曲小管上皮细胞内的1-型跨膜结构糖蛋白。所述 酶可连接MM-I类似物分子，该类似物对识别分子结合的竞争弱于MM-I。或者，所述酶可 连接结合MM-I的分子，该MM-I结合于识别分子。所述活力指示物可以是MM-I之外其 它用于肾脏的物质，还可以是用于其它不同器官的其它物质。
[0009] 固相载体的例子包括微珠和膜。识别分子可包括特异性结合所述目标物的核酸分 子、蛋白质、聚合物或抗体。酶可以是，例如：能够将蔗糖转化为葡萄糖的转化酶、蔗糖酶或 蔗糖酶-异麦芽糖酶，能将麦芽糖转化为葡萄糖的麦芽糖酶，能将海藻糖转化为葡萄糖的 海藻糖酶，能将淀粉转化为葡萄糖的淀粉酶，和能将纤维素转化为葡萄糖的纤维素酶。优选 的是，所诉酶是转化酶。所述传感器可包括多个传感器，其中之一或多个或全部感测对其具 有特异性的目标物。多个传感器检测的可以是同一目标物也可是不同目标物。通过检测葡 萄糖来定量检测目标物的传感器可参考例如美国专利申请公开2012/0315621中所述，本 申请参考并纳入其全部内容。
[0010] 作为示例，实施方式包括测定器官或组织活力的方法。所述方法可包括令传感器 接触经灌流液回路循环的灌流液。所述传感器可具有接有识别分子的固相载体，所述识别 分子特异性结合灌流液中可能存在的活力指征目标物。某些实施方式中，所述方法可包括： 使固相载体在灌流液中存在活力指征目标物时释放出酶；将固相载体与释出的酶分离；令 释出的酶接触能由该酶转化为葡萄糖的物质从而产生葡萄糖；用葡萄糖计检测由该物质产 生的葡萄糖；根据测得的葡萄糖确定器官或组织的活力。作为示例，其它实施方式包括让活 力指征目标物与识别分子结合形成目标物-识别分子复合物；令目标物-识别分子复合物 与连接于第二识别分子的酶接触从而形成目标物-识别分子-酶-识别分子复合物；令酶 与能被该酶转化为葡萄糖的物质接触，由此产生葡萄糖；用葡萄糖计检测由该物质产生的 葡萄糖；根据测得的葡萄糖确定器官或组织的活力。检得产生的葡萄糖能指示灌流液中存 在活力指征目标物，未检得则指示不存在。本发明方法可包括对所述目标物的定量，检得的 所产葡萄糖水平指示灌流液中所述目标物的量。本发明方法可包括将所产葡萄糖量与葡萄 糖基线水平相比较，并根据两者之间的差异定量检测灌流液中活力指征目标物。可用于本 发明方法的灌注装置可参考例如美国专利8, 323, 954,本申请参考并纳入其全部内容。
[0011] 图1为示意图，示例性展示用于器官20的灌注装置10。器官20可优选肝脏、肾 脏、心脏、肺或肠，并可以是任何人或动物、天然或人造、健康、受损或患病器官或组织。该装 置包括放置器官的器官载体，例如盆30。盆30可具有托架，当器官20处于装置10中时就 放置在该托架上。盆30可具有第一过滤器33,能起到颗粒粗滤的作用。较好的是，盆30和 /或所述托架构造成能够在器官20周围形成灌流液浴池。盆30或装置10可具有位于或聚 焦于（focused)所述托架内或近处的温度传感器40。盆30或装置10可具有多个温度传感 器40,由此可提供测量冗度以代偿失效和/或提供多位点温度测量。所述一个或多个温度 传感器40优选红外温度传感器。较好的是，所述一个或多个温度传感器40尽可能靠近托 架内的器官20，这可提高温度传感器40的有效性和准确度，所述温度传感器40最好能提供 能关联到器官20温度的灌流液温度。作为替代或补充，所述一个或多个温度传感器40可 直接测量器官20的温度。
[0012] 盆30最好置于绝热冷却剂容器50的凹内，冷却剂容器50可盛有低温物质，例如 冰、冰水、盐水等。冷却剂容器50可永久性或以可拆卸方式装接到装置10,或者是装置10 整体内的组成部分。这样，所示装置使用中，器官20处于所述托架内，托架位于盆30内，盆 30位于冷却剂容器50内。冷却剂容器50、盆30和托架的构造最好能形成这样的设置：器 官20能够在它与托架不接触冷却剂容器5